含有miRNA的癌症治疗用医药组合物制造技术

本发明专利技术的目的在于探索一种具有较高的癌症治疗效果的医药品。本发明专利技术提供一种包含编码miRNA的基因的转录产物或其加工产物的癌症治疗用医药组合物，上述miRNA为选自miR‑3140、miR‑137、miR‑631和miR‑657中的1个或多个miRNA。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含有miRNA的癌症治疗用医药组合物
本专利技术涉及一种包含编码特定的miRNA的基因的转录产物或其加工产物的癌症治疗用医药组合物。
技术介绍
MicroRNA(以下，称为miRNA)是一种在基因组上被编码并经过多个阶段的生成过程而最终变为长度20～25个碱基左右的微小RNA的功能性核酸。miRNA被分类为功能性的ncRNA(非编码RNA，non-codingRNA)，不断阐明其在各种生命现象(例如，基因的表达控制等)中起到重要作用。迄今为止已知的各种miRNA，也包括人的miRNA，登记在miRBase(参照http://www.mirbase.org/)中。已经指出miRNA与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病、精神疾病、慢性炎症性疾病等的发病和发展有关。特别是，近年来指出miRNA深入参与细胞的癌变、细胞的衰老。例如，专利文献1中记载了miR-22促进细胞的衰老并抑制癌的浸润和/转移。另外，专利文献2中记载了含有miR-34的组合物可用于癌症的治疗。现有技术文献专利文献专利文献1：WO2011/078037专利文献2：WO2008/137867
技术实现思路
本专利技术人等从极其多的miRNA中深入探索具有癌症治疗效果的miRNA。其结果，本专利技术人等发现了具有与现有技术记载的miRNA相比明显更高的癌症治疗效果的特定的miRNA，从而完成了本专利技术。即本专利技术涉及一种医药组合物，其特征在于，是包含编码miRNA的基因的转录产物或其加工产物的癌症治疗用医药组合物，上述miRNA为选自miR-3140、miR-137、miR-631和miR-657中的1个或多个miRNA。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述癌症为实体癌。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述实体癌为大肠癌、胰腺癌、舌癌、间皮瘤、子宫肉瘤、骨肉瘤、乳腺癌、肺癌或头颈癌。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，编码上述miRNA的基因的转录产物或其加工产物为pri-miRNA、pre-miRNA、双链成熟miRNA、从pre-miRNA的5’末端侧表达的单链成熟miRNA、或者从pre-miRNA的3’末端侧表达的单链成熟miRNA。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述miRNA为：(i)由序列号1、序列号2、序列号5、序列号8或序列号11表示的序列构成的成熟miRNA；(ii)相对于由序列号1、序列号2、序列号5、序列号8或序列号11表示的序列构成的成熟miRNA具有1～5个碱基的替换、添加和/或缺失并具有癌症治疗效果的miRNA；或(iii)相对于由序列号1、序列号2、序列号5、序列号8或序列号11表示的序列构成的成熟miRNA具有80％以上序列同源性并具有癌症治疗效果的miRNA。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述miRNA进行了化学修饰。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述化学修饰为选自LNA化、BNA化、ENA化、2’-OMe修饰、硫代磷酸化、S-TuD化、吗啉代修饰、肽添加、糖链添加、适体添加、疏水性分子添加、高分子添加、和非修饰DNA添加中的1种或多种化学修饰。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述医药组合物进一步含有核酸转染剂。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述转染剂为脂质系转染剂、聚合物系转染剂、磁性粒子系转染剂、核酸递送用外泌体或核酸递送用病毒蛋白质。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述转染剂为含有由GGGGDD(G4D2)、GGGGGGDD(G6D2)、GGGGGGGGDD(G8D2)、GGGGGGGGGGDD(G10D2)、AAAAAAD(A6D)、AAAAAADD(A6D2)、AAAAAAK(A6K)、AAAAAAKK(A6K2)、VVVVVVD(V6D)、VVVVVVDD(V6D2)、VVVVVVK(V6K)、VVVVVVKK(V6K2)、LLLLLLD(L6D)、LLLLLLDD(L6D2)、LLLLLLK(L6K)或LLLLLLKK(L6K2)的氨基酸序列表示的肽的转染剂。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，本专利技术的医药组合物为局部给药用。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，本专利技术的医药组合物与其它抗癌剂并用。本专利技术的一个实施方式中，其特征在于，上述其它抗癌剂为选自烷化剂、铂制剂、代谢拮抗剂、拓扑异构酶抑制剂、微管抑制剂、抗癌性抗生素、分子靶向药物、激素制剂、免疫调节剂、干扰素、白介素、植物来源的抗癌剂、BRM制剂中的1种或多种抗癌剂。本专利技术的另一实施方式是编码miRNA的基因的转录产物或其加工产物在制造癌症治疗用医药组合物中的使用，其特征在于，上述miRNA为选自miR-3140、miR-137、miR-631和miR-657中的1个或多个miRNA。本专利技术的另一实施方式涉及一种癌症的治疗方法，其特征在于，上述方法包括对癌症患者应用治疗上有效量的包含编码miRNA的基因的转录产物或其加工产物的抗癌用医药组合物的步骤，上述miRNA为选自miR-3140、miR-137、miR-631和miR-657中的1个或多个miRNA。将上述举出的本专利技术的一个或多个特征任意组合而得的专利技术也包含于本专利技术的范围。附图说明图1对本实施例中的miRNA的筛选的流程进行说明。图2对本实施例中的miRNA的筛选的流程进行说明。图3示出在miRNA的筛选中挑选出的对多种癌细胞显示增殖抑制效果的4个miRNA。图4示出本专利技术的miRNA对舌癌细胞株(HSC-4细胞，OSC19细胞)的效果。图5示出本专利技术的miRNA对舌癌细胞株(SAS细胞)的效果。图6示出本专利技术的miRNA对间皮瘤细胞株(MSTO-211H细胞)的效果。图7示出本专利技术的miRNA对间皮瘤细胞株(EHMES-10细胞)的效果。图8示出本专利技术的miRNA对子宫肉瘤细胞株(MES-SA细胞)的效果。图9示出本专利技术的miRNA对骨肉瘤细胞株(U2-OS细胞)的效果。图10示出本专利技术的miRNA对癌干细胞株(MDA-MB231-luc-D3H2LN细胞)的效果。图11示出本专利技术的miRNA对肺癌细胞株(A549细胞)的效果。图12示出本专利技术的miRNA对大肠癌细胞株(SW620细胞、SW480细胞、HT29细胞)的效果。图13示出本专利技术的miRNA在体内的癌症治疗效果。图14示出肿瘤细胞移植后12、19、26、33天后的肿瘤组织的成像分析结果。图15示出对图14中的成像分析结果进行定量的图。图16示出对试验终点的肿瘤的重量进行比较的结果。图17示出肿瘤细胞移植后的肿瘤组织的成像分析结果。图18示出对试验终点的肿瘤的重量进行比较的结果。图19示出实验7的时间表。图20示出本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种医药组合物，其特征在于，是包含编码miRNA的基因的转录产物或其加工产物的癌症治疗用医药组合物，所述miRNA为选自miR-3140、miR-137、miR-631和miR-657中的1个或多个miRNA。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171109 JP 2017-2163361.一种医药组合物，其特征在于，是包含编码miRNA的基因的转录产物或其加工产物的癌症治疗用医药组合物，所述miRNA为选自miR-3140、miR-137、miR-631和miR-657中的1个或多个miRNA。


