一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法，首先提取乳品样本，提取乳品样本多的RNA；在0.5ml微量离心管中，加入步骤一中RNA1‑5μg，补充DEPCH

【技术实现步骤摘要】
一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法
本专利技术涉及一种乳品检测方法，特别涉及一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法，属于乳品检测

技术介绍
近年来，随着PCR技术的发展，针对某一种或一类致病菌的PCR检验方法被建立起来，得到了广泛应用。在食品安全检测领域，基于DNA扩增的PCR检测病原菌方法，检测时间为两天左右，并且检测结果若为阳性不能说明检出的致病菌为死菌还是活菌，还需进一步送实验室按照国标方法进行细菌培养才能够发检验报告。目前奶制品厂使用的方法仍然是直接细菌培养方法，需要4-5天时间才能发报告，导致大量产品要在仓库放置几天才能够出厂销售，造成生产厂家的生产成本增加。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法：(1)首先提取乳品样本，提取乳品样本多的RNA；(2)在0.5ml微量离心管中，加入步骤一中RNA1-5μg，补充DEPCH2O使总体积达11u本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法，其步骤如下：/n(1)首先提取乳品样本，提取乳品样本多的RNA；/n(2)在0.5ml微量离心管中，加入步骤一中RNA1-5μg，补充DEPCH

【技术特征摘要】
1.一种乳品中阪崎肠杆菌的快速检测方法，其步骤如下：
(1)首先提取乳品样本，提取乳品样本多的RNA；
(2)在0.5ml微量离心管中，加入步骤一中RNA1-5μg，补充DEPCH2O使总体积达11ul，在管中加10μMOligo(dt)12-18ul,然后均匀摇晃进行离心；
(3)70℃加热10分钟后，立即将步骤2中的微量离心管插入冰浴中1分钟；
(4)取0.5mlPCR管，依次加入下列试剂：第一链cDNA2ul；上游引物(10pM)2ul；下游引物(10pM)2ul；dNTP(2mM)4ul；10×PCRbuffer5ul；Taq酶(2u/ul)1ul，轻轻混匀，离心，42℃孵育2～5min；
(5)将管插入冰中，加入RNaseH1，37℃孵育20min，降解残留的RNA，-20℃保存备用；
(6)取0.5mlPCR管，依次加入下列试剂：第一链cDNA2ul；上游引物(10pM)ul；下游引物(10pM)2ul；dNTP(2mM)4ul；10×PCRbuffer5ul；Taq酶(2u/ul)1ul，加入适量的ddH2O，使总体积达50ul，轻轻混匀，离心；
(7)设定...

【专利技术属性】
技术研发人员：高安成，胡军，杨晓东，李宏铎，李亚楠，沙淼，
申请(专利权)人：西安市食品药品检验所，陕西瑞奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61