一种快速准确检测腺病毒3型的试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术实施例涉及体外检测领域，具体涉及一种快速准确检测腺病毒3型的试剂盒及其制备方法。本发明专利技术实施例提供的试剂盒包括：IgM抗体酶标工作液，IgA抗体酶标工作液，IgG抗体酶标工作液，所述IgG抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgG抗体，和，包被腺病毒3型重组抗原的酶标板；其中，所述腺病毒3型重组抗原包括重组抗原A、重组抗原B或重组抗原C中的一种或多种。本发明专利技术提供的试剂盒(酶联免疫法)弥补了市面上的这一空白；并通过分别检测人血清或血浆中的腺病毒3型IgM、IgG和IgA抗体，将检测结果综合考虑，检测结果相互间形成互补，可靠性高，特异性好，灵敏度高；并可与核酸检测形成互补，适用于临床诊断和流行病学调查。

【技术实现步骤摘要】
一种快速准确检测腺病毒3型的试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及体外检测领域，具体涉及一种快速准确检测腺病毒3型的试剂盒及其制备方法。
技术介绍
腺病毒(Adenovirus，ADV)是一群分布十分广泛的DNA病毒，是引起人类呼吸道和消化道感染的重要病原之一。病毒感染主要是经上呼吸道和眼结膜侵入人体，引起急性咽炎、流行性角膜结膜炎或病毒性原发性非典型肺炎，已成为暴发流行的常见病原体，尤其对免疫力低下患者。而最常见的分离物是腺病毒1-8型、40型和41型。其中，腺病毒3型和7型是引起人类急性呼吸道感染的常见病原，在我国广泛流行。近年来在我国腺病毒3型和7型引起的疫情时有发生，病例报告的人数和平均发病率有逐年增高的趋势。由于腺病毒3型和7型具有高度传染性，发病率高，并在儿童群体中容易爆发，对儿童和青少年的健康影响严重。因此，对腺病毒进行分型检测对早期预防具有重要意义。腺病毒的临床检测主要依据三个方面：一是临床表现，二是血清学证据，三是病原学证据。由于腺病毒感染后能引起多系统的病变，且临床的表现也呈多样性，因此腺病毒的血清学检测和病原学检测是目前最主要的依据。可采用组织培养试验、免疫学试验以及分子生物学方法分别进行腺病毒检测。但这些方法普遍操作复杂，准确性低。快速、准确诊断腺病毒感染，是采取积极有效措施防止感染蔓延的重要途径，因此，寻找特异性好、敏感性高的检测方法具有重要意义。公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
专利技术目的为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种快速准确检测腺病毒3型的试剂盒及其制备方法。目前市面上并没有腺病毒3型检测试剂盒(酶联免疫法)，本专利技术提供的腺病毒3型抗体检测试剂盒(酶联免疫法)弥补了这一空白；通过分别检测人血清或血浆中的腺病毒3型IgM、IgG和IgA抗体，并将检测结果综合考虑，检测结果相互间形成互补，综合结果的可靠性高，特异性好，灵敏度高；通过对部分临床已确诊为腺病毒3型感染阳性(但PCR核酸检测阴性的)患者血样进行复检，该试剂盒组合能检出相当部分阳性，提示可与核酸检测形成互补，适用于临床诊断；且酶联免疫法对实验室要求不高，试验反应时间短，可以对大批量标本进行集中检测，适用于腺病毒流行病学调查。解决方案为实现本专利技术目的，本专利技术实施例提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括：IgM抗体酶标工作液，所述IgM抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgM抗体，IgA抗体酶标工作液，所述IgA抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgA抗体，IgG抗体酶标工作液，所述IgG抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgG抗体，和，包被腺病毒3型重组抗原的酶标板；其中，所述腺病毒3型重组抗原包括重组抗原A、重组抗原B或重组抗原C中的一种或多种；所述重组抗原A的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；所述重组抗原B的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；所述重组抗原C的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。本专利技术提供的腺病毒3型抗体检测试剂盒，包括IgM抗体酶标工作液、IgG抗体酶标工作液和IgA抗体酶标工作液，分别使用各酶标工作液配合包被腺病毒3型重组抗原的酶标板检测人血清或血浆中的腺病毒3型IgM、IgG和IgA抗体，并将检测结果综合考虑，检测结果相互间可形成互补，综合结果的可靠性高，特异性好，灵敏度高。所述腺病毒3型抗原用于与待测样本中的抗腺病毒3型抗体反应。重组抗原A来源于腺病毒六邻体蛋白的Arg109-Phe577区段，重组抗原B来源于腺病毒六邻体蛋白的Phe228-Lys557区段，重组抗原C来源于腺病毒六邻体蛋白的Gly128-Ser467区段。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，抗人IgM抗体包括鼠抗人IgM抗体、兔抗人IgM抗体或羊抗人IgM抗体中的一种或多种；可选地为鼠抗人IgM抗体。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，抗人IgG抗体包括鼠抗人IgG抗体、兔抗人IgG抗体或羊抗人IgG抗体中的一种或多种；可选地为鼠抗人IgG抗体。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，抗人IgA抗体包括鼠抗人IgA抗体、兔抗人IgA抗体或羊抗人IgA抗体中的一种或多种；可选地为鼠抗人IgA抗体。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，编码重组抗原A的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，编码重组抗原B的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，编码重组抗原C的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，所述腺病毒3型重组抗原为重组抗原A。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，IgM抗体酶标工作液还包括下述组分：氯化钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，CaSein，ProCLin300；可选地，IgM抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠5-10g/L，磷酸氢二钠2-4g/L，磷酸二氢钠0.1-0.4g/L，CaSein1-3g/L，ProCLin3000.2-0.8ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgM抗体0.5-2mg/L；进一步可选地，IgM抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠8g/L，磷酸氢二钠2.9g/L，磷酸二氢钠0.2g/L，CaSein2g/L，ProCLin3000.5ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgM抗体1mg/L。