分子及其嵌合分子制造技术

本发明专利技术概括地涉及蛋白质学、诊断学、治疗学和营养学领域。尤其是本发明专利技术提供了属于ＩＬ－６蛋白质家族或者与ＩＬ－６蛋白质家族相关的分离的蛋白质分子例如Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－１１、ＩＬ－６、ＬＩＦ或其嵌合分子，其中蛋白质或其嵌合分子具有可测量的理化参数特征，其中该特征表示、关联于一个或多个药理学特性或形成一个或多个药理学特性的基础。本发明专利技术进一步设想将分离的蛋白质或其嵌合分子用于诊断、预防、治疗、营养和／或研究应用范围中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术概括地涉及蛋白质学、诊断学、治疗学和营养学。尤其是，本专利技术提供一种分离的蛋白质分子，该分子属于或者相关于白介素-6(IL-6)蛋白质家族如G-CSF、IL-11、IL-6、LIF及包含该蛋白质分子的至少一部分的嵌合分子。其中该蛋白质或其嵌合分子具有可测量的参数特征，其中特征表示、关联于一个或多个药理学特性的基础。或形成一个或多个药理学特性的基础。本专利技术进一步设想将分离的蛋白质或其嵌合分子用于诊断、预防、治疗、营养和/或研究应用范围内。
技术介绍
本说明书中涉及的任何现有技术不被，也不应该被理解为是对现有技术形成普遍的常识的一部分的一种认可或任何形式的提示。 IL-6家族细胞因子包括IL-6、IL-11和LIF。IL-6家族的所有成员及相关蛋白G-CSF结构上均存在4α螺旋束糖蛋白。 IL-6家族蛋白及其相关蛋白展现了如下功能影响免疫反应，炎症，造血和肿瘤发生。关于造血作用，IL-6、IL-11、LIF和G-CSF明确的功能是以单独或以IL-3和/或凝血酶依赖模式导致巨核系造血发生和血小板生成。此外，LIF、IL-6和G-CSF在调节极不成熟的造血细胞中发挥作用。G-CSF的进一步的功能包括在造血祖细胞增殖与分化成为嗜中性粒细胞/粒细胞系过程中发挥作用。 IL-6家族成员的另外一个普遍的功能是它们能够诱导肝急性期蛋白产生。急性期蛋白涉及非抗原特异性先天免疫反应，包括C反应蛋白和甘露醇结合蛋白。这些蛋白促进炎症，激活补体级联反应，激发巨噬细胞的趋化性。 与IL-6家族成员共同的功能相一致的是，它们的受体都有共同的信号传导亚基gp130。 IL-6家族成员和G-CSF的一个主要的临床应用是，它们可以单独或与其它蛋白联合应用于治疗化疗相关的嗜中性粒细胞减少症和血小板减少症。此外，这些细胞因子可以单独或与其它蛋白联合应用于干细胞的维持和分化。 蛋白与各自的结合蛋白相互作用显现出生物效应器功能，即IL-6蛋白家族和相关蛋白与它们各自的配体或受体应该具备作为治疗剂以调节生理过程的显著的潜力。然而，分子的小的变化如一级、二级、三级或者四级结构和共翻译或者翻译后修饰形式能够对蛋白的活性、分泌及抗原性和清除产生重大的影响。因此，蛋白可能会伴随特异的一级、二级、三级或四级结构或者共翻译或翻译后结构或者为补充所赋予的独特的或者特别有用的特性而产生。所以，需要评估在不同产生条件下蛋白的理化特性以决定它们是否具有有用的理化特性和其他的药理学特性。 目前的问题是商业上可利用的蛋白的产生是通过源于进化上离人类很远的物种如细菌、酵母、真菌和昆虫的细胞实现的，这些细胞或者缺乏糖基化，或者其糖基化与人类细胞截然不同，这些都相当大地影响了它们的临床效用。例如，在酵母或真菌系统如曲霉菌中表达的蛋白含有高密度的甘露糖，使蛋白不具备治疗效果(Herscovics A.O.等.FASEB J 7540-550)。 甚至在非人的哺乳动物表达体系如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中，已被证实的糖基化的形式同人类细胞也有着显著的差别。例如，大多数哺乳动物包括啮齿动物表达(α1，3)半乳糖转移酶，该酶能在糖蛋白上产生Gal(α1，3)-Gal(β1，4)-GlcNAc寡糖。而人、猿、旧大陆猴表达该酶时变成了基因发生了移码突变的非活性形式(Larsen et al.JBiol Chem 2657055-7061，1990)。尽管大多数CHO细胞株被用于重组蛋白合成，比如Dux-B11，表达非活性形式的(α1，3)半乳糖转移酶，它们仍缺少功能性(α2，6)唾液酸转移酶以用于在人类细胞中存在的(α2，6)-连接末端唾液酸的合成。此外，唾液酸修饰在CHO细胞的糖蛋白修饰中倾向于被CHO细胞内源性唾液酸酶降解(Gramer et al.Biotechnology(N.Y.)13(7)692-8，1995)。 结果，由这些非人表达系统生产的蛋白表现出与人细胞衍生蛋白质不同的理化和药理学特性例如半衰期、抗原性、稳定性和功能性效应。 最近的干细胞技术的进步实质上增强了利用干细胞应用于例如移植治疗、药物筛选、毒理学研究和功能基因组学的潜力。