用以调节免疫耐受的多功能抗体-配体捕获剂制造技术

本发明专利技术提供了多种多功能抗体‑配体捕获剂以及多种使用它们来消解免疫耐受及/或免疫功能障碍的方法。本发明专利技术的多功能抗体‑配体捕获剂以及融合蛋白可以消解免疫功能障碍，以恢复以及释出抗肿瘤或针对病原体的免疫反应。本文提供了有前景的免疫治疗剂，用于治疗以及预防癌症、传染病以及免疫炎性疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用以调节免疫耐受的多功能抗体-配体捕获剂相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)主张于2017年5月26日申请的美国申请案第62/511,911号以及2017年11月29日申请的第62/592,341号的优先权。先前申请的公开内容被认为是其一部分，并且通过引用将其整体并入本文。序列表纳入所附序列表中的材料通过引用并入本文。随附的序列表文本文件JHU4100_2WO_Sequence_Listing.txt创建于2018年5月25日，大小为1,145kb。可以在使用Windows操作系统的计算机上使用MicrosoftWord来评估文件。本专利技术的
技术介绍
本专利技术的
本专利技术总体上涉及靶向免疫调节分子以及融合蛋白的领域，更具体地涉及用于靶向免疫刺激或免疫抑制分子以及融合蛋白的组合物及方法，以消解或诱导细胞中免疫耐受。
技术介绍
资讯免疫系统为人体提供识别以及防御自身被识别为外来或潜在有害的微生物以及物质的手段。尽管使用单克隆抗体对癌症进行被动免疫疗法以及T细胞被动转移攻击肿瘤细胞已显示出临床疗效，然而，主动免疫疗法诱导这些免疫效应子并建立针对肿瘤细胞的免疫记忆的目标仍然具有挑战性。已经鉴定了几种肿瘤特异性以及与肿瘤相关的抗原，然而这些抗原通常是弱免疫原性的，并且肿瘤采用多种机制来创建致耐受性环境，从而使其能够逃避免疫攻击。克服这种免疫耐受以及激活抗体及/或T细胞应答的稳定水平的策略是有效的癌症免疫疗法的关键。
技术实现思路
本专利技术基于开创性的发现，靶向的免疫调节抗体以及融合蛋白可以消解或逆转在癌症、炎性疾病以及慢性传染病中的免疫耐受、T细胞分化异常以及T细胞功能障碍或耗竭。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分子，包含一靶向部分以及一个或多个免疫调节部分，其中所述靶向部分包含一多肽，所述多肽特异性地结合一肿瘤细胞、肿瘤微环境、肿瘤相关生长因子或受体、肿瘤相关细胞因子或受体、肿瘤相关T淋巴细胞、T细胞共刺激分子、T细胞共抑制分子、免疫细胞、病原体或病原体相关细胞的一组成部分、以及所述免疫调节部分包含一T淋巴细胞免疫受体、T细胞抑制受体、T细胞共抑制分子、T细胞共刺激分子、B淋巴细胞受体、树突细胞受体、自然杀伤细胞受体、细胞因子受体、生长因子受体、趋化因子受体或肿瘤细胞受体的一细胞外结构域(extracellulardomain,ECD)序列或其配体结合片段。在一方面中，所述靶向部分的多肽包含一免疫球蛋白、一抗体、一双特异性抗体、一多特异性抗体、一抗体片段、一单链可变片段、一二价单链可变片段、一多价单链可变片段或一含有可结晶片段多肽的一抗原结合结构域。在另一方面，所述靶向部分包含来自一受体的所述细胞外结构域的一配体结合序列。在某些方面，所述靶向部分的多肽是特异性地结合一T细胞抑制受体(Tcellinhibitoryreceptor,TCIR)、一T细胞抑制受体配体(Tcellinhibitoryreceptorligand,TCIRligand)、一T细胞共抑制分子、或一T细胞共刺激分子的一抗体。在另一方面，所述抗体是一TCIR，TCIR配体或共抑制分子的一拮抗剂。在另一方面，所述抗体是一T细胞共刺激分子的一激动剂。另一方面，所述靶向部分的多肽特异性地结合于以下的一个或多个：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CytotoxicTlymphocyteassociatedantigen-4,CTLA-4、分化簇(CD)152)、程序性死亡受体-1蛋白(ProgrammedDeath-1protein,PD-1)、程序性死亡配体-1(Programmeddeathligand-1,PD-L1)、程序性死亡配体-2(Programmeddeathligand,PD-L2)、B7-H3(CD276)、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3(T-cellimmunoglobulinandmucin-domaincontaining-3,TIM-3)、癌胚抗原相关细胞粘附分子-1(Carcinoembryonicantigen-relatedcelladhesionmolecule1,CEACAM-1)、癌胚抗原(CarcinoembryonicAntigen,CEA)、T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂(VdomainIgsuppressorofTcellactivation,VISTA)、V型及免疫球蛋白结构域的蛋白质8(V-setandimmunoglobulindomaincontaining8,VSIG8)、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子(BandTlymphocyteattenuator,BTLA)、疱疹病毒进入介体(HerpesvirusEntryMediator,HVEM)、CD160、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域(TcellIgandITMdomain,TIGIT)、CD226、CD96、淋巴细胞活化基因-3(Lymphocyteactivationgene-3,LAG-3)、转化生长因子β(transforminggrowthfactorβ,TGF-β)、转化生长因子β受体(transforminggrowthfactorβreceptor,TGFβR)、核因子κB受体致活剂(ReceptorActivatorofNuclearFactorκB,RANK)、核因子κB受体致活剂配体(RANKligand,RANKL)、4-1BB(CD137)、诱导性T细胞共刺激分子(InducibleT-CellCostimulator,ICOS)、OX-40(CD134)、糖皮质素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白(glucocorticoid-inducedTNFR-relatedprotein,GITR)、CD27、介白素-6受体(interleukin6receptor,IL6R)、IL23R、IL17R、IL-6、IL-23、IL-17、CD39、CD40、CD40L、CD47、CD73、CC趋化因子受体4(C-Cchemokinereceptortype4,CCR4)、CC趋化因子受体5(C-Cchemokinereceptortype5,CCR5)、趋化因子受体CXCR4(C-X-Cchemokinereceptortype4,CXCR-4)、IL12R、CD4、IL-2R、CD25、CD3。在某些方面，所述靶向部分的多肽特异性地结合以下的一个或多个：表皮生长因子受体/人类表皮生长因子受体-1(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR/EGFR1/ErbB-1/HER1)、表皮生长因子受体-2/人类表皮生长因子受体-2(ErbB-2/HER2/neu)、表皮生长因子受体-3/人类表皮生长因子受体-3(ErbB-3/HER3)、表皮生长因子受体-4/人类表皮生长因子受体-4(ErbB-4/HER4)、表皮生长因子(Epidermalgrowthfactor,EGF)、转化生长因子α(Transforminggrowthfactorα本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分子，其特征在于：包含一靶向部分以及一个或多个免疫调节部分，其中：/n(a)所述靶向部分包含一多肽，所述多肽特异性地结合一肿瘤细胞、肿瘤微环境、肿瘤相关生长因子或受体、肿瘤相关细胞因子或受体、肿瘤相关T淋巴细胞、T细胞共刺激分子、T细胞共抑制分子、免疫细胞、病原体或病原体相关细胞的一组成部分、以及/n(b)所述免疫调节部分包含一T淋巴细胞免疫受体、T细胞抑制受体、T细胞共抑制分子、T细胞共刺激分子、B淋巴细胞受体、树突细胞受体、自然杀伤细胞受体、细胞因子受体、生长因子受体、趋化因子受体或肿瘤细胞受体的一细胞外结构域序列或其配体结合片段。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170526 US 62/511,911;20171129 US 62/592,3411.一种分子，其特征在于：包含一靶向部分以及一个或多个免疫调节部分，其中：
(a)所述靶向部分包含一多肽，所述多肽特异性地结合一肿瘤细胞、肿瘤微环境、肿瘤相关生长因子或受体、肿瘤相关细胞因子或受体、肿瘤相关T淋巴细胞、T细胞共刺激分子、T细胞共抑制分子、免疫细胞、病原体或病原体相关细胞的一组成部分、以及
(b)所述免疫调节部分包含一T淋巴细胞免疫受体、T细胞抑制受体、T细胞共抑制分子、T细胞共刺激分子、B淋巴细胞受体、树突细胞受体、自然杀伤细胞受体、细胞因子受体、生长因子受体、趋化因子受体或肿瘤细胞受体的一细胞外结构域序列或其配体结合片段。


2.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述靶向部分的多肽包含一免疫球蛋白、抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、抗体片段、单链可变片段、二价单链可变片段、多价单链可变片段或一含有可结晶片段多肽的一抗原结合结构域。


3.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述靶向部分的多肽是特异性地结合一T细胞抑制受体、一T细胞抑制受体配体、一T细胞共抑制分子、或一T细胞共刺激分子的一抗体、或包含来自一受体或一配体的所述细胞外结构域的一配体结合序列。


4.根据权利要求2所述的分子，其特征在于：所述靶向部分是一抗体，以及所述免疫调节部分与所述抗体的重链的C端融合。


5.根据权利要求2所述的分子，其特征在于：所述靶向部分是一抗体，以及所述免疫调节部分与所述抗体的轻链的C端融合。


6.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述靶向部分的多肽特异性地结合于细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(分化簇152)、程序性死亡受体-1蛋白、程序性死亡配体-1、程序性死亡配体-2、B7-H3(分化簇276)、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3、癌胚抗原相关细胞粘附分子-1、癌胚抗原、T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂、V型及免疫球蛋白结构域的蛋白质8、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子、疱疹病毒进入介体、分化簇160、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域、分化簇226、分化簇96、淋巴细胞活化基因-3、转化生长因子β、转化生长因子β受体、核因子κB受体致活剂、核因子κB受体致活剂配体、4-1BB(分化簇137)、诱导性T细胞共刺激分子、OX-40(分化簇134)、糖皮质素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白、分化簇27、介白素-6受体、介白素-23受体、介白素-17受体、介白素-6、介白素-23、介白素-17、分化簇39、分化簇40、分化簇40L、分化簇47、分化簇73、CC趋化因子受体4、CC趋化因子受体5、趋化因子受体CXCR4、介白素-12受体、分化簇4、介白素-2受体、分化簇25、分化簇3、糖蛋白120、表皮生长因子受体/人类表皮生长因子受体-1、表皮生长因子受体-2/人类表皮生长因子受体-2、表皮生长因子受体-3/人类表皮生长因子受体-3、表皮生长因子受体-4/人类表皮生长因子受体-4、表皮生长因子、转化生长因子α、血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体-1、血管内皮生长因子受体-2或血管内皮生长因子受体-3中的一个或多个。


7.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述免疫调节部分包含转化生长因子β受体II、程序性死亡受体-1蛋白、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子、分化簇160、分化簇226、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域、分化簇96、分化簇44、群落刺激因子1受体、CC趋化因子受体4、杀伤细胞免疫球蛋白样受体、血管内皮生长因子受体、核因子κB受体致活剂、V型及免疫球蛋白结构域的蛋白质8、LIGHT(肿瘤坏死因子超家族成员14)、白细胞相关的免疫球蛋白样受体1或T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂的细胞外配体结合序列或其配体结合片段。


8.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述分子还包含一连接体。


9.根据权利要求8所述的分子，其特征在于：所述连接体融接所述靶向部分以及所述免疫调节部分。


10.根据权利要求8所述的分子，其特征在于：所述连接体包含SEQIDNO：3、4或5所示的序列。


11.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述免疫调节部分包含T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


12.根据权利要求11所述的分子，其特征在于：所述配体结合片段包含T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述癌胚抗原相关细胞粘附分子-1结合片段。


13.根据权利要求11所述的分子，其特征在于：所述免疫调节部分包含SEQIDNO：2所示的序列。


14.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述靶向部分是一多肽，所述多肽结合于程序性死亡受体-1蛋白、程序性死亡配体-1、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4、淋巴细胞活化基因-3、T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子、CC趋化因子受体4、41BB、OX40、糖皮质素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白、血管内皮生长因子、核因子κB受体致活剂配体、转化生长因子β、介白素-6受体、表皮生长因子受体、人类表皮生长因子受体-2或糖蛋白120，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


15.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述免疫调节部分包含分化簇226的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


16.根据权利要求15所述的分子，其特征在于：在所述免疫调节部分中包含SEQIDNO：9所示的序列。


17.根据权利要求15所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子、CC趋化因子受体4、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4、淋巴细胞活化基因-3、程序性死亡受体-1蛋白、程序性死亡配体-1、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域、T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂、41BB、OX40、糖皮质素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白、核因子κB受体致活剂配体、转化生长因子β、介白素-6受体、表皮生长因子受体、人类表皮生长因子受体-2、血管内皮生长因子或糖蛋白120。


