一种稳定高效的HRP酶促化学发光底物液、其制备方法及应用技术

本发明专利技术实施例涉及医学检测领域，具体涉及一种稳定高效的HRP酶促化学发光底物液、其制备方法及应用。本发明专利技术实施例中提供的HRP酶促化学发光底物液，以4‑(1，2，4‑三氮唑‑1‑基)苯酚和4‑碘代苯基硼酸作为HRP催化鲁米诺化学发光体系的增强剂，两者可相互增强，与传统增强剂相比，发光强度更高，本底更低，灵敏度好；本发明专利技术实施例中提供的HRP酶促化学发光底物液，检测平台期长，发光强度高和本底低，且稳定性好，可在4‑8℃稳定保存2年，可广泛应用于各种以HRP为标记物的试剂盒中。

A stable and efficient HRP enzymatic chemiluminescence substrate solution, its preparation method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种稳定高效的HRP酶促化学发光底物液、其制备方法及应用
本专利技术涉及医学检测领域，具体涉及一种稳定高效的HRP酶促化学发光底物液、其制备方法及应用。
技术介绍
化学发光免疫分析(Chemiluminescenceimmunoassay，CLIA)是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。CLIA具有灵敏度高，特异性强、无放射性危害等优点，正逐渐取代放射免疫分析应用于生物学、医学研究和临床实验诊断中。其中以吖啶酯(AE)，碱性磷酸酶(ALP)和辣根过氧化物酶(HRP)为标记物的化学发光免疫分析为主要发展趋势。HRP是从辣根中提取出来的一种过氧化物酶，HRP常用的发光底物为鲁米诺或其衍生物。鲁米诺(5-氨基-邻苯二甲酰肼)属于酰肼类有机化合物，是应用最广泛的化学发光剂之一，可以被氧化剂氧化生成3-氨基酞酸盐发出蓝色光。在酶促化学发光免疫分析中，使用HRP标记抗体，进行免疫反应后，使用鲁米诺作为发光底物，在HRP和起动发光试剂(NaOH和H2O2)作用下，鲁米诺发光。但鲁米诺作为发光底物，稳定性差、信号持续时间短、发光强度偏低、本底偏高。近二十多年来，人们陆续发现某些可以增强HRP催化鲁米诺化学发光体系发光强度和信号持续时间的化学试剂，这类化学试剂称为增强剂。目前常用的增强剂为对碘苯酚，但以对碘苯酚作为增强剂时，其本底高，发光强度仍不够，灵敏度不高。公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
专利技术目的为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种稳定高效的HRP酶促化学发光底物液、其制备方法及应用。本专利技术实施例中提供的HRP酶促化学发光底物液，以4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚和4-碘代苯基硼酸作为HRP催化鲁米诺化学发光体系的增强剂，两者可相互增强，与单一成分的增强剂相比，发光强度更高，灵敏度好。解决方案为实现本专利技术目的，本专利技术实施例提供了一种HRP酶促化学发光底物液，包括A液；其中，A液包括4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚和4-碘代苯基硼酸。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚和4-碘代苯基硼酸作为HRP催化鲁米诺化学发光体系的增强剂。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液还包括鲁米诺或鲁米诺钠盐、二甲基甲酰胺和缓冲液1。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液还包括鲁米诺、二甲基甲酰胺和缓冲液1。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，缓冲液1包括硼酸-硼砂缓冲液。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液中，4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚终浓度为0.1-1mmol/L；可选地为0.15-0.3mmol/L；进一步可选地为0.2mmol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液中，4-碘代苯基硼酸终浓度为0.02-0.5mmol/L；可选地为0.1-0.3mmol/L；进一步可选地为0.15mmol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液中，鲁米诺或鲁米诺钠盐终浓度为1-10mmol/L；可选地为6-9mmol/L；进一步可选地为7.5mmol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液中，二甲基甲酰胺终浓度为1-10mmol/L；可选地为5-7mmol/L；进一步可选地为6.45mmol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液中，缓冲液1的pH值为8.0-9.0；可选地为8.6。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液中，硼酸-硼砂缓冲液的终浓度为0.1-0.3mol/L；可选地为0.2mol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液包括终浓度分别为1-10mmol/L的鲁米诺或鲁米诺钠盐，0.1-1mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.02-0.5mmol/L的4-碘代苯基硼酸，1-10mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.1-0.3mol/L的pH值为8.0-9.0的硼酸-硼砂缓冲液。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液包括终浓度分别为6-9mmol/L的鲁米诺或鲁米诺钠盐，0.15-0.3mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.1-0.3mmol/L的4-碘代苯基硼酸，5-7mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.1-0.3mol/L的pH值为8.0-9.0的硼酸-硼砂缓冲液。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液包括终浓度分别为7.5mmol/L的鲁米诺或鲁米诺衍生物，0.2mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.15mmol/L的4-碘代苯基硼酸，6.45mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.2mol/L的pH值为8.6的硼酸-硼砂缓冲液。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，A液包括终浓度分别为7.5mmol/L的鲁米诺，0.2mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.15mmol/L的4-碘代苯基硼酸，6.45mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.2mol/L的pH值为8.6的硼酸-硼砂缓冲液。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，所述HRP酶促化学发光底物液还包括B液，其中，B液包括过氧化脲或过氧化氢。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液包括过氧化脲或过氧化氢、聚乙烯吡咯烷酮和缓冲液2。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液包括过氧化脲、聚乙烯吡咯烷酮和缓冲液2。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液中，过氧化脲或过氧化氢的终浓度为0.5-5mmol/L；可选地为2-4mmol/L；进一步可选地为3.5mmol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液中，聚乙烯吡咯烷酮的终浓度为0.1-5g/L；可选地为0.5-3g/L；进一步可选地为1g/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液中，缓冲液2的pH值为6.5-7.8；可选地为7.2。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液中，缓冲液2包括磷酸盐缓冲液。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液中，磷酸盐缓冲液的终浓度为0.1-0.3mol/L；可选地为0.2mol/L。上述HRP酶促化学发光底物液在一种可能的实现方式中，B液包括终浓度分别为0.5-5mmol/L的过氧化脲或过氧化氢，0.1-5g/L的聚乙烯吡咯烷酮，和0.1-0.3mol/L的pH值为6.5-7.8的磷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HRP酶促化学发光底物液，包括A液；其中，A液包括4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚和4-碘代苯基硼酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种HRP酶促化学发光底物液，包括A液；其中，A液包括4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚和4-碘代苯基硼酸。


