一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法技术

本发明专利技术公开了一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法，包括以下步骤：S1、选取20只怀孕母鼠并进行单独培养，采用12h:12h昼夜间断照明，自由进食饮水；S2、待孕鼠分娩后并由母鼠照料4周后人为给小鼠断奶，并分别两组，NT组(10只)和烟酸组(10只)，NT组饲养条件不变，烟酸组日粮添加0.5％烟酸；S3、饲养3周后颈椎脱臼处死小鼠，摘取小鼠第4对乳腺用于Whole mount染色。该烟酸用于促进青春期乳腺发育的方法，通过体内外实验分别检测了EPH4EV细胞和小鼠乳腺增殖和周期蛋白的表达，利用分子生物学全面评估了烟酸对EPH4EV增殖和小鼠乳腺发育的效果，烟酸能显著促进细胞和小鼠乳腺中细胞增殖标志物的表达，从而促进细胞增殖和乳腺发育。

【技术实现步骤摘要】
一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法
本专利技术涉及医药
，具体为一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法。
技术介绍
乳腺是生产和分泌乳汁的场所，也是哺乳动物哺育后代唯一的腺体器官，因此乳腺发育的程度直接决定幼畜的生长状态。在生产过程中，奶牛乳腺发育迟缓会导致泌乳时期泌乳量严重不足，可对畜牧养殖业造成直接经济损失，也会间接影响奶牛繁育育种进而影响畜牧业发展进程，然而目前对育成牛乳腺的发育结构和功能的研究并未受到重视，且相关研究也仍然较少。因此，研究奶牛青春期乳腺发育及其调控对调高动物泌乳性能及其后代生长发育具有重要意义。动物出生后，乳腺发育时期主要集中于青春期、怀孕期、分娩期和退化期。其中青春期乳腺导管终末端数量直接影响动物泌乳时期腺泡细胞数量，对动物泌乳性能影响较大。青春期乳腺发育主要受生长激素、雌二醇和孕酮等激素的调节。此外，营养物质对乳腺发育也具有调控作用，目前，该类研究主要集中于氨基酸或脂肪酸，但对生物体必须维生素的研究较为少见，且部分研究已经报道维生素可能对乳腺发育具有调控作用，如敲除维生素D3受体VDR后，乳导管将会本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、选取20只怀孕母鼠并进行单独培养，采用12h:12h昼夜间断照明，自由进食饮水；/nS2、待孕鼠分娩后并由母鼠照料4周后人为给小鼠断奶，并分别两组，NT组(10只)和烟酸组(10只)，NT组饲养条件不变，烟酸组日粮添加0.5％烟酸；/nS3、饲养3周后颈椎脱臼处死小鼠，摘取小鼠第4对乳腺用于Whole mount染色。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取20只怀孕母鼠并进行单独培养，采用12h:12h昼夜间断照明，自由进食饮水；
S2、待孕鼠分娩后并由母鼠照料4周后人为给小鼠断奶，并分别两组，NT组(10只)和烟酸组(10只)，NT组饲养条件不变，烟酸组日粮添加0.5％烟酸；
S3、饲养3周后颈椎脱臼处死小鼠，摘取小鼠第4对乳腺用于Wholemount染色。


2.根据权利要求1所述的一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法，其特征在于：
烟酸对小鼠乳腺上皮细胞的影响
将小鼠乳腺上皮细胞培养于10％DMEM培养基中，待细胞在培养瓶中长满，使用胰酶消化细胞平铺于6个平皿中，并分别使用100uM、500uM、1mM、1.5mM和2mM烟酸(DMSO为溶剂)刺激小鼠乳腺上皮细胞系培养两天，随后使用CCK8检测细胞总量，使用Westernblot和流式细胞仪检测细胞增殖标志物表达量(CyclinD1、CyclinD3和PCNA)和细胞周期变化。


3.根据权利要求1所述的一种用于烟酸促进动物乳腺发育的实验方法，其特征在于：
GPR109A受体在烟酸促进EPH4EV细胞增殖中的作用实验
将小鼠乳腺上皮细胞系EPH4EV使用10μMPTX预处理细胞1h并将细胞分成4组：NT组，烟酸组，PTX抑制剂组和PTX抑制剂+烟酸组，随后使用1mM烟酸孵育细胞两天后使用CCK8...

【专利技术属性】
技术研发人员：付守鹏，曹宇，柳巨雄，郭文晋，阚兴池，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22