一种通过外周血循环肿瘤细胞检测结直肠癌患者E-Cadherin表达的方法技术

一种检测结直肠癌患者外周血循环的E‑Cadherin蛋白表达的方法，具体的，通过试剂盒（稀释液45mL、脱色液1mL、染色液A 0.5mL、染色液B 1mL、兔抗人E‑cad抗体、山羊抗兔IgG/HRP 100μL、0.1%Triton X‑100 100μL、0.3%H

【技术实现步骤摘要】
一种通过外周血循环肿瘤细胞检测结直肠癌患者E-Cadherin表达的方法
本专利技术涉及一种检测E-Cadherin表达的新方法，尤其是通过外周血检测无法获取组织标本的晚期或复发结直肠癌患者E-Cadherin表达的方法。
技术介绍
结直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，2018年死亡率居恶性肿瘤第四位。在美国，结直肠癌是第三大最常见的恶性肿瘤。在国内，2018年中国全年流行病学数据：结直肠癌的发病率和死亡率均为第5位，年新发病例37.63万，25％被确诊时已发生转移。结直肠癌早期多无症状，出现症状时多为中晚期且有转移。尽管外科手术和化疗方案不断革新，进展期结直肠癌患者的生存率依旧很差。由于结直肠癌尚缺乏较好的预防方法，所以改善结直肠癌预后并提高生存率的最有效的措施就是早期诊断并治疗结直肠早期癌及癌前病变。E-钙粘蛋白(E—Cadherin)是上皮细胞表型最经典的标志物，E-Cadherin表达的下调标志着细胞之间粘附能力的下降，因此E-Cadherin被当做鉴定结直肠癌EMT发生的主要手段之一，作为一类细胞表面糖蛋白，E-Ca本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测结直肠癌患者外周血循环的E-Cadherin蛋白表达的试剂盒，其特征在于，包括稀释液45mL、脱色液1mL、染色液A 0.5mL、染色液B 1mL、兔抗人E-cad抗体、山羊抗兔IgG/HRP 100μL、0.1% Triton X-100 100μL、0.3% H

【技术特征摘要】
1.一种检测结直肠癌患者外周血循环的E-Cadherin蛋白表达的试剂盒，其特征在于，包括稀释液45mL、脱色液1mL、染色液A0.5mL、染色液B1mL、兔抗人E-cad抗体、山羊抗兔IgG/HRP100μL、0.1%TritonX-100100μL、0.3%H2O2100μL、试剂A、试剂B、6×PBS缓冲液60mL。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稀释液是由1mmol/LEDTA+1mmol月硅酸盐+0.1%BSA+0.2%泊洛沙姆组成。


3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述脱色液是由95%酒精与100%二甲苯按容积比1:1组成。


4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述染色液A为DAB染色液；所述染色液B为苏木素染色液。


5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂A为乙醇和甲醛按照体积比3：1组成；所述试剂B为二甲苯。


6.一种利用权利要求1-5任一项所述的试剂盒非诊断目的检测结直肠癌外周血循环肿瘤细胞PDL-1基因突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）利用膜过滤装置分离获取无法获得组织标本的复发结直肠癌患者外周血中的CTC：采集无法获取组织标本结直肠癌患者外周血：肘正中静脉外周血5ml；
（2）外周血样预处理：将采集的外周血样采用稀释液进行10倍稀释，稀释后加多聚甲醛固定外周血样10分钟，固定终浓度为0.25%；
（3）利用膜过滤分离肿瘤细胞装置过滤外周血样，分离获得外周血CTC：将预处理的外周血样加入到膜过滤分离肿瘤细胞装置的血样容器中，使其依靠重...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯景阳，李文涛，李琛琛，洪瑛，
申请(专利权)人：山东凯歌智能机器有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37