用于改善植物的保护、生长和生产力的生物活性多肽制造技术

提供了当以农业制剂形式施用于植物时有用的生物活性引发性多肽。还提供了使用含有所述生物活性引发性多肽的制剂的方法，所述生物活性引发性多肽被外源性地施用于植物或植物细胞膜的表面，或内源性地施用于植物或植物细胞的内部。当施用于植物、植物部位或植物生长培养基或所述植物或所述植物部位周围区域的根际中时，所述生物活性引发性多肽提高植物或植物部位的生长、产量、健康、寿命、生产力和/或活力和/或减少所述植物或所述植物部位中的非生物胁迫和/或保护所述植物或所述植物部位免受疾病、昆虫和/或线虫的侵害和/或提高所述植物或所述植物部位的先天性免疫反应和/或改变植物结构。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于改善植物的保护、生长和生产力的生物活性多肽相关申请的交叉引用本申请要求于2017年7月20日提交的美国临时申请第62/534,710号的优先权，所述美国临时申请的内容通过引用整体并入本文。
提供了可以以农业制剂形式递送的生物活性引发性多肽。可以将所述多肽施用于农作物以实现农学上期望的结果，如植物中的表型(例如，表现出对害虫、病原(diseaseagent)和非生物胁迫的保护性的表型)增强、植物的生长、生产力和产量提高。
技术介绍
实现期望的农学表型(如提高的产量、疾病预防、抗病性和改善的非生物胁迫耐受性)的常规方法主要利用了选择性育种、嫁接、转基因和农用化学方法。参与植物防御反应的生物活性引发性多肽植物具有免疫系统，所述免疫系统检测可能引起疾病的微生物并保护植物免受所述微生物侵害。植物中的抗微生物肽(AMP)通常是抵御病原体入侵的第一道防线，并且参与启动可以向植物赋予先天性免疫力的防御反应。许多AMP通常对各种传染原具有活性。其通常被分类为抗菌、抗真菌、抗病毒和/或抗寄生虫。给定植物物种对可接触植物表面并在其上定居的某些病原生物的抗性基于高度专业化的识别系统，所述识别系统仅用于某些微生物(例如，特定的细菌或真菌菌株)产生的分子。植物通过使用模式识别受体(PRR)识别与其相关的病原体相关分子模式(PAMP)来感知潜在的微生物入侵者。鞭毛蛋白/鞭毛蛋白相关型多肽已经主要报道了鞭毛蛋白和源自那些鞭毛蛋白的鞭毛蛋白相关型多肽在植物的先天性免疫反应中具有功能性作用。这些多肽源自真细菌鞭毛蛋白的高度保守的结构域。鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要组成部分。形成细菌鞭毛的细丝的鞭毛蛋白亚基可以在细胞中充当有效的激发子，从而在各种植物物种中引发防御相关反应。“鞭毛蛋白”是球状蛋白，其自身排列成空心圆柱体，从而在细菌鞭毛中形成细丝。鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要取代基，并且存在于鞭毛细菌中。植物可以通过识别保守的表位(如定位在全长鞭毛蛋白编码序列N端的22个氨基酸的伸展(Flg22))来感知、抵抗感染并建立针对细菌微生物的防御信号传导。Flg22多肽的激发子活性归因于鞭毛蛋白N端内的这个保守结构域(Felix等人，1999年)。植物可以通过植物细胞表面处的模式识别受体(PRR)来感知细菌鞭毛蛋白，所述模式鉴定受体被称为鞭毛蛋白敏感性受体，其是一种定位在质膜上的富含亮氨酸的重复受体激酶，并且可从植物细胞表面处获得。在植物中，最典型的PRR是鞭毛蛋白感知2(FLS2)，其在单子叶植物和双子叶植物中均高度保守。在拟南芥(Arabidopsis)中，对Flg22的先天性免疫反应涉及宿主识别蛋白复合物，所述复合物含有FLS2—富含亮氨酸的重复(LRR)受体激酶(Gómez-GómezL.和BollerT.,“FLS2：一种参与感知拟南芥属中的细菌激发子鞭毛蛋白的LRR受体样激酶(FLS2:AnLRRreceptor-likekinaseinvolvedintheperceptionofthebacterialelicitorflagellininArabidopsis)”《分子细胞(MolecularCell)》5:1003-1011,2000)。在拟南芥(Arabidopsisthaliana)中，FLS2是决定鞭毛蛋白感知的PRR，并且对一个或多个鞭毛蛋白相关型多肽的结合具有特异性。例如，Flg22与外部植物FLS2膜结合受体的结合会触发参与先天性免疫反应的信号传导级联，所述先天性免疫反应诱导植物建立高度特异性的信号传导相关级联，所述高度特异性的信号传导相关级联参与激活模式触发的免疫(Chinchilla等人,“拟南芥属受体激酶FLS2结合Flg22并决定鞭毛蛋白感知的特异性(TheArabidopsisreceptorkinaseFLS2bindsFlg22anddeterminesthespecificityofflagellinperception)”《植物细胞(PlantCell)18:465-476,2006》)。因此，Flg22与拟南芥属FLS2膜结合受体的结合引发了激活的第一步，在所述第一步中，结合引发了植物防御反应的激活级联。Flg22-FLS2相互作用还可以导致活性氧(ROS)的产生，这有助于氧化迸发的诱导、细胞培养基碱化、病原体反应基因的下游诱导以及与防御相关的反应，从而赋予植物疾病抵抗力(FelixG.等人,“植物对细菌鞭毛蛋白的最保守结构域具有敏感的感知系统(Plantshaveasensitiveperceptionsystemforthemostconserveddomainofbacterialflagellin)”《植物学杂志(ThePlantJournal)》18:265-276,1999；Gómez-GómezL.