一种大规模干细胞培养方法和设备技术

本发明专利技术提供了一种大规模干细胞培养方法，该方法包括以下步骤：将3D微胶囊溶胀，3D微胶囊呈蜂巢状，直径为0.5‑10mm，微囊的孔径为10nm‑10000nm；将单细胞悬液接种于溶胀后的3D微胶囊，干细胞的接种密度为1‑8×10

【技术实现步骤摘要】
一种大规模干细胞培养方法和设备
本专利技术属于干细胞
，特别涉及一种大规模干细胞培养方法和设备。
技术介绍
干细胞是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞，是形成哺乳类动物的各组织器官的原始细胞，干细胞的用途非常广泛，涉及到医学的多个领域，现有的干细胞培养多是在实验室小规模培养，当扩大规模时，收获困难，因此急需一种能够易于收获的大规模干细胞培养的方法。
技术实现思路
为了解决以上技术问题，本专利技术提供了一种大规模干细胞培养方法。本专利技术具体技术方案如下：本专利技术提供了一种大规模干细胞培养方法，该方法包括以下步骤：将3D微胶囊溶胀，3D微胶囊呈蜂巢状，直径为0.5-10mm，微囊的孔径为10nm-10000nm；将单细胞悬液接种于溶胀后的3D微胶囊，干细胞的接种密度为1-8×105个/ml，再用扩增培养基对干细胞进行扩增培养，培养条件如下：静态培养1-3天，静态培养时的搅拌速度调至50-70RPM、pH调至7.0、DO50％、温度为37±1℃，每隔2天补加一次培养基，灌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大规模干细胞培养方法，其特征在于，所述方法主要包括以下步骤：/n将3D微胶囊溶胀，所述3D微胶囊呈蜂巢状，直径为0.5-10mm，所述微囊的孔径为10nm-10000nm；/n将单细胞悬液接种于溶胀后的3D微胶囊，干细胞的接种密度为1-8×10

【技术特征摘要】
1.一种大规模干细胞培养方法，其特征在于，所述方法主要包括以下步骤：
将3D微胶囊溶胀，所述3D微胶囊呈蜂巢状，直径为0.5-10mm，所述微囊的孔径为10nm-10000nm；
将单细胞悬液接种于溶胀后的3D微胶囊，干细胞的接种密度为1-8×105个/ml，再用扩增培养基对干细胞进行扩增培养，培养条件如下：静态培养1-3天，静态培养时的搅拌速度调至50-70RPM、pH调至7.0、DO50％、温度为37±1℃，每隔2天补加一次培养基，灌流培养3-5天，灌流培养时的灌流流速由0.8vvd升至2vvd，灌流流速的上升速度为1-3vvd/h，调节搅拌速度升至100rpm，每隔2天补加一次培养基；
用3D微胶囊溶解剂进行解囊；
收获扩增细胞。


2.如权利要求1所述的大规模干细胞培养方法，其特征在于，将单细胞悬液接种于溶胀后的3D微胶囊采用的是旋转培养的方式接种，其中，旋转培养的搅拌速度为30-50r/min。


3.如权利要求1所述的大规模干细胞培养方法，其特征在于，步骤(2)所述溶胀3D微胶囊的具体操作如下：将3D微胶囊与DMEM/F12培养基搅拌均匀，3D微胶囊在DMEM/F12培养基中的浓度为100-1000g/L，静置3-5h，再将3D微胶囊转移到含10％FBS的DMEM/F12培养基中，含10％FBS的DMEM/F12培养基的体积与DMEM/F12培养基的体积比为1-2:1-2。


4.如权利要求1所述的大规模干细胞培养方法，其特征在于，所述3D微胶囊的制备方法为：
S1：将重量百分比为1-6wt％的海藻酸钠溶液与重量百分比为0.1-5wt％的明胶溶液以0.1-2:0.1-2的比例混合均匀，制得第一混合溶液；
S2：在所述第一混合溶液中加入起泡剂混合均匀，所述起泡剂在所述第一混合溶液中的浓度为5-100g/L，制得第二混合溶液；
S3：在所述第二混合溶液中滴加CaCl2溶液，所述CaCl2溶液与所述第一混合溶液的体积比为1-2:1-2，制得3D微胶囊溶液；
S4：将所述3D微胶囊溶液用生理盐水洗涤3-6次，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹毓琳，贺伟，滕睿頔，王颖，张嗣良，张立新，白志惠，赵宇红，杨光，贾福强，
申请(专利权)人：北京唐颐惠康生物医学技术有限公司，北京臻溪谷医学研究中心有限合伙，
类型：发明
国别省市：北京;11