用于治疗肝脏疾病和心血管疾病的脂肽制造技术

本发明专利技术涉及用于治疗肝脏疾病和心血管疾病的脂肽。具体地，本发明专利技术涉及基于脂肽的化合物，其用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况，优选肝脏参与的代谢疾病，以及控制或改变胆固醇水平或胆固醇摄取，并且因此，诊断、预防和/或治疗心血管疾病。此外，本发明专利技术涉及用于测试或测量测试化合物的NTCP介导的转运的体外或体内测定或方法。此外，本发明专利技术涉及用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况的方法，其包括将治疗有效量的基于脂肽的化合物施用于患者。此外，本发明专利技术涉及用于诊断、预防和/或治疗心血管疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
用于治疗肝脏疾病和心血管疾病的脂肽本申请是申请日为2013年11月12的中国专利申请201380059069.5“用于治疗肝脏疾病和心血管疾病的脂肽”的分案申请。
本专利技术涉及基于脂肽的化合物，其用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况，优选肝脏参与的代谢疾病，以及用于控制或改变胆固醇水平或胆固醇摄取，并且因此，诊断、预防和/或治疗心血管疾病。此外，本专利技术涉及用于测试或测量测试化合物的NTCP介导的转运的体外或体内测定或方法。此外，本专利技术涉及用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况的方法，其包括将治疗有效量的基于脂肽的化合物施用于患者。此外，本专利技术涉及用于诊断、预防和/或治疗心血管疾病的方法。
技术介绍
人乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒科的成员。嗜肝DNA病毒是最小的包膜DNA病毒，其经由pgRNA中间体的逆转录复制。在装配过程中，核衣壳获取称为大(L)、中(M)和小(S)的三种病毒包膜蛋白。它们被编码在一个开放阅读框中，并且共享对于膜锚定所需的S结构域。除了S-结构域以外，M含有55个氨基酸的N端亲水性延伸(preS2)，而L进一步延伸107、117或118个氨基酸(基因型依赖性)，被称为preS1(Urban2008)。丁型肝炎病毒(HDV)是利用HBV包膜蛋白用于进入肝细胞的卫星拟病毒。已知L的肉豆蔻酰化的preS1-结构域在HBV和HDV感染性中发挥关键作用。本专利技术人先前已经鉴定了HBVL-蛋白衍生的脂肽，其阻断HBV和HDV感染PHH和HepaRG细胞(Gripon等人,2005,Schulze等人,2010,WO2009/092611A1)。它们代表了HBV的preS1-结构域的N端47个氨基酸(HBVpreS/2-48myr)，并且包括天然存在的肉豆蔻酸修饰。在WO2009/092612和WO2012/107579(其内容以其整体通过引用并入本文)中，专利技术人描述了HBV的疏水性修饰的preS-衍生肽及其作为媒介物用于将化合物特异性递送至肝脏的用途。此外，专利技术人先前已经鉴定了负责这些HBVL-蛋白衍生脂肽的结合的受体，即牛磺胆酸钠协同转运多肽(NTCP/SLC10A1)。(美国临时申请61/725,144，2012年11月12日申请)。NTCP是整合性跨膜蛋白，在HepG2、HuH7中不表达，在DMSO处理后在HepaRG细胞中诱导(Kotani等人,2012)，并且在去分化过程中在原代肝细胞中下调(Doring等人,2012)。具体而言，专利技术人已经鉴定了在乙型肝炎病毒(HBV)和/或丁型肝炎病毒(HDV)感染中发挥关键作用的新型HBVpreS1-特异性受体，人牛磺胆酸钠协同转运多肽NTCP/SLC10A1。该受体或某些非人对应物的表达允许将先前不能结合HBV和/或HDV和/或不易受HBV和/或HDV感染的细胞转化为能够结合HBV和/或HDV和/或易受HBV和/或HDV感染的细胞。已经易受HBV和/或HDV感染的细胞(HepaRG细胞)显示NTCP表达后显著增加的易感性。此外，Yan等人(2012)将NTCP/SLC10A1鉴定为原代树鼩肝细胞(PTH)中的preS-特异性受体，并且表明人(h)NTCP促进HBV/HDV进入肝细胞瘤细胞。肝脏在药物生物转化和从身体处置中发挥主要作用。鉴于其在胃肠道和全身血液之间的屏障功能，其恒定暴露于进入门静脉循环的摄取的外源性物质。药物诱导的肝损伤占自愿向药物警戒登记(pharmacovigilanceregistries)报告的所有不良药物反应的报告的高达7％。药物引起对肝细胞、胆管或血管结构的直接损害，或者可干扰胆汁流。通常遇到的表型因此包括肝炎、胆汁淤积、脂肪变性、肝硬化、血管和肿瘤性病变和甚至暴发性肝衰竭。几乎每种药物都具有引起肝损伤的潜能，其通过药剂的直接毒性或通过个体的特质反应。肝脏对药物损伤的敏感性受各种因素诸如年龄、性别、怀孕、组合用药、肾功能和遗传因素的影响(Kullak-Ublick,2000)。药物诱导的胆汁淤积性肝病是肝损伤的一种亚型，其特征在于继发于施用肝毒性剂的碱性磷酸酶和胆红素的主要升高。它本身可以表现为胆汁淤积性肝炎或温和性胆汁淤积(blandcholestasis)，这取决于病原体和损伤机制。通常引起胆汁淤积与肝炎的药物包括精神药物、抗生素和非甾体抗炎药(NSAID)。该机制是免疫过敏的，并且由超敏反应导致。使用避孕药和17α-烷基化雄激素类固醇最经常观察到无肝炎的纯胆汁淤积，并且所述机制最可能涉及干扰胆汁盐、有机阴离子和磷脂的肝细胞小管外排系统。胆汁形成的限速步骤被认为是胆汁盐穿过小管肝细胞膜的胆汁盐输出泵(BSEP)介导的转位。环孢霉素A、曲格列酮、波生坦、利福平和性类固醇的代谢产物对BSEP功能的抑制是药物诱导的胆汁淤积的一个重要原因(Kullak-Ublick,2000)。本领域需要用于治疗肝脏参与的代谢疾病、药物诱导的毒性和胆汁淤积性肝病以及心血管疾病的改进的手段和方法。
技术实现思路
根据本专利技术，该目标通过提供用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况的基于脂肽的化合物来解决，其中所述肝脏疾病或病况与化合物向肝细胞的牛磺胆酸钠协同转运多肽(NTCP)介导的转运相关。根据本专利技术，该目标通过提供用于诊断、预防和/或治疗心血管疾病的基于脂肽的化合物来解决。根据本专利技术，该目标通过用于测试或测量一种或多种测试化合物的NTCP介导的转运的体外或体内测定或方法来解决，所述测定或方法包括以下步骤：(a)提供一种或多种测试化合物和如本专利技术中定义的基于脂肽的化合物；(b)提供用于功能性和选择性NTCP表达的测试系统；(c)与基于脂肽的化合物或不与基于脂肽的化合物一同将一种或多种测试化合物添加至(b)的NTCP测试系统；(d)通过比较各自有添加或无添加基于脂肽的化合物情况下步骤(b)和(c)的结果确定所述测试化合物是否经由NTCP转运，其中，当测试化合物减少、阻断或抑制通过NTCP的胆汁盐转运（竞争性转运）时，或者当所述化合物的转运可以通过添加基于脂肽的化合物而减少、阻断或抑制时，所述化合物被认为是经由NTCP转运。根据本专利技术，该目标通过用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况的方法来解决，其中所述肝脏疾病或病况与化合物向肝细胞的牛磺胆酸钠协同转运多肽(NTCP)介导的转运相关，所述方法包括将治疗有效量的基于脂肽的化合物施用于患者。根据本专利技术，该目标通过用于诊断、预防和/或治疗心血管疾病的方法来解决。根据本专利技术，该目标通过用于控制或改变胆固醇水平或胆固醇摄取的方法来解决，所述方法包括将治疗有效量的基于脂肽的化合物施用于患者。本专利技术的优选实施方案的描述在以下更详细地描述本专利技术之前，应当理解，本专利技术不限于本文中描述的具体方法、方案和试剂，因为它们可以变化。还应当理解，本文中所用的术语仅出于描述具体实施方案的目的，并且不旨在限定将仅由所附权利要求限定的本专利技术的范围。除非另有说明，否则本文本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于脂肽的化合物，其用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况，/n其中所述肝脏疾病或病况与化合物向肝细胞的牛磺胆酸钠协同转运多肽(NTCP)介导的转运相关。/n

