广谱冠状病毒膜融合抑制剂及其抗艾滋病病毒的应用制造技术

本发明专利技术公开了广谱冠状病毒膜融合抑制剂及其抗艾滋病病毒的应用。该应用是对具有抗病毒活性的多肽用亲脂性化合物修饰得到的脂肽的下述任一种应用：P1、在制备病毒抑制剂中的应用；P2、在制备治疗或/和预防病毒所致疾病的产品中的应用；P3、在制备增强所述具有抗病毒活性的多肽的抗病毒活性产品中的应用。本发明专利技术通过对广谱冠状病毒融合抑制剂EK1多肽进行胆固醇化学修饰所获得的脂肽EK1M。EK1M不但对SARS‑CoV‑2和SARS‑CoV具有显著提高的抑制活性，同时对艾滋病病毒HIV‑1、T20耐药HIV‑1病毒株、HIV‑2和猴艾滋病病毒SIV以及水泡性口炎病毒(VSV)的感染具有极强的抑制活性。

【技术实现步骤摘要】
广谱冠状病毒膜融合抑制剂及其抗艾滋病病毒的应用
本专利技术涉及一种基于脂肽的广谱冠状病毒膜融合抑制剂及其抗病毒的用途。
技术介绍
艾滋病病毒即人类免疫缺陷病毒(HIV)是一种带包膜的RNA逆转录病毒，属于反转录病毒科，分为HIV-1和HIV-2两个亚型。HIV感染靶细胞由其表面的包膜(Env)糖蛋白介导，gp120亚基识别并结合靶细胞膜表面的受体和辅助受体分子，gp41亚基则介导病毒与细胞的膜融合过程。艾滋病严重危害人类健康和社会稳定，但目前既无有效的预防疫苗，也无根治HIV感染的药物。针对病毒复制的不同环节，美国FDA已批准30余种抗艾滋病药物上市，但恩夫韦肽(T20)是仅有的一个HIV膜融合抑制剂。T20是来源于gp41蛋白C端螺旋序列(CHR)的一个36氨基酸多肽，通过竞争性地与gp41的N端螺旋序列结合阻断六聚体螺旋核心结构(6-HB)的形成而发挥抗病毒作用(1)。但以前的研究表明，T20在体内外都容易诱导耐药，这极大地限制了它的临床应用，研究开发针对HIV膜融合的新药一直是国内外重要课题。冠状病毒(CoV)是一类具有包膜的单股正链RNA病毒，属于冠状病毒科，分为α，β，γ和δ四个属。目前已知有7种CoV感染人类，包括α属的HCoV-229E和HCoV-NL63，β属的HCoV-OC43、HCoV-HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV以及最近出现的新冠病毒SARS-CoV-2。前4种HCoV是常见的全球性流行病原体，通常只引起普通的感冒症状，约占成人上呼吸道感染的10％至30％，但对儿童、老年人和免疫功能低下的患者仍可以造成严重甚至致命的疾病。SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2则属于高致病病原体，能导致严重的肺部疾病，且病死率高。SARS-CoV-2与SARS-CoV具有高度同源性且使用相同的细胞受体血管紧张素转换酶2(ACE2)。自SARS-CoV爆发以来，针对冠状病毒的膜融合抑制剂研发备受重视。类似于HIV等许多I型包膜病毒，位于冠状病毒表面的刺突状包膜糖蛋白(S蛋白)介导病毒对靶细胞的侵入过程，其S1亚基负责与细胞表面的受体结合，S2亚基则发挥病毒与细胞膜融合的功能。在融合过程中，位于S2亚基N端的融合肽(fusionpeptide)首先被暴露并插入到靶细胞膜，紧接着七肽重复域1(HR1或NHR)和七肽重复域2(HR2或CHR)形成六螺旋束结构(6-HB)，以拉近病毒膜和细胞膜发生融合反应。同样，冠状病毒膜融合抑制剂也是主要来自于HR2序列的多肽，如SARS-CoV和MERS-CoV融合抑制剂(2-9)。最近报道了一个具有广谱抗冠状病毒作用的EK1多肽，它是基于HCoV-OC43的HR2序列设计，对HCoV-OC43、SARS-CoV、MERS-CoV、HCoV-229E和HCoV-NL63均有抑制作用(9)。然而，目前文献报道的冠状病毒融合抑制剂的抗病毒活性相对较低，成药性有待提高。参考文献：1.HeY.2013.SynthesizedpeptideinhibitorsofHIV-1gp41-dependentmembranefusion.CurrPharmDes19:1800-9.2.LuL,LiuQ,ZhuY,ChanKH,QinL,LiY,WangQ,ChanJF,DuL,YuF,MaC,YeS,YuenKY,ZhangR,JiangS.2014.Structure-baseddiscoveryofMiddleEastrespiratorysyndromecoronavirusfusioninhibitor.NatCommun5:3067.3.LiuS,XiaoG,ChenY,HeY,NiuJ,EscalanteCR,XiongH,FarmarJ,DebnathAK,TienP,JiangS.2004.Interactionbetweenheptadrepeat1and2regionsinspikeproteinofSARS-associatedcoronavirus:implicationsforvirusfusogenicmechanismandidentificationoffusioninhibitors.Lancet363:938-47.4.WangC,XiaS,ZhangP,ZhangT,WangW,TianY,MengG,JiangS,LiuK.2018.DiscoveryofHydrocarbon-StapledShortalpha-HelicalPeptidesasPromisingMiddleEastRespiratorySyndromeCoronavirus(MERS-CoV)FusionInhibitors.JMedChem61:2018-2026.5.BoschBJ,MartinaBE,VanDerZeeR,LepaultJ,HaijemaBJ,VersluisC,HeckAJ,DeGrootR,OsterhausAD,RottierPJ.2004.Severeacuterespiratorysyndromecoronavirus(SARS-CoV)infectioninhibitionusingspikeproteinheptadrepeat-derivedpeptides.ProcNatlAcadSciUSA101:8455-60.6.UjikeM,NishikawaH,OtakaA,YamamotoN,YamamotoN,MatsuokaM,KodamaE,FujiiN,TaguchiF.2008.Heptadrepeat-derivedpeptidesblockprotease-mediateddirectentryfromthecellsurfaceofsevereacuterespiratorysyndromecoronavirusbutnotentryviatheendosomalpathway.JVirol82:588-92.7.LiuIJ,KaoCL,HsiehSC,WeyMT,KanLS,WangWK.2009.Identificationofaminimalpeptidederivedfromheptadrepeat(HR)2ofspikeproteinofSARS-CoVandcombinationofHR1-derivedpeptidesasfusioninhibitors.AntiviralRes81:82-7.8.AydinH,Al-KhoolyD,LeeJE.2014.InfluenceofhydrophobicandelectrostaticresiduesonSARS-coronavirusS2proteinstability:insightsintomechanismsofgeneralviralfusionandinhibitordesign.ProteinSci23:603-17.9.XiaS,YanL,XuW,AgrawalAS,Algais本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.试剂的应用，其特征在于：所述试剂为R1-R7中至少一种；所述R1为脂肽，所述脂肽为用亲脂性化合物修饰具有抗病毒活性的多肽得到的化合物；所述R2为所述脂肽的药用盐；所述R3为所述脂肽的衍生物；所述R4为由所述脂肽形成的多聚体；所述R5为由所述脂肽的药用盐形成的多聚体；所述R6为由所述脂肽的衍生物形成的多聚体；所述R7为组合物，所述组合物含有所述R1、所述R2、所述R3、所述R4、所述R5和所述R6中至少一种；/n所述应用为下述任一种；/nP1、所述试剂在制备病毒抑制剂中的应用；/nP2、所述试剂在制备治疗或/和预防病毒所致疾病的产品中的应用；/nP3、所述试剂在制备增强所述具有抗病毒活性的多肽的抗病毒活性产品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.试剂的应用，其特征在于：所述试剂为R1-R7中至少一种；所述R1为脂肽，所述脂肽为用亲脂性化合物修饰具有抗病毒活性的多肽得到的化合物；所述R2为所述脂肽的药用盐；所述R3为所述脂肽的衍生物；所述R4为由所述脂肽形成的多聚体；所述R5为由所述脂肽的药用盐形成的多聚体；所述R6为由所述脂肽的衍生物形成的多聚体；所述R7为组合物，所述组合物含有所述R1、所述R2、所述R3、所述R4、所述R5和所述R6中至少一种；
所述应用为下述任一种；
P1、所述试剂在制备病毒抑制剂中的应用；
P2、所述试剂在制备治疗或/和预防病毒所致疾病的产品中的应用；
P3、所述试剂在制备增强所述具有抗病毒活性的多肽的抗病毒活性产品中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述病毒抑制剂对如下至少一种病毒具有抗病毒活性：反转录病毒科的病毒、弹状病毒科的病毒和/或冠状病毒科的病毒；
所述治疗或/和预防病毒所致疾病为治疗或/和预防如下至少一种病毒所致疾病：反转录病毒科的病毒、弹状病毒科的病毒和/或冠状病毒科的病毒；
所述增强具有抗病毒活性的多肽的抗病毒活性为增强具有抗病毒活性的多肽的抗如下至少一种病毒的活性：反转录病毒科的病毒、弹状病毒科的病毒和/或冠状病毒科的病毒。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述具有抗病毒活性的多肽为对冠状病毒科病毒具有...

【专利技术属性】
技术研发人员：何玉先，朱园美，于丹葳，种辉辉，
申请(专利权)人：中国医学科学院病原生物学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11