和BollerT.,“FLS2：一种参与感知拟南芥属中的细菌激发子鞭毛蛋白的LRR受体样激酶”《分子细胞》5:1003-1011,2000；Meindi等人,“根据地址-信息概念，细菌激发子鞭毛蛋白激活其在番茄细胞中的受体(Thebacterialelicitorflagellinactivatesitsreceptorintomatocellsaccordingtotheaddress-messageconcept)”《植物细胞》12:1783-1794,2000)。在番茄中，使用完整细胞和微粒体膜制剂均观察到Flg22与FLS受体的高亲和力结合。在这项研究中，Flg22与质膜表面处的一个或多个FLS2受体的结合在生理条件下是不可逆的，这反映了Flg22激发子的吸收过程以及其被导入到番茄细胞中(Meindi等人,“根据地址-信息概念，细菌激发子鞭毛蛋白激活其在番茄细胞中的受体”《植物细胞》12:1783-1794,2000)。FLS2对Flg22的识别会触发局部和全身性植物免疫反应。Flg22结合的激活的FLS2受体复合物通过内吞作用而被内化到植物细胞中，并在整个植物中系统地移动(Jelenska等人,“鞭毛蛋白肽flg22通过其受体FLS2实现了拟南芥属中的长途运输(Flagellinpeptideflg22gainsaccesstolong-distancetraffickinginArabidopsisviaitsreceptor,FLS2)”《实验植物学杂志(JournalofExperimentalBotany)68:1769-1783,2017)，这可能有助于全身性Flg22免疫反应。涉及Flg22的鞭毛蛋白受体感知介导在不同的植物类群中是高度保守的(Taki等人,“对水稻中flg22受体OsFLS2介导的鞭毛蛋白感知的分析(Analysisofflagellinperceptionmediatedbyflg22receptorOsFLS2inrice)”《分子植物与微生物相互作用(MolecularPlantMicrobeInteractions)》21:1635-1642,2008)。包括来自鞭毛蛋白保守结构域的15-22个或28个氨基酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于引发植物或植物部位的生物活性从而提高植物或植物部位的生长、产量、健康、寿命、生产力和/或活力和/或减少所述植物或所述植物部位中的非生物胁迫和/或保护所述植物或所述植物部位免受疾病、昆虫和/或线虫的侵害和/或提高所述植物或所述植物部位的先天性免疫反应和/或改变植物结构的多肽，其中所述多肽包括：/n(a)鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:226、1-225、227-375、526、528、530、532、534、536、538、540、541、751、752和754-766中的任何一个；或/n(b)突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:571-579和753中的任何一个；或/n(c)突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:580-586中的任何一个；或/n(d)逆反型(retro inverso)Flg22多肽，并且所述逆反型Flg22多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:376-450、527、531、533、535、537和539中的任何一个；或/n(e)逆反型FlgII-28多肽，并且所述逆反型FlgII-28多肽的氨基酸序列包括SEQ IDNO:451-525或768中的任何一个；或/n(f)逆反型Flg15多肽，并且所述逆反型Flg15多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:529或767；或/n(g)超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:587、589、591、593、594和595中的任何一个；或/n(h)逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:588、590、592、596和597中的任何一个；或/n(i)根毛促进性多肽(RHPP)，并且所述RHPP的氨基酸序列包括SEQ ID No:600、603和604中的任何一个；或/n(j)Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(KTI)多肽，并且所述KTI多肽的氨基酸序列包括SEQ IDNo:602；或/n(k)逆反型根毛促进性多肽(RI RHPP)，并且所述RI RHPP的氨基酸序列包括SEQ IDNO:601、605和606中的任何一个；或/n(l)延伸因子Tu(EF-Tu)多肽，并且所述EF-Tu多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:607-623中的任何一个；或/n(m)逆反型延伸因子Tu(RI EF-Tu)多肽，并且所述RI EF-Tu多肽的氨基酸序列包括SEQID NO:624-640中的任何一个；或/n(n)包括SEQ ID NO:750的融合多肽；或/n(o)植物磺肽素(PSK)多肽，并且所述PSK多肽的氨基酸序列包括SEQ ID NO:598；或/n(p)逆反型植物磺肽素(RI PSK)多肽，并且所述RI PSK多肽的氨基酸序列包括SEQ IDNO:599；或/n(q)硫蛋白或硫蛋白样多肽，并且所述硫蛋白或硫蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQID NO:650-749中的任何一个，并且/n任选地，其中(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽和(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽：含有化学修饰；是在所述氨基酸内具有氨基酸插入、缺失、倒置、重复、复制、延伸或取代的变体；或是融合蛋白的一部分；或含有蛋白酶识别序列或进一步包括核心序列。/n...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170720 US 62/534,7101.一种用于引发植物或植物部位的生物活性从而提高植物或植物部位的生长、产量、健康、寿命、生产力和/或活力和/或减少所述植物或所述植物部位中的非生物胁迫和/或保护所述植物或所述植物部位免受疾病、昆虫和/或线虫的侵害和/或提高所述植物或所述植物部位的先天性免疫反应和/或改变植物结构的多肽，其中所述多肽包括：
(a)鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226、1-225、227-375、526、528、530、532、534、536、538、540、541、751、752和754-766中的任何一个；或
(b)突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:571-579和753中的任何一个；或
(c)突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:580-586中的任何一个；或
(d)逆反型(retroinverso)Flg22多肽，并且所述逆反型Flg22多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:376-450、527、531、533、535、537和539中的任何一个；或
(e)逆反型FlgII-28多肽，并且所述逆反型FlgII-28多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:451-525或768中的任何一个；或
(f)逆反型Flg15多肽，并且所述逆反型Flg15多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:529或767；或
(g)超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:587、589、591、593、594和595中的任何一个；或
(h)逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:588、590、592、596和597中的任何一个；或
(i)根毛促进性多肽(RHPP)，并且所述RHPP的氨基酸序列包括SEQIDNo:600、603和604中的任何一个；或
(j)Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(KTI)多肽，并且所述KTI多肽的氨基酸序列包括SEQIDNo:602；或
(k)逆反型根毛促进性多肽(RIRHPP)，并且所述RIRHPP的氨基酸序列包括SEQIDNO:601、605和606中的任何一个；或
(l)延伸因子Tu(EF-Tu)多肽，并且所述EF-Tu多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:607-623中的任何一个；或
(m)逆反型延伸因子Tu(RIEF-Tu)多肽，并且所述RIEF-Tu多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:624-640中的任何一个；或
(n)包括SEQIDNO:750的融合多肽；或
(o)植物磺肽素(PSK)多肽，并且所述PSK多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:598；或
(p)逆反型植物磺肽素(RIPSK)多肽，并且所述RIPSK多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:599；或
(q)硫蛋白或硫蛋白样多肽，并且所述硫蛋白或硫蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:650-749中的任何一个，并且
任选地，其中(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽和(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽：含有化学修饰；是在所述氨基酸内具有氨基酸插入、缺失、倒置、重复、复制、延伸或取代的变体；或是融合蛋白的一部分；或含有蛋白酶识别序列或进一步包括核心序列。


