分子及其嵌合分子制造技术

本发明专利技术概括地涉及蛋白质学、诊断学、治疗学和营养学领域。尤其是本发明专利技术提供了属于肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）超家族或与其相关的分离的蛋白质分子或其中至少包含一部分该蛋白质分子的嵌合分子，所述分离的蛋白质分子，例如ＴＮＦ－α、淋巴毒素－α（ＬＴ－α）、ＴＮＦＲ－Ⅰ、ＴＮＦＲ－Ⅱ、ＯＸ４０、ＢＡＦＦ、ＮＧＦＲ、Ｆａｓ配体；所述嵌合分子，如ＴＮＦ－α－Ｆｃ、ＬＴ－α－Ｆｃ、ＴＮＦＲ－Ⅰ－Ｆｃ、ＴＮＦＲ－Ⅱ－Ｆｃ、ＯＸ４０－Ｆｃ、ＢＡＦＦ－Ｆｃ、ＮＧＦＲ－Ｆｃ、Ｆａｓ配体－Ｆｃ，其中蛋白质或其嵌合分子具有可测量的理化参数特征，其中该特征表示、关联于一个或多个药理学特性或形成一个或多个药理学特性的基础。本发明专利技术进一步设想将分离的蛋白质或其嵌合分子用于诊断、预防、治疗、营养和／或研究应用范围中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术概括地涉及蛋白质学、诊断学、治疗学和营养学。尤其是，本专利技术提供了属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族或与之相关的分离的蛋白质分子和包含该蛋白质分子的至少一部分的嵌合分子，所述的分离的蛋白质，比如TNF-a、淋巴毒素-a(LT-a)、TNFRI、TNFRII、OX40、BAFF、NGFR、Fas配体；所述包含该蛋白质分子的至少一部分的嵌合分子，比如TNF-a-Fc、LT-a-Fc，TNFRI-Fc、TNFRII-Fc、OX40-Fc、BAFF-Fc、NGFR-Fc、Fas配体-Fc。其中该蛋白质或其嵌合分子具有可测量的参数特征，其中该特征表示、关联于一个或多个药理学特性或形成一个或多个药理学特性的基础。本专利技术进一步设想将分离的蛋白质或其嵌合分子用于诊断、预防、治疗、营养和/或研究应用范围内。
技术介绍
本说明书中涉及的任何现有技术不被，也不应该被理解为是对现有技术形成普遍的常识的一部分的一种认可或任何形式的提示。 TNF超家族与细胞生长、存活、凋亡、坏死以及免疫反应相关。TNF分子对肿瘤细胞具备显著的选择性细胞毒作用，也诱导非癌细胞凋亡。TNF超家族中的受体在细胞外结构域包含富半胱氨酸重复。TNF超家族的成员包括TNF-a、LT-a、TNFRI、TNFRII、OX40、BAFF、NGFR、Fas配体。 TNF-a(TNF-alpha，肿瘤坏死因子配体超家族成员2，TNFSF2)是一个含233个氨基酸的跨膜蛋白，形成一个具有生物活性的同型三聚体。与其结构相关的分子，淋巴细胞毒素-α(LT-α，TNF-β，TNFSF2)是一个含205个氨基酸的肽，包括一段含34个氨基酸的信号序列，其不同于其它TNF超家族配体，指导其成熟肽的分泌。 TNF-α和LT-α介导细胞尤其是变异细胞的坏死或者凋亡，同时诱导炎症反应、细胞增殖、细胞因子的释放以及T和B淋巴细胞的激活。此外，TNF-α和LT-α局部低水平的表达参与组织重塑和热休克反应，包括破坏病毒感染的细胞以及增强粒细胞的抗菌作用。此外，已经证明，在胚胎发育过程中，TNF-α和LT-α是一个重要的组分，来促进外周淋巴系统的器官发生，如淋巴结、脾脏以及Peyer斑。TNF-α和LT-α的表达失控在自身免疫性疾病如类风湿性关节炎，以及炎性肠疾病如Crohn病和多发性硬化症(MS)的发生中发挥了重要的作用。 TNF-α和LT-α通过TNF受体、肿瘤坏死因子受体I(TNFRI)和肿瘤坏死因子受体II(TNFRII)的介导而发挥作用。两种TNF受体与TNF-α和LT-α的结合都具有高亲和力，并且两种受体存在于除血红细胞以外的所有细胞类型中。TNFRI的C端胞内区的缺失分析已经表明其存在一个死亡结构域，参与信号转导过程导致程序性细胞死亡。TNFRI的死亡结构域可以与其它多种信号转接分子作用，包括TRADD和RIP。TNFRII更多地存在于内皮细胞和造血细胞系的细胞中。TNFRII的可溶性形式已经在人尿中得到鉴定，为30kDa和45kDa的蛋白。这些可溶性TNF受体蛋白来自膜结合受体的溶蛋白性裂解，表现了TNF的抑制性。值得注意的是，许多诱导TNF-α表达的刺激物也诱导可溶性TNF受体的表达，这表明可溶性受体在调节TNF活性中可能发挥了作用。尤其是，TNFRI和TNFRII在治疗具有TNF-α过量特征的患者的疾病如牛皮癣时可能发挥作用。目前，牛皮癣在全世界的感染率为2-3％左右(Nickoloff et al.J Clin Invest.1131664-1675，2004)。牛皮癣患者不仅存在搔痒和面容受损之类的皮肤病变，而且10-30％的患者还存在牛皮癣关节炎伴随指甲营养不良。因此，牛皮癣不仅是一种皮肤病，同时它还影响许多日常生活，例如手的使用、走路、睡觉以及性生活。据报道，事实上，至少30％的牛皮癣患者打算自杀(Nickoloff et al.，supra，2004)。其它具有TNF-α水平过高特征的皮肤炎症包括贝切特病、大疱性皮炎、湿疹、霉菌感染、麻风病、嗜中性皮炎、糠疹(或玫瑰糠疹)、黑糠疹(或黑色小孢子菌病)、毛发红糠疹、系统性红斑狼疮、系统性多血管以及中毒性表皮坏死溶解(Evereklioglu Expert Opin Pharmacother5(2)317-28，2004；Lipozecic et al.Acta Dermatovenerol Croat12(1)35-41，2004；Mche et al..Ann Dermatol Venereol 129(12)1374-9，2002；Teo et al..Microbes Infect4(11)1193-202，2002)。此外，TNF-α水平过高可能由使用其它治疗引起。例如，使用Aldara乳膏(咪喹莫特)的患者可能形成以下皮肤反应，包括红斑、腐蚀、溃疡、剥落、鱼鳞、干燥、形成疙瘩、结硬皮、皮肤渗出液。 人OX40(肿瘤坏死因子受体超家族成员4，TNFSF4)是一个50kDa的跨膜蛋白，主要表达于活化的CD4+T细胞表面。OX40是一个辅助刺激因子，参与T细胞依赖的免疫反应，即T细胞的活化和增殖，通过效应器T细胞诱导细胞因子的产生，记忆T细胞的产生，以及在体内阻碍外周T细胞的耐受。OX40在启动CD28信号后数小时或数天内诱导表达。据报道，无论是在免疫反应的高度，还是在产生记忆T细胞上，OX40同它的配体的相互作用在扩增T细胞数目上都发挥了作用。在缺失CD28时，OX40-OX40L相互作用也介导T细胞的增殖和IL-2的产生。但是活化的OX40缺失T细胞对凋亡高度敏感，即使IL-2的产生、细胞分裂和扩张都相对正常。