一种葡萄酒苹果酸-乳酸发酵质量的测定方法技术

本发明专利技术涉及一种葡萄酒苹果酸－乳酸发酵质量的测定方法，属生物传感器技术领域。制备方法是将Ｌ－乳酸氧化酶固定化后与Ｈ↓［２］Ｏ↓［２］电极结合构成Ｌ－乳酸酶电极生物传感器，采用０．１ｍｍｏｌ．Ｌ↑［－１］　ｐＨ　７．２的磷酸盐缓冲液，标准液含Ｌ－乳酸５００ｍｇ．Ｌ↑［－１］，取标准液２５μｌ注入反应池２０ｓ后仪器自动显示酶膜基础活性，按动定标键（Ｃａｌｉｂｒａｔｅ）定标５００，自动清洗后即可测定样品。

【技术实现步骤摘要】
专利说明 所属领域 本专利技术涉及一种葡萄酒的分析测定方法。具体来说，本专利技术涉及一种对葡萄酒生产中的苹果酸-乳酸发酵液中成分的测定方法。
技术介绍
苹果酸-乳酸发酵(malolactic fermentation简称MLF)是葡萄酒生产的酒精发酵结束后，葡萄酒在乳酸菌作用下将苹果酸二次发酵分解成乳酸和二氧化碳的过程 当葡萄酒中苹果酸含量较高时，葡萄酒口感酸涩、粗糙。经过苹果酸-乳酸发酵不仅可以降低生葡萄酒的酸涩和粗糙感，使之柔和、圆润，而且还能提高葡萄酒的感官质量和生物稳定性。所以了解发酵过程中乳酸的变化是十分重要而且必须的。但乳酸的化学分析法一般要进行预分离、衍生化等繁琐的前处理，即使采用HPLC法(高效液相色谱法)分析一份样品也需要10 min以上。 例如郎永梅等(2006年)采用HPLC法(高效液相色谱法)检测苹果酸-乳酸发酵过程中乳酸、苹果酸含量，由于乳酸的出峰时间在3.83分钟、苹果酸的出峰时间在3.54分钟，两吸收峰相距不到0.5分钟，因峰距过近相互干扰难以消除；其次每次分析从层析柱稳定平衡、进样分析、冲洗再生一个循环至少需要12～15分钟本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葡萄酒苹果酸－乳酸发酵质量的测定方法，包括下述顺序的步骤：　１固定化Ｌ－乳酸氧化酶膜的制备　１．１载体膜圈制备　取直径１０ｍｍ的核微孔膜片用环氧树脂粘贴在内径９．５ｍｍ的橡胶密封圈上，放置过夜使固化完全即得。　１．２载体膜圈表面处理　将载体膜圈置２０％甲醇溶液中浸泡１５ｍｉｎ，取出用蒸馏水冲净、晾干。　１．３固定化复合酶膜制备　取Ｌ－乳酸氧化酶０．１单位、２０％牛血清白蛋白５μｌ、２％戊二醛２μｌ、均匀喷涂在载体膜圈表面，静置固化１５ｍｉｎ，用蒸馏水洗去多余反应物，冷冻干燥即得。将此固定化复合酶膜装在过氧化氢电极头部便构成酶电极。　２固定化Ｌ－乳酸氧化酶膜参数　基础活性＞５０，线性：１～５...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：史建国，孙士青，杨俊慧，马耀宏，李雪梅，赵晓华，孟庆军，杨艳，王丙莲，张利群，
申请(专利权)人：山东省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]