【技术特征摘要】
20121112 US 61/725144;20130729 US 61/8594761.基于脂肽的化合物，其用于诊断、预防和/或治疗肝脏疾病或病况，
其中所述肝脏疾病或病况与化合物向肝细胞的牛磺胆酸钠协同转运多肽(NTCP)介导的转运相关。


2.权利要求1的基于脂肽的化合物，其中所述与化合物向肝细胞的NTCP介导的转运相关的肝脏疾病或病况是选自以下的肝脏参与的代谢疾病
肝内胆汁淤积，
肝脏(通过肝脏毒素)的中毒/肝毒性，
药物诱导的胆汁淤积性肝病，
高脂血症，
肝后胆汁淤积。


3.权利要求1或2的基于脂肽的化合物，其中经由NTCP转运到肝细胞中的化合物是
-胆汁酸类
诸如胆酸盐
牛磺酸-或甘氨酸-缀合的胆汁酸及其盐
(牛磺酸-或甘氨酸-缀合的二羟基和三羟基胆汁盐)
诸如
牛磺胆酸盐
甘氨胆酸盐
牛磺脱氧胆酸盐
牛磺鹅脱氧胆酸盐
牛磺熊脱氧胆酸盐
硫酸化的胆汁酸及其盐
-类固醇类
类固醇硫酸盐
雌激素缀合物(例如雌酮-3-硫酸盐，17α-炔雌醇-3-O-硫酸盐)
脱氢表雄酮硫酸盐
-缀合和未缀合的甲状腺激素
-肝毒素
-共价结合至牛磺胆酸盐的化合物(例如，苯丁酸氮芥-牛磺胆酸盐)
-溴磺酚酞
-药物
诸如
抗真菌药(例如米卡芬净)，
抗高血脂药(例如辛伐他汀、瑞舒伐他汀、匹伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀)，
抗高血压药，
抗炎药，或
糖皮质激素药物。


4.权利要求1-3中任一项的基于脂肽的化合物，其中所述NTCP介导的转运被所述基于脂肽的化合物减少或阻断。


5.权利要求1-4中任一项的基于脂肽的化合物，其中所述基于脂肽的化合物包含以下通式的肽
X-P-Y-Ro
其中
P是氨基酸序列NPLGFXaaP(SEQ.IDNO:1)，
其中Xaa是任意氨基酸；优选F或L，更优选F，
...

【专利技术属性】
技术研发人员：沃尔克·克利夫斯，S厄班，R库比茨，
申请(专利权)人：海德堡吕布莱希特卡尔斯大学，沃尔克·克利夫斯，
类型：发明
国别省市：德国;DE