然而，干细胞在包括非人蛋白质的培养基中常规维持，由于非人传染性物质污染的可能性，因此不适用于临床应用。进一步，在非人衍生介质中的干细胞培养可能导致引入非人碳水化合物部分因此危害移植应用。(Martin et al Nature Medicine 11(2)228-232，2005)。因此，特殊的人衍生蛋白质在干细胞的维持和/或分化中的使用将改善异基因蛋白质的引入并增加干细胞的临床应用。 相应地，有必要发展蛋白质和它们的受体，其具有特殊的所期望的理化和药理学特征以用于诊断、预防、治疗和/或营养研究应用，并且本专利技术提供了于IL-6蛋白家族的蛋白质和相关蛋白用于临床、商业和研究应用。 专利技术概述 在整个说明书中，除非特别说明，术语“含有”或其变体例如“具有，，或“包含”，将被理解为暗示包括所述要素或全部、或要素的组或整体的组，但是不排除任何其他的要素或全部。 核苷酸和氨基酸序列表示为序列标识号(SEQ ID NO)。这些SEQ IDNO在数字上对应序列标识号<400>1(SEQ ID NO1)，<400>2(SEQ IDNO2)，依此类推。表1显示的是序列识别号的摘要信息。序列列表在权利要求后给出。 本专利技术概括地涉及具有理化参数特征的属于IL-6蛋白家族或与该家族相关的分离的蛋白质或其嵌合分子，其中所述的特征表示、关联或形成一个或多个特征性的药理学特性的基础。特别是本专利技术提供选自G-CSF、IL-11、IL-6和LIF的分离的蛋白质或其嵌合分子，其具有包括多个可测量的理化参数的理化特征{1、2、...n、}，其中Px表示可测量的理化参数且“n”是≥1的整数，其中介于并包括在1到n之间的参数各自为不同的可测量的理化参数，其中任一个或一个以上的可测量的理化特性的值表示、关联于一个特征性的药理学特性Ty或者一系列特征性的药理学特性{1、2、....m}，或形成一个特征性的药理学特性Ty或者一系列特征性的药理学特性{1、2、....m}的基础，其中Ty表示一个特征性的药理学特性且m是≥1的整数，其中1到m为不同的药理学特征。 这里的术语“特征性的”涉及蛋白质或其嵌合分子的药理学特性，在本专利技术中是指蛋白质或其嵌合分子的一个或者多个区别于其它特征性的理化特性的药理学特性。具体地说，分离蛋白或其嵌合分子的一个或者多个药理学特性与在原核细胞或低等真核细胞甚至非人的高等真核细胞产生的相同蛋白的特性不同或有相对区别。在另外的具体实施方案中，作为目标的分离的蛋白或其嵌合分子的药理学特征有助于实现某项功能。这里的术语“可测量的理化参数”或Px表示分离蛋白或其嵌合分子的一个或多个可测定的特性。在本专利技术的一个具体实施方案中，作为目标的分离的蛋白或其嵌合分子的可测量的理化特性或有助于或者产生了药理学特性Ty。 本专利技术的分离的蛋白质或嵌合分子具有理化参数(Px)，该参数用于完整地定义蛋白质分子蛋白质分子或嵌合分子。该理化参数可以选自表观分子量(P1)、等电点(PI)(P2)、同工型数(P3)、不同同工型数的相对强度(P4本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的蛋白质，其具有可测量的理化参数特征，其中所述的特征表示、关联于一个或多个特征性的药理学特性或形成一个或多个特征性的药理学特性的基础，其中所述的分离的蛋白质具有包括多个可测量的理化参数｛［Ｐ↓［ｘ］］↓［１］、［Ｐ↓［ｘ］］↓［２］、…［Ｐ↓［ｘ］］↓［ｎ］、｝的理化特征，其中Ｐ↓［ｘ］表示可测量的理化参数且“ｎ”是≥１的整数，其中［Ｐ↓［ｘ］］↓［１］至［Ｐ↓［ｘ］］↓［ｎ］中的每一个各自为不同的可测量的理化参数，其中任一个可测量的理化特性的值或一个以上可测量的理化特性的一系列的值表示、关联于一个特征性的药理学特性Ｔ↓［ｙ］或者一系列特征性的药理学特性｛［Ｔ↓［ｙ］］↓［１］、［Ｔ↓［ｙ］］↓［２］、．．．．［Ｔ↓［ｙ］］↓［ｍ］｝，或形成一个特征性的药理学特性Ｔ↓［ｙ］或者一系列特征性的药理学特性｛［Ｔ↓［ｙ］］↓［１］、［Ｔ↓［ｙ］］↓［２］、．．．．［Ｔ↓［ｙ］］↓［ｍ］｝的基础，其中Ｔ↓［ｙ］表示一个特征性的药理学特性且ｍ是≥１的整数，其中［Ｔ↓［ｙ］］↓［１］到［Ｔ↓［ｙ］］↓［ｍ］中的每一个各自为不同的药理学特征，其中分离的蛋白质选自Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－１１、ＩＬ－６和ＬＩＦ。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JD普里斯特，AD沃茨，JS惠特克，S杰克森，TA多马加拉，RJ辛普森，GR皮尔金顿，CA利德尔，
申请(专利权)人：阿波罗生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：AU[澳大利亚]