新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物lncRNA的应用制造技术

本发明专利技术公开了新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物lncRNA的应用。本发明专利技术首次公开了lncRNA G034337作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物，通过提取新生儿肠外营养相关性肝病患者和健康对照者全血样本的总RNA，设计qRT‑PCR特异性引物，并通过常规qRT‑PCR检测特异性lncRNA G034337的表达量，结果显示在新生儿肠外营养相关性肝病患儿中lncRNA G034337发生了显著性的上调表达；由此说明，通过检测lncRNA G034337的表达水平，可以有效区分新生儿肠外营养相关性肝病患儿和正常健康人。

【技术实现步骤摘要】
新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物lncRNA的应用
本专利技术涉及分子生物学
，尤其涉及一种新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物lncRNA的应用。
技术介绍
lncRNA是一类转录本长度大于200bp的非编码RNA产物，在转录、转录后和染色体修饰等多个层面，调控胚胎发育、细胞增殖、转移和分化等各种生命活动，其异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。lncRNA有组织特异性与时空特异性，不同组织之间的lncRNA表达量不同，同一组织或器官在不同生长阶段，其中的lncRNA表达量也会变化，lncRNA可从染色质重塑、转录调控及转录后加工等多种层面实现对基因表达的调控。lncRNA启动子同样可以结合转录因子，如Oct3/4、Nanog、CREB、Sp1、c-myc、Sox2与p53，局部染色质组蛋白同样具有特征性的修饰方式与结构特征，序列上保守性较低，只有约12%的lncRNA可在人类之外的其它生物中找到，其作用机制非常复杂，至今尚未完全清楚，比如已有许多研究证实了miRNAs参与调节TGFβ表达量和EMT过程，但参与此过程的lncRNA并不清楚。另外，一些在线网站比如starBase2.0网站预测准确率低，比如现在已经比较明确的GAS5和miRNA21都预测不到，而且人血清中存在多达1400个lncRNA，还有变化，导致lncRNA无法有效利用。肠外营养(parenteralnutrition,PN)对不能通过正常肠道方式来满足生长的新生儿带来了革命性关爱。美国自60年代首次报道长期PN应用于一例新生女婴，至今已有数十万患者依赖PN得以生存。但长时间(＞2周)PN应用也存在许多相关问题,肠外营养相关性肝病(totalparenteralnutrition-associatedliverdisease,PNALD)是一种最常见的并发症，随着长时间PN的应用，PNALD发生率增加，主要表现为肝脂肪变性、胆汁淤积和转氨酶升高。约有30％-60％的患儿因长期PN发生PNALD，伴有肝功能异常和肝细胞损害，严重者发展为肝硬化危及生命。而新生儿发生PNALD更早、肝功能下降更快，死亡率高达38%～51%。因此，PNALD是严重威胁新生儿健康的重大疾病，如何防治该病是新生儿临床焏待解决的问题。PNALD临床主要表现为黄疸、肝脾肿大，可有白陶土样大便，肝功等化验检查多提示丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶、碱性磷酸酶、血总胆红素、直接胆红素升高。因此针对新生儿肠外营养相关性肝病，研发合适的特异性lncRNA作为标志物在调控基因转录、作为疾病诊断标志物等方面具有重要的研究和临床意义。
技术实现思路
本专利技术提供一种作为针对新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的lncRNA及其应用。本专利技术首次公开了lncRNAG034337作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物，利用临床上比较容易直接获得的全血标本，结合设计的引物对进行qRT-PCR验证lncRNA的差异表达，具有快速、简单、省时、检测灵敏度高，样品消耗少的优点，是一种准确特异诊断新生儿肠外营养相关性肝病的方法。本专利技术的技术方案如下：lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。lncRNA在制备新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物中的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。lncRNA在制备新生儿肠外营养相关性肝病特异性诊断试剂中的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。本专利技术中，通过检测人体全血样本中的lncRNAG034337的表达情况即可诊断新生儿肠外营养相关性肝病，与现有临床检测手段结果吻合。本专利技术公开了新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂盒，该试剂盒含有能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂，所述lncRNA为lncRNAG034337；优选的，所述能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂包括qRT-PCR引物对；所述qRT-PCR引物对的序列为SEQIDNO：1、SEQIDNO：2。本专利技术还公开了新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂盒在制备新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂中的应用，该试剂盒含有能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂，所述lncRNA为lncRNAG034337；优选的，所述能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂包括qRT-PCR引物对；所述qRT-PCR引物对的序列为SEQIDNO：1、SEQIDNO：2。本专利技术公开了能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂在制备新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂盒中的应用或者能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂在制备新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂中的应用，所述lncRNA为lncRNAG034337；优选的，所述能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂包括qRT-PCR引物对；所述qRT-PCR引物对的序列为SEQIDNO：1、SEQIDNO：2。实施例中，本专利技术通过提取新生儿肠外营养相关性肝病患者和健康对照者全血样本的总RNA，设计qRT-PCR特异性引物，并通过常规qRT-PCR检测特异性lncRNAG034337的表达量，结果显示在新生儿肠外营养相关性肝病患儿中lncRNAG034337发生了显著性的上调表达；由此说明，通过检测lncRNAG034337的表达水平，可以有效区分新生儿肠外营养相关性肝患儿和正常健康人。本专利技术中，lncRNAG034337序列为SEQIDNO：3，具体如下：AAGTGGAGGCCGGAGCCTGGGACACCGCCGGCGGGGAGAGAAGCGGATCCCGTCCGAGCCCCGGCCCCAAGTAACGCCGCCGCCCCGGAGCCGCCAGGCTTCTAGAGATAGGCTCCTCATGTGTCTGCAATTCCAAAACTTAACAAAAACAAAAAGTTGAGCCTCTGAAGCTGTCACTAACCAAGTGATTCAGATGTCGGGACTGGAACACCAGCTGTTGGGGATGCAGGACTTGGTCTCTGCCCTCCCACACCTCCTGCCTCTTCTTTCTCTCCATCGCCCCATCTCTGCCAGTAGAGAATGGAACTGAGTTGGAGGTCCCCCTCCCCACTAAGTGCCTCTTTGCATAGCACCAGTCCCCACCCGCACGCTCTCTGGACCACTACAGCTGGACGGGCAATGGCGGGTCGGGGAGGCGCAGCACGACCCAATGGACCAGCTGCTGGGAACAAGATCTGTCAATTTAAGCTGGTTCTGCTGGGGGAGTCTGCGGTAGGCAAATCCAGCCTCGTCCTCCGCTTTGTCAAGGGACAGTTTCACGAGTACCAGGAGAGCACAATTGGAGCGGCCTTCCTCACACAGACTGTCTGCCTGGATGACACAACAGTCAAGTTTGAGATCTGGGACACAGCTGGAC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。/n

【技术特征摘要】
1.lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。


2.lncRNA在制备新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物中的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。


3.lncRNA在制备新生儿肠外营养相关性肝病特异性诊断试剂中的应用；所述lncRNA为lncRNAG034337。


4.新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂盒，所述试剂盒含有能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂，所述lncRNA为lncRNAG034337。


5.根据权利要求4所述新生儿肠外营养相关性肝病诊断试剂盒，其特征在于，所述能够对lncRNA的表达量进行定量的试剂包括qRT-PCR引物对；所述qRT-PCR引物对的序列为SEQIDNO：1、SEQIDNO：2。


6.根据权利要求4所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱雪萍，朱晓黎，刘刚，何山，耿海峰，王华伟，伍高红，吴志新，陈财龙，
申请(专利权)人：苏州大学附属儿童医院，
类型：发明
国别省市：江苏;32