诊断急性冠状动脉综合症的方法和试剂盒技术

本发明专利技术提供了为检测和诊断急性冠状动脉综合症或ＡＣＳ的方法。所述方法基于有危险的患者样品流体（通常为血样）中选择分析物的异常浓度支持ＡＣＳ的诊断。因此公开了ＡＣＳ的至少两个新生物标志物，即ＭＭＰ－３和ＳＧＯＴ。共１２种分析物的浓度提供了所述患者状况的灵敏度和特异性描述，即是否所述患者患有心脏病发作。所述ＡＣＳ的其他重要的生物标志物包括但不限于：ＩＬ－１８、因子ＶＩＩ、ＩＣＡＭ－１、肌酸激酶ＭＢ、ＭＣＰ－Ｉ、肌红蛋白、Ｃ反应蛋白、血管性血友病因子、ＴＩＭＰ－Ｉ、铁蛋白、谷胱甘肽硫转移酶、前列腺特异抗原（游离）、ＩＬ－３、组织因子、甲胎蛋白、前列腺酸性磷酸酶、干细胞因子、ＭＩＰ－Ｉ－β、癌胚抗原、ＩＬ－１３、ＴＮＦ－α、ＩｇＥ、脂肪酸结合蛋白、ＥＮＡ－７８、ＩＬ－１－β、脑源性神经营养因子、载脂蛋白Ａ１、血清淀粉样蛋白Ｐ、生长激素、β－２微球蛋白、脂蛋白（ａ）、ＭＭＰ－９、促甲状腺激素、α－２巨球蛋白、补体３、ＩＬ－７、瘦素或ＩＬ－６。也描述了包含有助于流体样品分析的试剂的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于急性冠状动脉综合症(ACS)的检测和/或诊断的 方法、试剂盒和试剂。
技术介绍
在美国心血管疾病是第一杀手。多数受害者死于心脏病发作， 而从未去过急症科。其中幸运的患者可能主诉胸痛、头痛、眩晕而 赶紧去医院。然而，并非所有患有急性冠状动脉综合症(ACS)的患者 能得到准确诊断。每年去医院报告的数千例心脏病发作的患者被送 回家。在美国有8,000,000人报告胸痛，其中本质上为非心源性胸 痛的3， 000， 000人被送回家，但这些人有40， 000人患有心肌梗死。 有5， 000， 000人由于疑似有心源性病因而留院察看，其中2， 500， 000 人(50%)为非心源性，l，OOO，OOO人患有心肌梗死，1，200，000人患 有不稳定的心绞痛，而300,000人患有心搏骤停。这些数据为提高 有ACS危险的患者的筛选和诊断提供了初步的理论基础。ACS的现行检测法缺乏选择性和灵敏度其中假阳性和假阴性的 频率处于不理想的水平。因此，为心血管疾病的早期检测和具体为 心脏病发作的准确诊断而开发额外的生物标志物是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术提供了 ACS的快速检测和/或准确诊断的方法。通过检测 患者流体样品中一个或两个生物标志物的浓度以实施所述方法。一 个或两个生物标志物升高(或降低，如病例可能有)的浓度，其与"正常"的浓度(也就是未患有ACS的对照受试者)有统计学差异，支持ACS阳性的诊断。优选，所述方法利用分析物或"生物标志物" 组，即样品流体(如全血、血清、血浆或尿液)中发现的直达12种 或更多种的物质，帮助支持ACS阳性或阴性的诊断。所述方法提供 了在进行准确诊断中高达99%的准确度。根据本专利技术，提供了一种在疑似患有急性冠状动脉综合症(ACS) 的人受试者中诊断ACS的方法，所述方法包括(a)从疑似患有ACS 的人受试者获得流体样品；(b)检测所述流体样品中MMP-3的浓度； (c)如果所述流体样品中醒P-3的检测浓度与人受试者的对照组有统 计学差异，从而确定醒P-3有统计学差异的升高的浓度支持ACS阳 性的诊断。通常，人受试者会主诉胸痛。大量流体样品中任何一个 都被检测。优选，所述流体样品选自全血、血清、血浆或尿液。已 经发现流体样品中固P-3约1 ng/mL或以上的检测浓度支持ACS阳 性的诊断。本专利技术的另一方面，提供了一种在疑似患有ACS的人受试者中 诊断急性冠状动脉综合症(ACS)的方法，所述方法包括(a)从疑似 患有ACS的人受试者获得流体样品；(b)检测所述流体样品中SGOT 的浓度；(c)如果所述流体样品中SG0T的检测浓度与人受试者的对 照组有统计学差异，从而确定SGOT有统计学差异的降低的浓度支持 ACS阳性的诊断。已经发现流体样品中SGOT小于或等于约10 u g/mL 的检测浓度支持ACS阳性的诊断。本专利技术的又一方面涉及在疑似患有急性冠状动脉综合症(ACS) 的人受试者中诊断ACS的方法，其包括(a)从疑似患有ACS的人受 试者获得流体样品；(b)检测所述流体样品中MMP-3和SGOT的浓度； (c)如果所述流体样品中MMP-3和SGOT的检测浓度与人受试者的对 照组有统计学差异，从而确定有丽P-3统计学差异的升高浓度和 SGOT有统计学差异的降低浓度一起支持ACS阳性的诊断。