已经有报道指出，在免疫应答过程中处理OX40的水平或者OX40-OX40L的相互作用对有利于于治疗T细胞介导的疾病，尤其是过敏性、炎性以及自身免疫性疾病。最近，几个研究小组已经通过阻断OX40-OX40L的相互作用降低了自身免疫性疾病动物模型的临床体症。 BAFF(也是已知的肿瘤坏死因子配体超家族成员13B，TNFSF13B)是一个含285个氨基酸的II型膜糖蛋白。BAFF由B细胞、T细胞、树状突细胞、巨嗜细胞和中性粒细胞表达。BAFF是一个B细胞存活因子，主要促进活化B细胞的增殖，免疫球蛋白与IgD+B细胞的连接，以及免疫球蛋白分泌型细胞的存活，并参与B细胞的成熟。这表明BAFF是体液免疫反应中一个重要的调节因子。研究表明用BAFF处理B细胞可以引起原-存活致癌基因包括Bc1-xL，Bc1-2和Mc1-1的表达。由于BAFF是一个B细胞存活因子，因此它的降解能促进自体反应B细胞的存活和自身免疫性疾病的发生。此外，在自身免疫性疾病的患者中也检测到BAFF水平升高，包括在类风湿性关节炎(RA)和炎性关节炎患者的关节中，其滑液的BAFF水平比血清中的水平高。BAFF在调节B细胞、T细胞、树状突细胞、巨嗜细胞以及中性粒细胞介导的生物过程中是有用的，尤其在激活BAFFR上，如增加B淋巴细胞的增殖、活化和存活。尤其是，BAFF可以用于治疗免疫缺陷，例如B淋巴细胞增殖、活化和存活不充分的患者，或者一般变异免疫缺陷(CVID)，或IgA缺陷的患者。BAFF也能用于在接种疫苗的过程中增加本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的蛋白质，其具有可测量的理化参数特征，其中所述的特征表示、关联于一个或多个特征性的药理学特性或形成一个或多个特征性的药理学特性的基础，其中所述的分离的蛋白质具有包括多个可测量的理化参数｛［Ｐ↓［ｘ］］↓［１］、［Ｐ↓［ｘ］］↓［２］、…［Ｐ↓［ｘ］］↓［ｎ］、｝的理化特征，其中Ｐ↓［ｘ］表示可测量的理化参数且“ｎ”是≥１的整数，其中［Ｐ↓［ｘ］］↓［１］至［Ｐ↓［ｘ］］↓［ｎ］中的每一个各自为不同的可测量的理化参数，其中任一个可测量的理化特性的值或一个以上的可测量的理化特性的一系列的值表示、关联于一个特征性的药理学特性Ｔ↓［ｙ］的基础或者一系列特征性的药理学特性｛［Ｔ↓［ｙ］］↓［１］、［Ｔ↓［ｙ］］↓［２］、．．．．［Ｔ↓［ｙ］］↓［ｍ］｝或形成一个特征性的药理学特性Ｔ↓［ｙ］的基础或者一系列特征性的药理学特性｛［Ｔ↓［ｙ］］↓［１］、［Ｔ↓［ｙ］］↓［２］、．．．．［Ｔ↓［ｙ］］↓［ｍ］｝的基础，其中Ｔ↓［ｙ］表示一个特征性的药理学特性且ｍ是≥１的整数，其中［Ｔ↓［ｙ］］↓［１］到［Ｔ↓［ｙ］］↓［ｍ］中的每一个各自为不同的药理学特征，其中分离的蛋白质选自ＴＮＦ－α、ＬＴ－α、ＴＮＦＲⅠ－Ｆｃ、ＴＮＦＲⅡ－Ｆｃ、ＯＸ４０－Ｆｃ、ＢＡＦＦ、ＮＧＦＲ－Ｆｃ和Ｆａｓ配体。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JD普里斯特，AD沃茨，JS惠特克，TA多马加拉，GR皮尔金顿，I贝姆，CMY李，林美安，NS托马斯，
申请(专利权)人：阿波罗生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：AU[澳大利亚]