18.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述免疫调节部分是分化簇44的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


19.根据权利要求15所述的分子，其特征在于：在所述免疫调节部分中包含SEQIDNO：36所示的序列。


20.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子、CC趋化因子受体4、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4、淋巴细胞活化基因-3、程序性死亡受体-1蛋白、程序性死亡配体-1、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域、T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂、41BB、OX40、糖皮质素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白、核因子κB受体致活剂配体、转化生长因子β、介白素-6受体、表皮生长因子受体、人类表皮生长因子受体-2、血管内皮生长因子或糖蛋白120，并且所述免疫调节部分是分化簇44的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


21.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述免疫调节部分包含V型及免疫球蛋白结构域的蛋白质8的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


22.根据权利要求15所述的分子，其特征在于：在所述免疫调节部分中包含SEQIDNO：55所示的序列。


23.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3、B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子、CC趋化因子受体4、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4、淋巴细胞活化基因-3、程序性死亡受体-1蛋白、程序性死亡配体-1、T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域、T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂、41BB、OX40、糖皮质素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白、核因子κB受体致活剂配体、转化生长因子β、介白素-6受体、表皮生长因子受体、人类表皮生长因子受体-2、血管内皮生长因子或糖蛋白120，并且所述免疫调节部分是V型及免疫球蛋白结构域的蛋白质8的所述细胞外结构域或其一配体结合片段。


24.根据权利要求1所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：10及145、11及146、12及147、13及148、14及149、15及150、16及151、17及152、18及153、19及154、20及155、21及156、22及157、23及158、24及159、25及160、26及161、27及162、28及163、29及164、30及165、31及166、32及167、33及168、34及169、35及170、37及171、38及172、39及173、40及174、41及175、42及176、43及177、44及178、45及179、46及180、47及181、48及182、49及183、50及184、51及185、52及186、53及187、58及188、59及189、60及61、62及63、64及65、66及67、68及69、70及71、72及73、74及75、76及77、78及79、80及81、82及83、84及85、86及87、88及89、90及91、92及93、94及95、96及97、98及99、100及101、102及103、104及105、106及107、108及109、110及111、112及113、114及115、116及117、118及119、120及121、122及123、124及125、126及127、128及129、130及131、132及133、134及135、136及137、138及139、140及141、142及143、192及193、209及210、211及212、221及222、223及224、233及234、235及236、245及246、247及248、257及258、259及260、269及270、271及272、275及276、279及280、283及284、287及288、290及291、292及293、294及295、296及297，或298及299所示的序列。


25.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于程序性死亡受体-1蛋白或程序性死亡配体-1，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


26.根据权利要求25所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一抗体，并且所述免疫调节部分与所述靶向部分的重链或轻链融接。


27.根据权利要求26所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：51及185所示的序列。


28.根据权利要求26所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：52及186所示的序列。


29.根据权利要求26所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：53及187所示的序列。


30.根据权利要求26所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：192及193所示的序列。


31.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


32.根据权利要求31所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：50及184所示的序列。


33.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于淋巴细胞活化基因-3，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


34.根据权利要求33所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：26及161所示的序列。


35.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于T细胞活化V结构域免疫球蛋白抑制剂，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


36.根据权利要求35所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：12及147所示的序列。


37.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于T细胞免疫球蛋白及免疫受体酪氨酸抑制基序结构域，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


38.根据权利要求37所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：17及152所示的序列。


39.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于B淋巴细胞及T淋巴细胞衰减子，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


40.根据权利要求39所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：22及157所示的序列。


41.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于CC趋化因子受体4，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


42.根据权利要求41所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：31及166所示的序列。


43.根据权利要求14所述的分子，其特征在于：所述靶向部分包含一多肽，所述多肽结合于4-1BB，并且所述免疫调节部分是T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域-3的所述细胞外结构域或其配体结合片段。


44.根据权利要求43所述的分子，其特征在于：所述分子包含SEQIDNO：116及117所示的序列。


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【专利技术属性】
技术研发人员：阿图尔·贝迪，拉贾尼·拉维拉，
申请(专利权)人：约翰霍普金斯大学，
类型：发明
国别省市：美国;US