一种对法医混合DNA样本进行STR分型的方法技术

本发明专利技术公开了一种对法医混合DNA样本进行STR分型的方法。本发明专利技术提供了一种对生物样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：提取生物样本的基因组DNA，将基因组DNA作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。所述生物样本为混合生物样本。本发明专利技术还保护一种对DNA样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：将DNA样本作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。所述DNA样本为混合DNA样本。本发明专利技术在法医DNA检验中有巨大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种对法医混合DNA样本进行STR分型的方法
本专利技术涉及一种对法医混合DNA样本进行STR分型的方法。
技术介绍
随着DNA检验水平的提高，微量接触类检材逐渐成为DNA实验室的主要检材，而在此类检材上获得的绝大部分都是混合DNA分型(比如受害人与嫌疑人的DNA混合，2个或2个以上嫌疑人样本的混合，或者是嫌疑人与另一无关个体的混合等等)。而恰恰是这些混合样本对提供案件线索、确立侦查范围和提供法庭证据等方面有很重要的现实意义。然而，混合样本DNA图谱因混合的人数不同、混合比例不同，而造成STR峰谱多、带型复杂、峰型不稳定，导致混合样本结果分析困难、定性风险高，使得混合结果极易被舍弃或忽略，造成遗漏重要的案件信息或者使得DNA证据效力大打折扣。目前国内外法医界对于混合DNA样本的检验和分析方法主要有将混合DNA图谱进行基于计算机软件的拆分，或者专家人工拆分，或者将混合DNA样品进行单细胞分离，从而获得单一DNA分型，从而从混合样本中分解出有价值的DNA信息。其中单细胞分离技术有赖于专业的显微操作设备和训练有素的操作人员，并且能够进行单细胞分离的条件受限。而基于计算机技术或者基于有经验专家的人工拆分，都依赖于高质量的混合图谱的获得，而无法改变检材中DNA混合的初始状态。但是在实际案件中，检材本身可能的混合情况是受害人DNA背景强，而嫌疑人的DNA含量相对很低，低含量DNA模板被淹没于高含量的DNA模板的海洋中。微滴式数字PCR技术是将样本通过微滴发生器进行微滴化处理，利用油包水技术将其“分割”为2×104个1nL体积的微滴后进行PCR反应，每一个微滴都是一个独立的PCR反应体系，该方法通量高，操作简单、成本低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种对法医混合DNA样本进行STR分型的方法。本专利技术提供了一种对生物样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：提取生物样本的基因组DNA，将基因组DNA作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。所述生物样本为混合生物样本，例如来源于2个以上个体的混合血样，来源于2个以上个体的混合细胞样等。所述方法用于法医鉴定领域。所述微滴式数字PCR扩增的反应程序为：95℃1min；94℃30s、59℃1.5min，29个循环；60℃10min；98℃10min。所述微滴式数字PCR扩增的升降温速度设置为2℃/s。所述微滴式数字PCR扩增的反应体系(20μL)：2μL模板、2μLPrimerSet、6μLMasterMix和10μLddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)。所述测序采用遗传分析仪。具体采用ID-X分析软件进行STR分型。本专利技术还保护一种对DNA样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：将DNA样本作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。所述DNA样本为混合DNA样本，即来源于2个以上个体的DNA样本，例如来源于2个以上个体的混合血样的DNA样本，来源于2个以上个体的混合细胞样的DNA样本等。所述方法用于法医鉴定领域。所述微滴式数字PCR扩增的反应程序为：95℃1min；94℃30s、59℃1.5min，29个循环；60℃10min；98℃10min。所述微滴式数字PCR扩增的升降温速度设置为2℃/s。所述微滴式数字PCR扩增的反应体系(20μL)：2μL模板、2μLPrimerSet、6μLMasterMix和10μLddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)。所述测序采用遗传分析仪。具体采用ID-X分析软件进行STR分型。