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，IgA抗体酶标工作液还包括下述组分：氯化钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，CaSein，ProCLin300；可选地，IgA抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠5-10g/L，磷酸氢二钠2-4g/L，磷酸二氢钠0.1-0.4g/L，CaSein1-3g/L，ProCLin3000.2-0.8ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgA抗体0.5-2mg/L；进一步可选地，IgA抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠8g/L，磷酸氢二钠2.9g/L，磷酸二氢钠0.2g/L，CaSein2g/L，ProCLin3000.5ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgA抗体1mg/L。上述试剂盒在一种可能的实现方式中，IgG抗体酶标工作液还包括下述组分：氯化钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，CaSein，ProCLin300；可选地，IgG抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠5-10g/L，磷酸氢二钠2-4g/L，磷酸二氢钠0.1-0.4g/L，CaSein1-3g/L，ProCLin3000.2-0.8ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgG抗体0.5-2mg/L；进一步可选地，IgG抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠8g/L，磷酸氢二钠2.9g/L，磷酸二氢钠0.2g/L，CaSein2g/L，ProCLin3000.5ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgG抗体1mg/L。辣根过本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：/nIgM抗体酶标工作液，所述IgM抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgM抗体，/nIgA抗体酶标工作液，所述IgA抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgA抗体，/nIgG抗体酶标工作液，所述IgG抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgG抗体，/n和，包被腺病毒3型重组抗原的酶标板；/n其中，所述腺病毒3型重组抗原包括重组抗原A、重组抗原B或重组抗原C中的一种或多种；/n所述重组抗原A的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；/n所述重组抗原B的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；/n所述重组抗原C的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
IgM抗体酶标工作液，所述IgM抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgM抗体，
IgA抗体酶标工作液，所述IgA抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgA抗体，
IgG抗体酶标工作液，所述IgG抗体酶标工作液包括过氧化物酶标记的抗人IgG抗体，
和，包被腺病毒3型重组抗原的酶标板；
其中，所述腺病毒3型重组抗原包括重组抗原A、重组抗原B或重组抗原C中的一种或多种；
所述重组抗原A的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；
所述重组抗原B的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；
所述重组抗原C的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，抗人IgM抗体为鼠抗人IgM抗体；
和/或，抗人IgG抗体为鼠抗人IgG抗体；
和/或，抗人IgA抗体为鼠抗人IgA抗体。


3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，编码重组抗原A的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；
和/或，编码重组抗原B的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示；
和/或，编码重组抗原C的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示。


4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述腺病毒3型重组抗原为重组抗原A。


5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，IgM抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠5-10g/L，磷酸氢二钠2-4g/L，磷酸二氢钠0.1-0.4g/L，CaSein1-3g/L，ProCLin3000.2-0.8ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgM抗体0.5-2mg/L；
和/或，IgA抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠5-10g/L，磷酸氢二钠2-4g/L，磷酸二氢钠0.1-0.4g/L，CaSein1-3g/L，ProCLin3000.2-0.8ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgA抗体0.5-2mg/L；
和/或，IgG抗体酶标工作液包括下述终浓度的组分：氯化钠5-10g/L，磷酸氢二钠2-4g/L，磷酸二氢钠0.1-0.4g/L，CaSein1-3g/L，ProCLin3000.2-0.8ml/L，和过氧化物酶标记的抗人IgG抗体0.5-2mg/L。


6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包被腺病毒3型重组抗原的酶标板中，每孔包被腺病毒3型重组抗原0.05-0.3μg。


7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玲，
申请(专利权)人：北京贝尔生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11