2.根据权利要求1所述的多肽，其中(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽和(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽：含有化学修饰；是在所述氨基酸内具有氨基酸插入、缺失、倒置、重复、复制、延伸或取代的变体；或是融合蛋白的一部分；或含有蛋白酶识别序列；或进一步包括核心序列。


3.根据权利要求2所述的多肽，其中
所述化学修饰包括乙酰化、酸加成、酰化、ADP-核糖基化、醛加成、烷基酰胺加成、酰胺化、胺化、生物素化、氨基甲酸酯加成、氯甲基酮加成、核苷酸或核苷酸衍生物的共价连接、交联、环化、二硫键形成、去甲基化、酯加成、共价交联的形成、半胱氨酸-半胱氨酸二硫键的形成、焦谷氨酸酯的形成、甲酰化、γ-羧化、糖基化、GPI锚定物形成、酰肼加成、异羟肟酸加成、羟基化、碘化、脂质加成、甲基化、肉豆蔻酰化、氧化、聚乙二醇化、蛋白水解加工、磷酸化、异戊烯化、棕榈酰化、纯化标签的加成、焦谷氨酰加成、外消旋化、硒酰化、磺酰胺加成、硫酸化、RNA转移介导的氨基酸向蛋白质的加成、泛素化、尿素加成或N端修饰或C端修饰；或
所述变体的所述氨基酸内的氨基酸取代包括β-氨基酸、D-氨基酸或非天然氨基酸的取代。


4.根据权利要求3所述的多肽，其中所述化学修饰包括乙酰化、酰胺化、交联或环化。


5.根据权利要求2所述的多肽，其中：
所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:754-766中的任何一个；或
所述突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽来自芽孢杆菌属、赖氨酸芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属或解硫胺素芽孢杆菌属细菌。


6.根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括：
(b)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或(d)的逆反型Flg22多肽；或(e)的逆反型FlgII-28多肽；或(f)的逆反型Flg15多肽；或(h)的逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽；或(i)的RHPP；或(k)的RIRHPP；或(l)的EF-Tu多肽；或(m)的RIEF-Tu多肽；或(n)的融合多肽；(p)的RIPSK多肽；或
核心序列。


7.根据权利要求6所述的多肽，其中
(b)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽包括SEQIDNO:571-573中的任何一个；和/或
所述核心序列包括SEQIDNO:754-766中的任何一个；和/或
所述融合多肽包括辅助多肽。


8.根据权利要求7所述的多肽，其中所述辅助多肽包括：
特征信息(signature)多肽，并且所述特征信息多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:542-548中的任何一个或其任何组合；或
信号锚分选多肽，并且所述信号锚分选多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:549-562中的任何一个或其任何组合；或
特征信息多肽，并且所述特征信息多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:
542；或
信号锚分选多肽，并且所述信号锚分选多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:549。


9.根据权利要求1到8中任一项所述的多肽，其中所述多肽进一步包括核心序列，所述核心序列包括SEQIDNO:754-766中的任何一个，并且其中包含所述核心序列提高了所述多肽的生物活性引发性活性。


10.根据权利要求1到9中任一项所述的多肽，其中所述多肽包括与SEQIDNO:1-768中的任何一个具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％同一性的氨基酸序列，并且所述多肽具有生物活性引发性活性。


11.根据权利要求1到10中任一项所述的多肽，其中所述多肽从发酵产物中，或从重组微生物中，分离、浓缩、和/或，任选地通过过滤、色谱法，部分纯化。


12.一种用于引发植物或植物部位的生物活性从而提高植物或植物部位的生长、产量、健康、寿命、生产力和/或活力和/或减少所述植物或所述植物部位中的非生物胁迫和/或保护所述植物或所述植物部位免受疾病、昆虫和/或线虫的侵害和/或提高所述植物或所述植物部位的先天性免疫反应和/或改变植物结构的组合物，所述组合物包括：
根据权利要求1到11中任一项所述的多肽或其任何组合，以及农用化学品或载剂；或
根据权利要求1到12中任一项所述的多肽的任何组合。


