治疗性噬菌体制造技术

提供了一种肌病毒科的噬菌体，其包含长度为200kbp或更长的环状排列的双链DNA的基因组；其特征在于所述噬菌体具有以下特征中的任一个或更多个：a)不具有穿孔素基因；和/或b)与沙门氏菌脂多糖结合；和/或c)仅具有一种尾纤维蛋白；以及d)具有与SEQ ID NO.7具有至少95％序列同一性的序列和/或与SEQ IDNO.8具有至少80％序列同一性的序列。适当地，该噬菌体可用于治疗沙门氏菌，特别是在猪和家禽中治疗沙门氏菌。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗性噬菌体
本专利技术涉及可用于预防或治疗沙门氏菌(Salmonella)感染的治疗性噬菌体、此种噬菌体的套组以及此种噬菌体的药物组合物。本专利技术还涉及用于干燥噬菌体溶液的方法和用于制备热稳定噬菌体的方法。
技术介绍
非伤寒沙门氏菌属(Non-typhoidalSalmonellaspp.)是世界范围内食物中毒的主要原因，并且在英国，每年有33,000例人沙门氏菌病的报告。欧洲食品安全管理局(EFSA)估计，11.7％报告的人沙门氏菌病病例是由消费猪肉产品引起的。英国动植物健康局(APHA)的流行病学监测确定，与英国猪相关的五种最流行的沙门氏菌血清型是：鼠伤寒沙门氏菌(S.Typhimurium)、S.4:5:12:i>、S.4:5:12、和德尔卑沙门氏菌(S.Derby)、病牛沙门氏菌(S.Derby)。德尔卑沙门氏菌、S.4,5,12:i>、和鼠伤寒沙门氏菌也在美国5种最流行的血清型之内。此外，在欧盟，鼠伤寒沙门氏菌、S.4,5,12:i>、S.4:5:12和德尔卑沙门氏菌是EFSA报告的最流行的沙门氏菌血清型。研究表明，沙门氏菌的流行和散布在断奶期间以及当市场重量的猪离开农场并被运送到屠宰场进行屠宰时特别增加，这增加了最终消费猪肉产品的躯体污染可能性。这个问题特别令人担忧，因为已经从猪中分离出多重耐药性(MDR)沙门氏菌菌株。可用于治疗猪中的沙门氏菌的抗生素种类正在减少，并且主要担心MDR的传播或人食物链中抗生素残留的存在。
技术实现思路
显然，迫切需要抗生素的替代物来控制沙门氏菌感染。本专利技术人已经分离并表征了噬菌体(靶向并杀伤特定细菌物种的细菌的天然病毒)，其靶向与猪和鸡相关的多重耐药性沙门氏菌菌株。因此，本专利技术提供了一种肌病毒科的噬菌体，其包含长度为200kbp或更长的环状排列的双链DNA的基因组；其特征在于所述噬菌体具有以下特征中的任一个或更多个：a)不具有穿孔素基因；和/或b)与沙门氏菌脂多糖结合；和/或c)仅具有一种尾纤维蛋白；以及d)具有与SEQIDNO.7具有至少95％序列同一性的序列和/或与SEQIDNO.8具有至少80％序列同一性的序列。适当地，提供特征a)至d)中的至少两个，适当地，提供特征a)至d)中的至少三个，适当地，提供特征a)至d)中的至少四个。例如a)和b)；a)和c)；a)和d)；b)和c)；b)和d)；或c)和d)，或a)、b)和c)；或a)、b)和d)；或b)、c)和d)；或a)、c)和d)。优选地，所述噬菌体能够裂解3种或更多种与家禽、猪和/或牛相关的沙门氏菌菌株。例如，以下项中的任一个或更多个：a)25种鼠伤寒沙门氏菌；b)15种S.4,12:i>；c)10种S.4.5,12:i>；d)10种病牛沙门氏菌；e)10种德尔卑沙门氏菌；f)3种S.13,23:i>；g)5种肠炎沙门氏菌(S.Enteritidis)；h)4种婴儿沙门氏菌(S.Infantis)；i)3种S.Ohio；和j)3种S.Seftenberg。适当地，噬菌体能够裂解4种或更多种、5种或更多种、6种或更多种、7种或更多种、8种或更多种、9种或更多种或者10种或更多种与家禽、猪和/或牛相关的沙门氏菌菌株。所述噬菌体可以与保藏编号NCTC18080701；NCTC18080702；NCTC18080703；NCTC18080704；NCTC18080705；或者NCTC18080706的噬菌体中的任一种具有80％-100％的序列同一性。这些保藏于2018年8月7日在欧洲认证细胞培养物保藏中心进行，保藏编号为18080701；18080702；18080703；18080704；18080705；或者18080706。适当地，噬菌体可以从2018年8月7日在欧洲认证细胞培养物保藏中心保藏的保藏编号为18080701；18080702；18080703；18080704；18080705；或者18080706的噬菌体中选择。噬菌体可以存在于套组中，该套组包含两种、三种、四种、五种、六种或更多种上述噬菌体。例如，NCTC18080703和18080704。适当地，套组可以包括18080701；18080702；18080703；18080704；18080705；或18080706中的任一种或其组合，其中表1适当地，噬菌体可以选自SPFM1、3、10、14、15、17和/或19或其组合。适当地，噬菌体可以选自SPFM1至22中的任一种或更多种。适当地，噬菌体可以选自SPFM1至22中的任一种或更多种，不包括SPFM9和SPFM11。适当地，噬菌体可以选自SPFM2、4、10、14、17和/或19中的任一种或更多种。适当地，至少2种、至少3种、至少4种噬菌体可以选自SPFM2、4、10、14、17和/或19。适当地，可以提供SPFM4和17或者SPFM10和14的组合。适当地，可以选择包括SPFM4、10、14和17中任两种的组合。适当地，可以在套组中提供至少一种在pH3下稳定的噬菌体。适当地，用于套组中的噬菌体可以选自2、4或19中的至少一种或其组合。适当地，可以使用耐热降解的噬菌体。适当地，可以选择选自SPFM10和17的噬菌体。适当地，可以选择SPFM10-。适当地，可以选择选自以下的三种噬菌体组合：SPFM4、10和19SPFM10、17和19SPFM2、17和19。适当地，可以选择选自以下的四种噬菌体组合：SPFM10、14、17和19SPFM2、10、14和19SPFM2、4、10和19。表1提供了这些噬菌体的核苷酸登录号以及根据本文所讨论的布达佩斯条约已经进行的噬菌体保藏的详细信息。噬菌体可以是药物组合物的一部分，该药物组合物包含上述噬菌体或套组中的一种或更多种。可替代地，噬菌体可以是动物饲料或消毒剂，其包含上述噬菌体、药物组合物或套组中的任一种。在另一方面，上述噬菌体、套组、药物组合物或动物饲料可用于治疗方法，例如预防性治疗方法。待治疗或预防的疾病可以是家禽、猪或牛中的沙门氏菌感染。因此，提供了根据本专利技术的用于治疗沙门氏菌的噬菌体。适用于在猪和/或家禽(例如鸡)中治疗沙门氏菌。还提供了用于干燥噬菌体溶液以形成粉末的方法，所述方法包括：a)将所述噬菌体与以下项中的任一种或更多种混合；(i)糖；和/或(ii)糖醇；和/或(iii)氨基酸；和/或(iv)聚合物；以及b)干燥所述混合物。适当地，所述方法的特征包括其中：·通过喷雾干燥进行干燥；和/或b)其中所述方法还包括由经干燥的粉末制备片剂或丸剂；·糖是基于葡萄糖的糖，优选海藻糖。·糖醇是甘露醇。·氨基酸是脂肪族氨基酸，优选亮氨酸。用于干燥方法的噬菌体溶液可以包含上述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肌病毒科的噬菌体，其包含长度为200kbp或更长的环状排列(circularlypermuted)的双链DNA的基因组；其特征在于所述噬菌体具有以下特征中的任一个或更多个：/na)不具有穿孔素基因；和/或/nb)与沙门氏菌脂多糖结合；和/或/nc)仅具有一种尾纤维蛋白；/n以及/nd)具有与SEQ ID NO.7具有至少95％序列同一性的序列和/或与SEQ ID NO.8具有至少80％序列同一性的序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180924 GB 1815483.11.一种肌病毒科的噬菌体，其包含长度为200kbp或更长的环状排列(circularlypermuted)的双链DNA的基因组；其特征在于所述噬菌体具有以下特征中的任一个或更多个：
a)不具有穿孔素基因；和/或
b)与沙门氏菌脂多糖结合；和/或
c)仅具有一种尾纤维蛋白；
以及
d)具有与SEQIDNO.7具有至少95％序列同一性的序列和/或与SEQIDNO.8具有至少80％序列同一性的序列。


