一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白及其制备方法和应用，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白包括OPTI‑p72蛋白和一种伴侣蛋白，其中所述OPTI‑p72蛋白的核苷酸序列为经优化后的序列OPTI‑p72如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术能够在大肠杆菌中直接可溶性表达P72，克服了现有技术中的诸多问题，且制备方法简单、成本低。

【技术实现步骤摘要】
一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白及其制备方法和应用
本专利技术属于兽用生物制品
涉及一种重组的非洲猪瘟P72亚单位可溶性融合蛋白及在制备诊断、预防和治疗非洲猪瘟疫苗中的应用。
技术介绍
非洲猪瘟(Africanswinefever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus，ASFV)引起的猪的急性、热性、高度接触性传染病。猪是ASFV自然感染的唯一哺乳动物宿主，包括家猪和野猪，尤其是家猪，易感性极高。猪感染非洲猪瘟病毒后临床上以皮肤充血，内脏器官出血，高热为特征，发病率及死亡率高达100％。世界动物卫生组织将其列为A类疫病，我国也将其列为一类动物传染病。2018年8月份以来，非洲猪瘟在我国多个省份爆发，给我国养猪业带来了严重的经济损失。尽管已经有许多非洲猪瘟的研究性报告，但目前世界上尚未有有效预防非洲猪瘟的疫苗和治疗该病的药物发现，迫切需要新型疫苗的研发和生产来预防非洲猪瘟。ASFV病毒是具有囊膜的虫媒DNA病毒。病毒颗粒呈二十面体对称结构，平均直径200nm，表面有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白包括OPTI-p72蛋白和一种伴侣蛋白，其中所述OPTI-p72蛋白的核苷酸序列为p72蛋白经优化后的序列OPTI-p72如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白包括OPTI-p72蛋白和一种伴侣蛋白，其中所述OPTI-p72蛋白的核苷酸序列为p72蛋白经优化后的序列OPTI-p72如SEQIDNO.1所示。


2.根据权利要求1所述的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白，其特征在于，所述伴侣蛋白为TF蛋白。


3.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白的核苷酸序列OPTI-TF-p72是OPTI-p72蛋白的5’端插入TF蛋白的核苷酸序列，所述OPTI-TF-p72蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。


4.根据权利要求3所述的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示。


5.根据权利要求4所述的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白在如SEQIDNO.4所示的氨基酸序列的氨基末端或羧基末端连接有poly-His、FLAG、c-myc、HA和poly-Arg中的一种标签。


6.一种重组的非洲猪瘟病毒p72亚单位可溶性融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
1)将含有OPTI-p72蛋白和一种伴侣蛋白的基因克隆到原核表达载体中，得到含有非洲猪瘟病毒OPTI-p72蛋白和一种伴侣蛋白编码基因的重组质粒；其中，所述OPTI-p72蛋白的核苷酸序列为p72蛋白经优化后的序列OPTI-p72如SEQIDNO.1所示；
2)再将步骤1)所述重...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱泓，吴有强，张强，徐玉兰，吴素芳，车影，
申请(专利权)人：浙江海隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33