13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述组合物包括：
(A)(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽、(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽或其任何组合，以及农用化学品或载剂，所述农用化学品或载剂本质上与所述多肽不相关；或
(B)(b)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或(d)的逆反型Flg22多肽；或(e)的逆反型FlgII-28多肽；或(f)的逆反型Flg15多肽；
或(h)的逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽；或(i)的RHPP；或(k)的RIRHPP；或(l)的EF-Tu多肽；或(m)的RIEF-Tu多肽；或(n)的融合多肽；或(p)的RIPSK多肽或其任何组合；以及(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽、(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽或其任何组合；或(C)以下中的两个或更多个：(b)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或(d)的逆反型Flg22多肽；或(e)的逆反型FlgII-28多肽；或(f)的逆反型Flg15多肽；或(h)的逆反型超敏蛋白或超敏蛋白样多肽；或(i)的RHPP；或(k)的RIRHPP；或(l)的EF-Tu多肽；或(m)的RIEF-Tu多肽；或(n)的融合多肽；或(p)的RIPSK多肽；或
(D)以下中的两个或更多个：(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽或(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽，其中：
(i)(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(o)的PSK多肽或(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽中的至少一个含有所述化学修饰；是所述变体；是所述融合蛋白的一部分；或含有所述蛋白酶识别序列；或
(ii)(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽或(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽中的至少两个本质上不相关；或
(E)其中所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽由微生物重组产生。


14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述组合物包括：
(i)(A)的组合物或(B)的组合物，并且其中(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽、(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽、(j)的KTI多肽、(o)的PSK多肽、(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽或其任何组合不含所述化学修饰；不是所述变体；不是所述融合蛋白的一部分；并且不含所述蛋白酶识别序列；或
(ii)(E)的组合物，其中所述微生物包括来自芽孢杆菌属的细菌、来自假单胞菌属的细菌、来自类芽孢杆菌属的细菌、青霉菌属真菌、球囊霉属细菌、节杆菌属细菌、副球菌属细菌、根瘤菌属细菌、慢生根瘤菌属细菌、固氮螺菌属细菌、肠杆菌属细菌、埃希氏杆菌属细菌或其任何组合。


15.一种表达或过度表达多肽的重组微生物，其中所述多肽包括根据权利要求1到15中任一项所述的多肽或其任何组合。


16.根据权利要求15所述的重组微生物，其中
所述多肽包括：(a)的鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或(b)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或(c)的突变型鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或(g)的超敏蛋白或超敏蛋白样多肽；或(i)的RHPP；
或(j)的KTI多肽；或(l)的EF-Tu多肽；或(n)的融合多肽；或(o)的PSK多肽；或(q)的硫蛋白或硫蛋白样多肽；和/或
所述多肽被所述微生物过度表达。


17.根据权利要求16所述的重组微生物，其中所述多肽被所述微生物过度表达并且被制成具有分泌信号。


18.根据权利要求12到17中任一项所述的组合物或重组微生物，其中
所述多肽包括：所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；所述逆反型Flg22多肽；所述逆反型FlgII-28多肽；所述硫蛋白或硫蛋白样多肽；所述硫蛋白或硫蛋白样多肽，其中所述硫蛋白或硫蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:651；所述PSK多肽；所述PSK多肽，并且所述PSK多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:598；所述RHPP；所述RHPP，并且所述RHPP的氨基酸序列包括SEQIDNO:600；所述RIRHPP；所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽；所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:587；所述EF-Tu多肽；或所述融合多肽；或
所述组合物或重组微生物包括所述PSK多肽、所述RHPP、所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽或其组合；或
所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽是具有多肽的融合蛋白；或
所述多肽进一步包括分泌信号。


