检测外周血循环肿瘤细胞食管鳞癌患者E-Cadherin蛋白表达的非诊断目的方法技术

本发明专利技术提供一种通过检测外周血循环肿瘤细胞食管鳞癌患者E‑Cadherin蛋白表达的非诊断目的方法，具体的，通过试剂盒（稀释液、脱色液、染色液A、染色液B、兔抗人E‑cad抗体、山羊抗兔IgG/HRP、0.1%Triton X‑100、0.3%H

【技术实现步骤摘要】
检测外周血循环肿瘤细胞食管鳞癌患者E-Cadherin蛋白表达的非诊断目的方法
本专利技术涉及一种检测E-Cadherin蛋白表达的新方法，尤其是通过外周血检测无法获取组织标本的晚期或复发食管鳞癌患者E-Cadherin蛋白表达的方法。
技术介绍
食管癌是世界上最常见的消化道恶性肿瘤之一，约占所有恶性肿瘤的2％。食管癌的病理类型主要包括食管鳞状细胞癌(esophagealsquamouscarcinomaESCC)和食管腺癌(esophagealadenocarcinomaEADC)，在我国的食管癌患者中约90％以上均为食管鳞状细胞癌。近年来随着食管癌诊断技术的不断提高，手术操作技能的不断改进，术前新辅助化疗的应用，再加上术后规律放、化疗的施行，食管癌患者的生活质量在一定程度上逐步得到了改善，但是从整体上而言，食管癌治疗的效果仍然不尽如人意，我国食管癌患者术后的5年总体生存率仅为20％一30％。E-钙粘蛋白(E—Cadherin)是上皮细胞表型最经典的标志物，E-Cadherin表达的下调标志着细胞之间粘附能力的下降，因此E-C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测食管鳞癌患者外周血循环的E-Cadherin蛋白表达的试剂盒，其特征在于，包括稀释液45mL、脱色液1mL、染色液A 0.5mL、染色液B 1mL、兔抗人E-cad抗体、山羊抗兔IgG/HRP 100μL、0.1% Triton X-100 100μL、0.3% H

【技术特征摘要】
1.一种检测食管鳞癌患者外周血循环的E-Cadherin蛋白表达的试剂盒，其特征在于，包括稀释液45mL、脱色液1mL、染色液A0.5mL、染色液B1mL、兔抗人E-cad抗体、山羊抗兔IgG/HRP100μL、0.1%TritonX-100100μL、0.3%H2O2100μL、试剂A、试剂B、6×PBS缓冲液60mL。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稀释液是由1mmol/LEDTA+1mmol月硅酸盐+0.1%BSA+0.2%泊洛沙姆组成。


3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述脱色液是由95%酒精与100%二甲苯按容积比1:1组成。


4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述染色液A为DAB染色液；所述染色液B为苏木素染色液。


5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂A为乙醇和甲醛按照体积比3：1组成；所述试剂B为二甲苯。


6.一种利用权利要求1-5任一项所述的试剂盒非诊断目的检测食管鳞癌外周血循环肿瘤细胞PDL-1基因突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）利用膜过滤装置分离获取无法获得组织标本的复发食道鳞癌患者外周血中的CTC：采集无法获取组织标本食道鳞癌患者外周血：肘正中静脉外周血5ml；
（2）外周血样预处理：将采集的外周血样采用稀释液进行10倍稀释，稀释后加多聚甲醛固定外周血样10分钟，固定终浓度为0.25%；
（3）利用膜过滤分离肿瘤细胞装置过滤外周血样，分离获得外周血CTC：将预处理的外周血样加入到膜过滤分离肿瘤细胞装置的血样容器中，使其依靠重...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪瑛，侯景阳，李文涛，李琛琛，
申请(专利权)人：山东凯歌智能机器有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37