本发明专利技术的提高牛乳中乳铁蛋白（Ｌｆ）含量的方法，通过在奶牛骻内淋巴结处注射抗原释放剂ＡＲＤ（Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｌｅａｓｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ），深入研究了抗原释放剂ＡＲＤ（Ａｎｔｉｇｅｎ ＲｅｌｅａｓｉｎｇＤｅｖｉｃｅ）和免疫刺激复合物（ＩＳＣＯＭｓ）的免疫原性与稳定性，重点检验牛乳中乳铁蛋白，ＡＲＤ埋植后Ｌｆ的含量提高了５６％，为含高水平特异性抗体的免疫乳生产提供试验依据。本发明专利技术广泛适用于营养食品与保健食品领域。
【技术实现步骤摘要】
乳铁蛋白(Lactoferrin，简称Lf)是一种主要的乳清蛋白，分子量约为8万，大约山 700个氨基酸残基构成，乳铁蛋白因其晶体呈红色，又称"红蛋白"，牛初乳中含量约1克/ 升，牛常乳含量约0.02-0.35克/升。具有多种生理功能如促进铁的传递和吸收、抗菌活性、 抗病毒作用、免疫作用、促进肠细胞的生长和双歧杆菌的繁殖、天然抗氧化剂、调节骨髓细 胞生成等。本专利技术通过提高抗原释放剂ARD(Antigen Releasing Device )和免疫刺激复合物(ISCOMs) 的免疫原性和稳定性，扩大试验动物的样本含量，展开深入的研究，研究ISCOMs疫苗对奶牛 细胞免疫的影响规律，重点检验牛乳中乳铁蛋白，为含高水平特异性抗体的免疫乳生产提供 试验依据。1、材料与方法l.l样品:抗原释放剂ARD (Antigen Releasing Device)选用澳大利亚Agri-BIOTECH公司生产的抗原释放剂ARD (Antigen Releasing Device), 免疫刺激复合物(ISCOMs)以不同浓度的聚交酯胶囊包被，分别在埋植后的Od、 14d和28d 释放出免疫刺激复合物引起奶牛的免疫应答产生免疫球蛋白。埋植枪及ARD设计示意图见附 附图说明图1。 1.2动物在北京市大兴区沧达福奶牛场选择泌乳前期的成年健康荷斯坦奶牛，以隐性乳房炎诊 断液进行乳房炎检测剔除隐性乳房炎病牛，并根据其产奶量、年龄、胎次、泌乳阶段选择40 头奶牛并分组，免疫组20头(编号No. 1 20)，对照组20头(编号No.21 40)。参试奶牛 状况见表l。于2006年11月16日对免疫组的20头牛进行埋植ARD，埋植位点在奶牛骸内淋 巴结处，每头牛埋植3种不同ARD，试验期为4个月。表l试验奶牛状况试验 编号分组牛号胎次分娩日期泌乳天数 (截至11月10日)11月份产奶量(kg)1试验组261832006. 07. 1212122. 72试验组259832006. 06. 2713621.43试验组257732006. 08. 099326. 24试验组264532006. 09. 036826.95试验组269822006. 08. 218124.06试验组277722006. 08. 129028.27试验组283922006. 07. 2810528.68试验组250542006. 06. 1315024. 89试验组278622006. 08. 188419.610试验组283622006. 06. 0316022.611试验组276722006. 08. 0110124. 112试验组275522006. 08. 089424.313试验组269232006. 07. 2810527.814试验组261732006. 08. 039926. 115试验组277132006. 08. 158728. 116试验组264732006. 05. 0219225.417试验组264632006. 06. 21"224.818试验组710822006. 07. 2710633. 219试验组266922006. 07. 0113219.920试验组250642006. 06. 1714627.9平均2. 65 ±0. 67114.6±31. 6425.3±3.321对照组291122006. 06. 2913429.922对照组2柳32006. 05. 1917520.623对照组259432006. 07. 0412921.624对照组708932006. 05. 0119323.425对照组279232006. 06. 0316031. 226对照组267522006. 07. 1811525.027对照组263832006. 08. 069624. 628对照组258422006. 08. 138924.029对照组263422006. 07. 0213134.530对照组275022006. 08. 287425. 131对照组249442006. 08. 119123.632对照组268032006. 06. 1115229. 533对照组277522006. 08. 049830.434对照组257232006. 08. 129023. 735对照组263332006. 08. 079524. 036对照组268432006. 07. 1212125.437对照组265032006. 08. 267628.838对照组259032006. 08. 228031. 139对照组269022006. 08. 237928. 340对照组268722006. 08. 287426. 8平均2. 65 ±0. 59112.6±35.626. 6±3. 7试验牛饲养管理按牛场的正常饲养管理程序进行，采用中产奶牛饲料配方，TMR饲喂， 精粗比为45:55，粮组成及营养水平见表2。奶牛自由采食，记录采食量，喂3次，饲喂时间 分别为7:00、 14:00和20:00。挤奶3次，时间为7:00、 14:00和20:00，采用Delaval鱼骨 式挤奶台进行机械挤奶，挤奶时"二次药浴， 一次纸巾擦干"。观察奶牛健康状况，尤其注意 是埋植后7d内的伤口是否发炎。1. 3试验牛饲养管理及样品的采集试验牛饲养管理按牛场的正常饲养管理程序进行，采用中产奶牛饲料配方，TMR饲喂， 精粗比为45:55，粮组成及营养水平见表2。奶牛自由采食，记录采食量，喂3次，饲喂时间 分别为7:00、 14:00和20:00。挤奶3次，时间为7:00、 14:00和20:00，采用Delaval鱼骨 式挤奶台进行机械挤奶，挤奶时"二次药浴， 一次纸巾擦干"。观察奶牛健康状况，尤其注意 是埋植后7d内的伤口是否发炎。表2试验粮组成及营养水平原料组成营养水平精料组成干物质(g/kg)391玉米(％)47.4产奶净能(MJ/kg)6. 69麦麸(％)10. 5粗蛋白(％)13.8豆粕(％)26.3可消化粗蛋白(g/kg)104棉粕(％)10.5粗纤维(％)20. 3玉米胚芽饼(％)3.2Ca (%)0. 59石粉(％)1.0P (%)0."磷酸氢钙(％)1.0合计99.9粗料组成羊草(％)10.5苜蓿(％)1.8青贮(％)87.7合计100Od 10d每两天记录每头牛的产奶量，于每天的固定时间测量每头牛直肠体温，采集每 头牛的乳样；21d 60d时每3天采集每头牛的乳样，每周记录采食量、产奶量和体温。采乳 样时每天采集乳样3次，按早中晚比例4:3:3混合，共取样100mL， 4'C保存；50mL于北京奶 牛中心检测牛奶体细胞总数和乳脂、乳蛋白等常规成分；50mL奶样用于分离乳清。 每组固定10头牛用于采血(No. U 20; No.31 40)。采血时以采血针尾根动/静脉采血，分 别以真空抗凝采集管和真空促凝采血管收集血液。凝固的血液用于分离血清，分装于4个离 心管中-8(TC保存待用。抗凝血分别用于MTT、流式细胞仪等检测。同时采集沧达福牛场其他奶牛的初乳样品，每头分娩奶牛每24h采集1次奶样，每次采 集200mL以上，连续采集7d,用以分析比较免疫本文档来自技高网...
【技术保护点】
本专利技术的提高牛乳中乳铁蛋白（Ｌｆ）含量的方法，通过在奶牛骻内淋巴结处注射抗原释放剂ＡＲＤ（Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｌｅａｓｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ）的方法，深入的研究抗原释放剂ＡＲＤ（Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｌｅａｓｉｎｇ Ｄｅｖｉｃｅ）和免疫刺激复合物（ＩＳＣＯＭｓ）的免疫原性和稳定性。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：丁庆，
申请(专利权)人：丁庆，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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