用于检测结核杆菌及其耐药性的方法技术

本发明专利技术公开用于检测结核杆菌及其耐药性的方法，其包括使预混液和油在微滴发生器内生成含有众多微滴的反应体系，然后在能够进行PCR反应的条件下处理反应体系，随后使处理后的反应体系中各微滴依次分别通过双色检测器来检测荧光，基于获得的荧光信号检测结核杆菌及其耐药性。本发明专利技术的检测方法具有更高的检测灵敏度和准确性，可以快速鉴别结核分枝杆菌及其耐药性。

【技术实现步骤摘要】
用于检测结核杆菌及其耐药性的方法
本专利技术涉及基因检测领域，具体地涉及用于检测结核杆菌及其耐药性的方法。
技术介绍
耐药结核病是当今世界非常严峻的公共卫生问题，它直接影响着全球结核病疫情的控制。耐药结核病是指病原体对抗结核药物产生了耐受性的疾病状态，抗结核药物的出现几乎与耐药结核病相伴而生，随时间推移和新药的应用，病原体耐药性不断提高，导致了结核病的难以控制。根据体外药物敏感性试验(drugsensitivitytest,DST)结果，通常可将耐药分为单耐药(monoresistance，MR)、多耐药(耐2种以上药物但不同时包括异烟肼、利福平)结核病。在所有抗结核药物中，异烟肼和利福平是目前最佳核心药物，一旦对它们耐受，就意味着结核病的治疗陷入困境。耐药结核病的诊断主要是通过实验室检测进行，主要有以下三种方法。第一种为分离培养方法。作为传统方法，适用于所有结核杆菌及其他病原体。但其耗时长，费工费力，操作需要准确的菌量和培养基的药物浓度匹配，其在国内各医院的使用受到易得性、准确性、可重复性、标准化的限制，其结果对指导临床治疗作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测结核杆菌及其耐药性的方法，其特征在于，包括使预混液和油在微滴发生器内生成含有众多微滴的反应体系，然后在能够进行PCR反应的条件下处理反应体系，随后使处理后的反应体系中各微滴依次分别通过双色检测器来检测荧光，基于获得的荧光信号检测结核杆菌及其耐药性，其中，所述预混液包含引物对、探针组和来源于样品的模板，所述探针组中各探针分别具有不同的荧光基团，且各探针的靶序列不同，并能够与靶序列完全互补，各探针的靶序列分别位于第一靶基因或第二靶基因内。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测结核杆菌及其耐药性的方法，其特征在于，包括使预混液和油在微滴发生器内生成含有众多微滴的反应体系，然后在能够进行PCR反应的条件下处理反应体系，随后使处理后的反应体系中各微滴依次分别通过双色检测器来检测荧光，基于获得的荧光信号检测结核杆菌及其耐药性，其中，所述预混液包含引物对、探针组和来源于样品的模板，所述探针组中各探针分别具有不同的荧光基团，且各探针的靶序列不同，并能够与靶序列完全互补，各探针的靶序列分别位于第一靶基因或第二靶基因内。


2.根据权利要求1所述的用于检测结核杆菌及其耐药性的方法，其特征在于，所述反应体系包含5000至50000个体积为0.5-3nL的微滴，且各微滴分别包含引物对和由两条探针组成的探针组。


3.根据权利要求2所述的用于检测结核杆菌及其耐药性的方法，其特征在于，所述方法包括生成第一反应体系、第二反应体系和第三反应体系，且第一反应体系包含第一引物对和第一探针组，第二反应体系包含第一引物对和第二探针组，第三反应体系包含第一引物对、第二引物对和第三探针组，其中：第一引物对用于扩增第一靶基因的序列，第二引物对用于扩增第二靶基团的序列，第一探针组和第二探针组中各探针的靶序列分别位于第一靶基因内，而第三探针组中的一条探针的靶序列位于第一靶基因内，另一条探针的靶序列位于第二靶基因内。


4.根据权利要求3所述的用于检测结核杆菌及其耐药性的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈含，高建勇，王伟伟，田埂，
申请(专利权)人：元码基因科技北京股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11