19.根据权利要求18所述的组合物，其中所述多肽包括所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且其中：
(i)鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽在其N端或C端被化学修饰；或
(ii)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽通过交联或环化进行修饰；或
(iii)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽来自芽孢杆菌属、赖氨酸芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属、解硫胺素芽孢杆菌属细菌或其任何组合；或
(iv)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:1-75中的任何一个或其任何组合；或
(v)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽包括截短的N端多肽，并且所述截短的N端多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、109、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、752或其任何组合；或
(vi)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽包括截短的C端多肽，并且所述截短的C端多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225或其任何组合；或
(vii)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226、289、290、291、293、294、295、300、437、532、534、536、538、540、571-586和751-768中的任何一个或其任何组合；或
(viii)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226-300中的任何一个或其任何组合；或
(ix)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:301-375和751中的任何一个或其任何组合。


20.根据权利要求19所述的组合物或重组微生物，其中所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括：
SEQIDNO:226、293、295、300、540、571、574和752中的任何一个或其任何组合；或
SEQIDNO:754-766中的任何一个；或
SEQIDNO:754-766中的任何一个，其中所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽被掺入非鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽或全长蛋白中，其中所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的掺入导致所述非鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽或全长蛋白的生物活性引发性活性提高；或
SEQIDNO:301。


21.根据权利要求18所述的组合物或重组微生物，其中：
(i)所述硫蛋白或硫蛋白样多肽与韧皮部靶向序列融合从而形成融合的多肽，所述韧皮部靶向序列的氨基酸序列包括SEQIDNO:641-649中的任何一个或其任何组合，以便将所述融合的多肽递送至所述植物或植物部位中的维管组织或细胞和/或韧皮部或与韧皮部相关的组织或细胞；或
(ii)所述硫蛋白或硫蛋白样多肽，其中所述硫蛋白或硫蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:651并且所述硫蛋白或硫蛋白样多肽与韧皮部靶向序列融合从而形成融合的多肽，所述韧皮部靶向序列的氨基酸序列包括SEQIDNO:641中的任何一个或其任何组合，以便将所述融合的多肽递送至所述植物或植物部位中的维管组织或细胞和/或韧皮部或与韧皮部相关的组织或细胞；或
(iii)所述RHPP的氨基酸序列包含SEQIDNO:600，并且所述组合物或重组微生物进一步包括所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽；或
(iv)所述RHPP的氨基酸序列包括SEQIDNO:600，并且所述组合物或重组微生物进一步包括所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226、752和571中的任何一个；
(v)所述RHPP的氨基酸序列包括SEQIDNO:600，并且所述组合物或重组微生物进一步包括所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226；或
(vi)所述EF-Tu多肽的氨基酸序列括SEQIDNO:616；或
(vii)所述多肽进一步包括所述分泌信号，并且所述EF-Tu多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:616；或
(viii)所述多肽进一步包括所述分泌信号，并且所述EF-Tu多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:616和617。


22.根据权利要求18或21所述的组合物或重组微生物，其中所述组合物或重组微生物包括所述EF-Tu多肽或所述EF-Tu多肽和所述分泌信号，并且进一步包括所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:1-525、526、530、532、534、536、538、540、541、571-586和751-766中的任何一个或其任何组合。


23.根据权利要求22所述的组合物或重组微生物，其中
所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226、571或752中的任何一个或其组合；或
所述组合物或重组微生物进一步包括所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽；或
所述组合物或重组微生物进一步包括所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽包括SEQIDNO:587。


24.根据权利要求12到17中任一项所述的组合物或重组微生物，其包括
(a)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:571、295、300、293和580；或295、300、293和580；或571、295、293和580；或571、300、293和580；或571、293和580；或571、295、293；或
(b)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226，以及纤维二糖、纤维素、甲壳素或壳聚糖中的一个或多个；或
(c)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:226，以及所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:591；或
(d)所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽，并且所述超敏蛋白或超敏蛋白样多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:587，以及所述PSK多肽，并且所述PSK多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO:598；或
(e)所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽，并且所述鞭毛蛋白或鞭毛蛋白相关型多肽的氨基酸序列包...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·汤普森，M·莱斯利，
申请(专利权)人：斯波根生物技术公司，
类型：发明
国别省市：美国;US