2.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，所述癌症为实体癌。


3.根据权利要求2所述的医药组合物，其特征在于，所述实体癌为大肠癌、胰腺癌、舌癌、间皮瘤、子宫肉瘤、骨肉瘤、乳腺癌、肺癌或头颈癌。


4.根据权利要求1所述的医药组合物，其特征在于，编码所述miRNA的基因的转录产物或其加工产物为pri-miRNA、pre-miRNA、双链成熟miRNA、从pre-miRNA的5’末端侧表达的单链成熟miRNA或者从pre-miRNA的3’末端侧表达的单链成熟miRNA。


5.根据权利要求4所述的医药组合物，其特征在于，所述miRNA为：
(i)由序列号1、序列号2、序列号5、序列号8或序列号11表示的序列构成的成熟miRNA；
(ii)相对于由序列号1、序列号2、序列号5、序列号8或序列号11表示的序列构成的成熟miRNA具有1～5个碱基的替换、添加和/或缺失并具有癌症治疗效果的miRNA；或
(iii)相对于由序列号1、序列号2、序列号5、序列号8、或序列号11表示的序列构成的成熟miRNA具有80％以上序列同源性并具有癌症治疗效果的miRNA。


6.根据权利要求1～5中任一项所述的医药组合物，其特征在于，所述miRNA进行了化学修饰。


7.根据权利要求6所述的医药组合物，其特征在于，所述化学修饰为选自LNA化、BNA化、ENA化、2’-OMe修饰、硫代磷酸化、S-TuD化、吗啉代修饰、肽添加、糖链添加、适体添加、疏水性分子添加、高分子添加和非修饰DNA添加中的1种或多种化学修饰。


8.根据权利要求1～7中任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：田原荣俊，木根原匡希，山本佑树，
申请(专利权)人：国立大学法人广岛大学，立美基股份有限公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP