一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法技术

本发明专利技术属于分析检测技术领域，具体涉及一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法。本发明专利技术的分离检测方法包括以下步骤：将待测样品、水、甲醇混合进行浸提，然后得浸提液；然后将浸提液采用固相萃取柱净化并过滤，得待测样品溶液；采用超高效液相色谱‑串联质谱法对待测样品溶液进行检测，所用流动相为甲醇和体积分数为0.1％的氨水，洗脱方式为等度洗脱；然后根据标准工作曲线计算待测样品中辛基酚和壬基酚同分异构体的含量。本发明专利技术的分离检测方法前处理简单，净化效果好，快速、准确地实现了辛基酚以及壬基酚各同分异构体的定性以及定量分析。

【技术实现步骤摘要】
一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法
本专利技术属于分析检测
，具体涉及一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法。
技术介绍
辛基酚以及壬基酚等烷基酚类化合物具有优异的表面活性，被广泛应用于化妆品、皮革处理剂等领域。水基胶是一种卷烟制品中常用的胶，其中含有辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚，在使用过程中辛基酚聚氧乙烯醚和壬基酚聚氧乙烯醚会发生降解产生辛基酚和壬基酚等烷基酚类化合物。辛基酚以及壬基酚等烷基酚类化合物因其化学结构与动物及人类的雌性激素相似，一旦进入动物以及人体内会干扰内分泌的正常生理作用，是典型的内分泌干扰物；并且这类化合物难以自行生物降解，对环境造成严重的危害。因此，这类化合物在使用过程中对使用量均有所限制，对辛基酚和壬基酚等烷基酚类化合物的准确定量分析对卷烟制品等物质的安全生产具有重要意义。相关毒理学实验表明，辛基酚和壬基酚每种同分异构体的雌激素效应不同，对环境造成危害的并不是所有异构体，所以有必要对每种同分异构体进行单独定量研究，而对每种同分异构体提取是定量的前提。工业生产中水基胶中的辛基酚和壬基酚主要的同分异构体为4-正壬基酚(CAS：104-40-5，)、4-壬基酚(CAS：25154-52-3，)、4-正辛基酚(CAS：1806-26-4，)和4-叔辛基酚(CAS：140-66-9，)，其结构以及理化性质的相似性决定了它们难以分离，因此现有技术中针对上述四种同分异构体的定量研究极少。现有的辛基酚和壬基酚的检测方法主要有气相色谱-质谱法、高效液相色谱法以及超高效液相色谱法等。但现有的检测方法中样品的提取过程复杂，净化条件要求苛刻；而且由于多种同分异构体难以分离，因此基本上都是检测了其中一种同分异构体或者是所有同分异构体的总量，未对多种同分异构体进行单独定量研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，以解决现有的前处理复杂以及同分异构体难以分离的问题。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，包括以下步骤：a)将待测样品、水、甲醇混合进行浸提，然后得浸提液；然后将浸提液采用固相萃取柱净化并过滤，得待测样品溶液；b)采用超高效液相色谱-串联质谱法对待测样品溶液进行检测，所用流动相为甲醇和浓度为0.05～0.1％的氨水，洗脱方式为等度洗脱；c)然后根据标准工作曲线计算待测样品中辛基酚和壬基酚同分异构体的含量。本专利技术建立了一种对对位壬基酚(4-正壬基酚以及4-壬基酚)以及对位辛基酚(4-正辛基酚以及4-叔辛基酚)的分离定性以及定量分析的检测方法。本专利技术的分离检测方法中采用甲醇提取以及固相萃取净化的前处理方法，前处理过程简单并且萃取效率高，并且对其他共萃物如蛋白、纤维、淀粉等起到很好的吸附净化作用，避免了待测样品中基质对目标物检测的干扰；采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法进行检测，有效将各同分异构体分离，快速、准确地实现了辛基酚以及壬基酚的各同分异构体的定性以及定量分析。本专利技术的分离检测方法适用于多种物质中辛基酚以及壬基酚同分异构体的检测，如水基胶、化妆品等。其中氨水即为氨与水混合而成的溶液，其中氨水的浓度为0.05～0.1％(体积)。为提高各检测成分的响应值，优选的，所述甲醇和氨水的体积比为(90：10)～(96：4)。为使待测样品中的成分最大限度的提取处理，优选的所述前处理中每0.4～0.6g待测样品对应使用4～6mL的水以及9～11mL的甲醇。为简化操作过程，优选的，所述将浸提液采用固相萃取柱净化并过滤具体为：将滤膜连接于注射式固相萃取柱底部，然后将浸提液上样，并推动注射器推杆使浸提液依次经过固相萃取柱以及滤膜。优选的，所用滤膜为0.45μm有机相滤膜过滤。其中注射式固相萃取柱具体结构包括柱管和注射器推杆。柱管内部有上下两个筛板，筛板之间分散填充有吸附剂，柱管的底端可连接滤膜。通过调整浸提液通过固相萃取柱的速度进一步优化净化效果，优选的所述浸提液经过固相萃取柱的速度为每分钟30～40滴，所述固相萃取柱中吸附相由石墨烯以及N-丙基乙二胺(PSA)按1:1-1:1.5的质量比组成。通过优化色谱柱以及柱温进一步提高各同分异构体的分离效果，优选的所述采用超高效液相色谱-串联质谱法检测所用色谱柱为ACQUITYUPLCBEHC18，柱温为30～40℃。通过优化质谱条件进一步提高检测的灵敏度以及准确性，优选的所述采用超高效液相色谱-串联质谱法检测所用质谱条件为：扫描方式：负离子扫描；电喷雾离子源；离子源温度为120～150℃；毛细管电压：2.6～3.0kV；锥孔气流量：50～60L/hour；脱溶剂气流量：600～800L/hour；脱溶剂气温度：300～350℃；多反应监测扫描模式采集(MRM)。其中MRM参数如表1所示。表1MRM参数附图说明图1为本专利技术的实施例1中的分离检测方法的流程图；图2为本专利技术的试验例2中的加标后样品的色谱图；图3为本专利技术的试验例3中方法1的加标后样品的色谱图；图4为本专利技术的试验例3中方法2的加标后样品的色谱图；图5为本专利技术的试验例3中方法3的加标后样品的色谱图。具体实施方式下面结合附图以及实施例对本专利技术作进一步说明。以下实施例中所用甲醇为色谱纯；所用仪器分别有：WatersTQS四级杆串联质谱仪；磁力搅拌器(美国talboys公司)；Sigma3-30k离心机(德国Sigma公司)；AE163电子天平(感量：0.0001g)和AE166电子天平(感量：0.01g)(瑞士Mettler公司)。实施例1本实施例的辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，其流程如图1所示，包括以下步骤：(1)对样品进行前处理a)样品称重、萃取：准确称取0.5g水基胶样品(精确至0.01g)于25mL的具塞三角瓶中，然后加入5mL水使水基胶样品分散，之后移取10mL甲醇至具塞三角瓶中，并在具塞三角瓶中放入磁力搅拌；将具塞三角瓶放置于磁力搅拌器上以1000rpm的速率搅拌0.5h。b)净化：搅拌结束后移取2.0mL上清液上样于5mL的注射式固相萃取柱(吸附剂由20mg石墨烯以及20mg的PSA混合而成)中，并在固相萃取柱的底部接上0.45μm有机相滤膜，推动注射器推杆使得浸提液经过固相萃取柱(速率为每分钟30滴)以及滤膜而得到净化和过滤，得滤液；然后移取100μL滤液，加入900μL甲醇稀释，得待测样品溶液；(2)将待测样品溶液采用UPLC-MS/MS检测，计算各色谱峰的峰面积检测时所用条件为：液相色谱：色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18(100mm×2.1mm，1.7um，美国Waters公司)；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为浓度0.1％的氨水，流速：0.2mL/min；柱温：30℃；进样量：2μL；等度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/na)将待测样品、水、甲醇混合进行浸提，然后得浸提液；然后将浸提液采用固相萃取柱净化并过滤，得待测样品溶液；/nb)采用超高效液相色谱-串联质谱法对待测样品溶液进行检测，所用流动相为甲醇和体积分数为0.05～0.1％的氨水，洗脱方式为等度洗脱；/nc)然后根据标准工作曲线计算待测样品中辛基酚和壬基酚同分异构体的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
a)将待测样品、水、甲醇混合进行浸提，然后得浸提液；然后将浸提液采用固相萃取柱净化并过滤，得待测样品溶液；
b)采用超高效液相色谱-串联质谱法对待测样品溶液进行检测，所用流动相为甲醇和体积分数为0.05～0.1％的氨水，洗脱方式为等度洗脱；
c)然后根据标准工作曲线计算待测样品中辛基酚和壬基酚同分异构体的含量。


2.根据权利要求1所述的辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，其特征在于，步骤b)中所述甲醇和氨水的体积比为(90：10)～(96：4)。


3.根据权利要求1所述的辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，其特征在于，所述前处理中每0.4～0.6g待测样品对应使用4～6mL的水以及9～11mL的甲醇。


4.根据权利要求1所述的辛基酚和壬基酚同分异构体的分离检测方法，其特征在于，所述将浸提液采用固相萃取柱净化并过滤具体为：将滤膜连接于注射式固相萃...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨飞，王颖，邓惠敏，刘珊珊，纪元，李中皓，范子彦，边照阳，唐纲岭，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，
类型：发明
国别省市：河南;41