一个优选的实施方案中，本专利技术的所述方法进一步包含检测所 述流体样品中至少一个以下物质的浓度白细胞介素-18(IL-18)、 因子VII、细胞间粘附因子(ICAM-1)、肌酸激酶MB、单核细胞趋化蛋白-I (MCP-I)、肌红蛋白、C反应蛋白、组织金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP-1)、铁蛋白或谷胱甘肽硫转移酶或其任何组合。已经发现上述提到的除SG0T之外的所有分析物有统计学差异的升高浓度，与对 照浓度相比较，支持ACS阳性的诊断。尤其，已经发现样品流体中 分析物的某些阈值浓度在ACS的检测或诊断中是很重要的，包括 IL-18 (约300pg/mL以上)、因子VII (约320 ng/mL以上)、ICAM-1 (约170ng/mL以上)、肌酸激酶MB (约5 ng/mL以上)、MCP-I (约 275 pg/niL以上)、肌红蛋白(约30 ng/mL以上)、C反应蛋白(约 11 u g/mL以上)、T頂P-1 (约120 ng/mL以上)、铁蛋白(约300 ng/mL 以上)和谷胱甘肽硫转移酶(约2 ng/mL以上)。已经检测到，其他生物标志物在ACS阳性或阴性的诊断程序中 是很有用的。这些生物标志物，除那些已经公开的之外，还包括前 列腺特异抗原(游离)、白介素-3(IL-3)、组织因子、甲胎蛋白、前 列腺酸性磷酸酶、干细胞因子、巨噬细胞炎症蛋白 -1-P (MIP-I-e)、癌胚抗原、白介素-13(IL-13)、肿瘤坏死因子-a (TNF - a)、免疫球蛋白E(IgE)、脂肪酸结合蛋白、上皮中性粒细 胞活化肽(ENA-78)、白介素-1-P (IL-1 - P)、脑源性神经营养因 子、载脂蛋白A1、血清淀粉样蛋白P、生长激素、e-2微球蛋白、 脂蛋白(a)、基质金属蛋白酶-9(醒P-9)、促甲状腺激素、a-2巨球 蛋白、补体3、白介素-7(工L-7)、瘦素和白介素-6(IL-6)。本文也描述了用于在诊断程序中评价某些生物因子重要性的不 同技术。其中一种所述技术是将编写的结果投影至相邻图 (proximity map)上，从而受试者的检测浓度与其他受试者(之前 被诊断为患有ACS).的检测浓度集群的相邻性有助于ACS阳性的诊 断。其他技术包括一个或多个统计方法的应用(例如线性回归分析 法、分类树分析法、启发式轮毂Bayes分析法等)。本文还提供了 一种试剂盒，其包含用于检测流体样品中分析物 组浓度的试剂，该分析物组包括丽P-3、 SGOT和一个或多个IL-18、 因子VII、 ICAM-工、肌酸激酶MB、 MCP-1、肌红蛋白、C反应蛋白、 HMP-1、铁蛋白或谷胱甘肽硫转移酶。所述试剂包括抗给定分析物组的成员的抗体。而且，所述试剂被固定至一个底物上，该底物包括一个二维阵列、 一个微孔板或多重微珠套件(multiple bead sets)。本方法进一步包含通过应用统计方法(如线性回归分析法、分 类树分析法或启发式轮毂Bayes分析法)，将患者血液中一个、两个 或更多个生物标志物的浓度与一个或多个对照样品中同样生物标志 物的浓度相比较。所述统计的方法可以是，且通常是通过计算机程 序来完成，如通过商购的统计分析软件。 一个实施方案中，所述的 统计方法为分类树分析法，如CART (分类和回归树)。患者或受试者 (根据所述方法依靠生物标志物组检测他们的流体样品)的结果被 投影至相邻图上。具体患者的生物标志物浓度结果与至少两个人(他 们之前诊断为患有心脏病发作和正常)中一个的相邻支持ACS阳性 或阴性的诊断。.本专利技术提供了一种制备的制造物，其包含对至少一个和 SGOT有特异性的结合试剂，优选上述两个生物标志物一起。更优选， 提供了一种试剂盒，其包含对丽P-3、 SG0T、 IL- 18、因子VII、 ICAM-I、肌酸激酶MB、 MCP-I、肌红蛋白、C反应蛋白、TIMP-工、铁 蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在疑似患有急性冠状动脉综合症（ＡＣＳ）的人受试者中诊断ＡＣＳ的方法，所述方法包括：　　　　（ａ）从疑似患有ＡＣＳ的人受试者获得流体样品；　　　　（ｂ）检测所述流体样品中ＭＭＰ－３的浓度；　　　　（ｃ）如果所述流体样品中ＭＭＰ－３的检测浓度与人受试者的对照组有统计学差异，从而确定ＭＭＰ－３的有统计学差异的升高浓度支持ＡＣＳ阳性的诊断。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克B钱德勒，迈克尔D斯班，詹姆斯马普斯，乔治罗杰斯，
申请(专利权)人：儒勒斯贝斯特医药有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]