一种促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建的靶向生长因子及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建的靶向生长因子及其应用。所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子是碱性成纤维细胞生长因子和胶原结合区融合形成的蛋白质。实验证明：经过胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子治疗后，不孕患者月经血量、子宫内膜厚度和瘢痕子宫内膜面积均有所改善。组织学研究显示血管密度明显增加。3名患者在妊娠20周时达到妊娠。1名患者产下健康婴儿。本发明专利技术利用胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子多点注射到子宫内膜，改善了子宫内膜血管生成和增殖能力并增加了持续的妊娠率。

【技术实现步骤摘要】
一种促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建的靶向生长因子及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建的靶向生长因子及其应用。
技术介绍
子宫内膜粘连(IUAs)也称为Asherman综合征(AS)，是子宫内膜创伤或炎症侵扰的结果，是子宫不孕的主要原因。对于有症状的IUAs，利用宫腔镜粘连松解术以恢复子宫腔的正常解剖是目前唯一推荐的方法。然而，IUAs的复发非常常见且难以治疗，尤其是严重的粘连。子宫内膜是一种独特的循环性的组织再生系统，依赖于子宫内膜血管的周期性生长和消退。子宫内膜的严重损伤，也就是对上皮下毛细血管丛的损伤，会导致子宫内膜再生的阻塞。天然细胞，包括上皮细胞，基质细胞，血管内皮细胞和免疫细胞，被成纤维细胞和肌成纤维细胞取代，后者产生大量细胞外基质，包括胶原纤维，最终导致子宫内膜瘢痕形成。致密纤维化区域的子宫内膜薄而萎缩，腺体无活性，血管化基质不足，这都阻止了胚胎的正常植入。目前，针对这种情况的改善生育结果的有效方法很少。bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)是毛细血管内皮细胞的有效的体外促分裂原，在体内能刺激血管生成，并在伤口愈合和组织修复中发挥重要作用。在月经周期期间，bFGF对于子宫内膜中的血管生成，再上皮化，血管功能和基质细胞增殖是必需的。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是如何促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建，治疗和/或预防子宫内膜粘连导致的子宫不孕。为了解决上述技术问题，本专利技术首先提供了胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)的新用途。本专利技术提供了胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)在如下1)-9)中任一种中的应用：1)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品；2)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品；3)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品；4)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品；5)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品；6)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品；7)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品；8)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品；9)制备提高妊娠率的产品；所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)是碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胶原结合区(CBD)融合形成的蛋白质。上述应用中，所述碱性成纤维细胞生长因子为如下a1)或a2)或a3)所示的蛋白质：a1)氨基酸序列是SEQIDNo.1的第25-178位所示的蛋白质；a2)将SEQIDNo.1的第25-178位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；a3)与SEQIDNo.1的第25-178位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质；所述胶原结合区为如下b1)或b2)或b3)所示的蛋白质：b1)氨基酸序列是SEQIDNo.1的第3-9位所示的蛋白质；b2)将SEQIDNo.1的第3-9位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；b3)与SEQIDNo.1的第3-9位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。在本专利技术的一个具体实施例中，所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子为如下c1)或c2)或c3)所示的蛋白质：c1)氨基酸序列是SEQIDNo.1所示的蛋白质；c2)将SEQIDNo.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；c3)与SEQIDNo.1所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。上述a2)、b2)、c2)中的蛋白质，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相关的生物材料的新用途。本专利技术提供了与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相关的生物材料在如下A1)-A10)中任一种中的应用：A1)制备上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子；A2)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品；A3)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品；A4)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品；A5)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品；A6)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品；A7)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品；A8)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品；A9)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品；A10)制备提高妊娠率的产品；所述生物材料为下述B1)至B12)中的任一种：B1)编码上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；B9)含有B1)所述核酸分子的转基因细胞系；B10)含有B2)所述表达盒的转基因细胞系；B11)含有B3)所述重组载体的转基因细胞系；B12)含有B4)所述重组载体的转基因细胞系。进一步的，B1)所述核酸分子为如下C1)或C2)或C3)：C1)编码序列是序列表中SEQIDNo.2所示的cDNA分子或DNA分子；C2)与C1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子的cDNA分子或基因组DNA分子；C3)在严格条件下与C1)或C2)限定的核苷酸序列杂交，且编码上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子的cDNA分子或基因组DNA分子。其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本专利技术的编码CBD-bFGF的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本专利技术分离得到的CBD-bFGF的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要编码CBD-bFGF且具有CBD-bFGF功能，均是衍生于本专利技术的核苷酸序列并且等同于本专利技术的序列。这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的编码SEQIDNo.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子在如下1)-9)中任一种中的应用：/n1)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品；/n2)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品；/n3)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品；/n4)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品；/n5)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品；/n6)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品；/n7)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品；/n8)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品；/n9)制备提高妊娠率的产品；/n所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子是碱性成纤维细胞生长因子和胶原结合区融合形成的蛋白质。/n

【技术特征摘要】
1.胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子在如下1)-9)中任一种中的应用：
1)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品；
2)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品；
3)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品；
4)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品；
5)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品；
6)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品；
7)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品；
8)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品；
9)制备提高妊娠率的产品；
所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子是碱性成纤维细胞生长因子和胶原结合区融合形成的蛋白质。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述碱性成纤维细胞生长因子为如下a1)或a2)或a3)所示的蛋白质：
a1)氨基酸序列是SEQIDNo.1的第25-178位所示的蛋白质；
a2)将SEQIDNo.1的第25-178位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；
a3)与SEQIDNo.1的第25-178位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质；
或，所述胶原结合区为如下b1)或b2)或b3)所示的蛋白质：
b1)氨基酸序列是SEQIDNo.1的第3-9位所示的蛋白质；
b2)将SEQIDNo.1的第3-9位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；
b3)与SEQIDNo.1的第3-9位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子为如下c1)或c2)或c3)所示的蛋白质：
c1)氨基酸序列是SEQIDNo.1所示的蛋白质；
c2)将SEQIDNo.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；
c3)与SEQIDNo.1所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。


4.与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相关的生物材料在如下A1)-A10)中任一种中的应用：
A1)制备权利要求1-3中任一所述的胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子；
A2)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品；
A3)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品；
A4)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品；
A5)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品；
A6)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品；
A7)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品；
A8)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品；
A9)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品；
A10)制备提高妊娠率的产品；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴建武，胡娅莉，陈冰，侯祥林，
申请(专利权)人：中国科学院遗传与发育生物学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11