2.根据权利要求1所述的HRP酶促化学发光底物液，其特征在于：A液还包括：鲁米诺或鲁米诺钠盐、二甲基甲酰胺和缓冲液1；
和/或，4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚和4-碘代苯基硼酸作为HRP催化鲁米诺化学发光体系的增强剂。


3.根据权利要求2所述的HRP酶促化学发光底物液，其特征在于：A液中，4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚终浓度为0.1-1mmol/L；
和/或，A液中，4-碘代苯基硼酸终浓度为0.02-0.5mmol/L；
和/或，鲁米诺或鲁米诺钠盐终浓度为1-10mmol/L；
和/或，A液中，缓冲液1的pH值为8.0-9.0；
和/或，A液中，缓冲液1包括硼酸-硼砂缓冲液。


4.根据权利要求2所述的HRP酶促化学发光底物液，其特征在于：A液包括终浓度分别为1-10mmol/L的鲁米诺或鲁米诺钠盐，0.1-1mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.02-0.5mmol/L的4-碘代苯基硼酸，1-10mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.1-0.3mol/L的pH值为8.0-9.0的硼酸-硼砂缓冲液；
或，A液包括终浓度分别为6-9mmol/L的鲁米诺或鲁米诺钠盐，0.15-0.3mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.1-0.3mmol/L的4-碘代苯基硼酸，5-7mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.1-0.3mol/L的pH值为8.0-9.0的硼酸-硼砂缓冲液；
或，A液包括终浓度分别为7.5mmol/L的鲁米诺或鲁米诺衍生物，0.2mmol/L的4-(1，2，4-三氮唑-1-基)苯酚，0.15mmol/L的4-碘代苯基硼酸，6.45mmol/L的二甲基甲酰胺，和0.2mol/L的pH值为...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐悦，辛愿，邵育晓，董艳菊，张丽，张追峰，张称意，
申请(专利权)人：北京贝尔生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11