2.权利要求1所述的噬菌体，其中所述噬菌体能够裂解5种或更多种与家禽、猪和/或牛相关的沙门氏菌菌株。


3.权利要求2所述的噬菌体，其中所述沙门氏菌菌株包含以下血清型中的任一种或更多种：a)25种鼠伤寒沙门氏菌(S.Typhimurium)；b)15种S.4,12:i>；c)10种S.4.5,12:i>；d)10种病牛沙门氏菌(S.Bovismorbificans)；和e)10种德尔卑沙门氏菌(S.Derby)。


4.权利要求1-3中任一项所述的噬菌体，其与保藏编号NCTC18080701；NCTC18080702；NCTC18080703；NCTC18080704；NCTC18080705；或者NCTC18080706的噬菌体中的任一种具有80％-100％的序列同一性。


5.噬菌体套组(panel)，所述套组包含根据权利要求1-4所述的两种、三种、四种或更多种噬菌体。


6.权利要求5所述的套组，其包含保藏编号NCTC18080703和18080704的噬菌体。


7.药物组合物，其包含根据权利要求1-4所述的噬菌体中的任一种或根据权利要求5-6中所述的套组中的任一种。


8.一种动物饲料，其包含根据权利要求1-7所述的噬菌体、药物组合物或套组中的任一种。


9.用于治疗方法的组合物，其包含根据前述权利要求中任一项所述的噬菌体、套组、药物组合物或动物饲料中的任一种。


10.用于预防性治疗方法的组合物，其包含根据前述权利要求中任一项的噬菌体、套组、药物组合物或动物饲料中的任一种。


11.用于权利要求9或10所述的组合物，其中所述方法用于在家禽、猪或牛中治疗沙门氏菌感染，并且所述预防性方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：M克洛基，A坦基，
申请(专利权)人：莱斯特大学，
类型：发明
国别省市：英国;GB