本专利技术还保护一种对生物样本进行STR分型的系统，其特征在于：包括用于进行DNA提取的组件甲、用于进行微滴式数字PCR扩增的组件乙和用于进行测序的组件丙。所述组件乙为微滴生成仪、梯度PCR扩增仪、ddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)、PrimerSet和MasterMix。所述组件丙为遗传分析仪。所述生物样本为混合生物样本，例如来源于2个以上个体的混合血样，来源于2个以上个体的混合细胞样等。所述STR分型为法医鉴定领域的STR分型。本专利技术还保护一种对DNA样本进行STR分型的系统，其特征在于：包括用于进行微滴式数字PCR扩增的组件乙和用于进行测序的组件丙。所述组件乙为微滴生成仪、梯度PCR扩增仪、ddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)、PrimerSet和MasterMix。所述组件丙为遗传分析仪。所述DNA样本为混合DNA样本，即来源于2个以上个体的DNA样本，例如来源于2个以上个体的混合血样的DNA样本，来源于2个以上个体的混合细胞样的DNA样本等。所述STR分型为法医鉴定领域的STR分型。本专利技术还保护用于进行DNA提取的组件甲、用于进行微滴式数字PCR扩增的组件乙和用于进行测序的组件丙在制备对生物样本进行STR分型的系统中的应用。所述组件乙为微滴生成仪、梯度PCR扩增仪、ddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)、PrimerSet和MasterMix。所述组件丙为遗传分析仪。所述生物样本为混合生物样本，例如来源于2个以上个体的混合血样，来源于2个以上个体的混合细胞样等。所述STR分型为法医鉴定领域的STR分型。本专利技术还保护用于进行微滴式数字PCR扩增的组件乙和用于进行测序的组件丙在制备对DNA样本进行STR分型的系统中的应用。所述组件乙为微滴生成仪、梯度PCR扩增仪、ddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)、PrimerSet和MasterMix。所述组件丙为遗传分析仪。所述DNA样本为混合DNA样本，即来源于2个以上个体的DNA样本，例如来源于2个以上个体的混合血样的DNA样本，来源于2个以上个体的混合细胞样的DNA样本等。所述STR分型为法医鉴定领域的STR分型。本专利技术还保护用于进行微滴式数字PCR扩增的组件在对生物样本进行STR分型中的应用。所述STR分型为法医鉴定领域的STR分型。所述用于进行微滴式数字PCR扩增的组件为微滴生成仪、梯度PCR扩增仪、ddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)、PrimerSet和MasterMix。所述生物样本为混合生物样本，例如来源于2个以上个体的混合血样，来源于2个以上个体的混合细胞样等。本专利技术还保护用于进行微滴式数字PCR扩增的组件在对DNA样本进行STR分型中的应用。所述STR分型为法医鉴定领域的STR分型。所述用于进行微滴式数字PCR扩增的组件为微滴生成仪、梯度PCR扩增仪、ddPCRSuperMixforprobes(nodUTP)、PrimerSet和MasterMix。所述DNA样本为混合DNA样本，即来源于2个以上个体的DNA样本，例如来源于2个以上个体的混合血样的DNA样本，来源于2个以上个体的混合细胞样的DNA样本等。本专利技术还保护用于进行微滴式数字PCR扩增的组件在制备对生物样本进行STR分型的系统中的应本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对生物样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：/n提取生物样本的基因组DNA，将基因组DNA作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。/n

【技术特征摘要】
1.一种对生物样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：
提取生物样本的基因组DNA，将基因组DNA作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。


2.一种对DNA样本进行STR分型的方法，包括如下步骤：
将DNA样本作为模板，进行微滴式数字PCR扩增，将扩增产物进行测序，根据测序结果进行STR分型。


3.一种对生物样本进行STR分型的系统，其特征在于：包括用于进行DNA提取的组件甲、用于进行微滴式数字PCR扩增的组件乙和用于进行测序的组件丙。


4.一种对DNA样本进行STR分型的系统，其特征在于：包括用于进行微滴式数字PCR扩增的组件乙和...

【专利技术属性】
技术研发人员：苑美青，李万水，凃政，孟庆振，李永久，刘志芳，王冲，丰蕾，徐秀兰，
申请(专利权)人：公安部物证鉴定中心，
类型：发明
国别省市：北京;11