一种蛋白酶筛选底物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种蛋白酶筛选底物及其制备方法和应用，属于检测技术领域。本发明专利技术提供了一种测定蛋白酶酶活的方法，利用此方法检测蛋白酶的酶活时，仅需将待测样品与蛋白酶筛选底物混合后观察混合液的颜色变化和颜色变化的响应时间即可，操作简单。本发明专利技术提供了一种测定蛋白酶酶活的方法，此方法以大米蛋白为底物，因此，利用此方法可准确的测定出蛋白酶对大米蛋白的酶活，在筛选得到更多对大米蛋白酶活高的蛋白酶方面具有极高的应用前景。

A protease screening substrate and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白酶筛选底物及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种蛋白酶筛选底物及其制备方法和应用，属于检测

技术介绍
大米是我国第一大粮食品种。大米蛋白则是国际公认的优质蛋白。与大豆蛋白、乳清蛋白等蛋白相比，大米蛋白的营养抑制因子含量少，无过敏反应，大米蛋白包含人体所需氨基酸且氨基酸配比合理，另外，大米蛋白的生物价远超大豆蛋白，可与虾及牛肉等的生物价相媲美，符合世界卫生组织(WHO)推荐的理想模式。但是，由于大米蛋白中含有较多谷蛋白，不易溶解，因此，大米蛋白多用作动物饲料添加剂。为了提高大米蛋白的附加值，通常将其水解成短肽或氨基酸后制成营养价值更高的短肽或氨基酸营养液，作为高价值添加剂运用于保健品、饮料、化妆品等行业。高纯度的大米肽价格在10万/吨以上。目前，主要是使用酶解法对大米蛋白进行水解。但是，现有的酶解法仍具有许多缺陷，其中，酶解法所使用的蛋白酶对大米蛋白的酶活不高所导致的水解大米蛋白效率低、水解大米蛋白所得水解液中多肽含量低是最严重的缺陷之一。例如，公开号为CN1102229643A的专利申请文本中，专利技术人使用碱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述方法为将含有蛋白和金纳米颗粒的缓冲液进行第一次反应，得到反应液A；在反应液A中添加巯基已醇进行第二次反应，得到反应液B；将反应液B进行分离，得到蛋白酶筛选底物。/n

【技术特征摘要】
1.一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述方法为将含有蛋白和金纳米颗粒的缓冲液进行第一次反应，得到反应液A；在反应液A中添加巯基已醇进行第二次反应，得到反应液B；将反应液B进行分离，得到蛋白酶筛选底物。


2.如权利要求1所述的一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述缓冲液中，蛋白的浓度为5～100mg/mL。


3.如权利要求1或2所述的一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述缓冲液中，金纳米颗粒的浓度为0.1～1.0mmol/mL。


4.如权利要求1-3任一所述的一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液、PBS缓冲液、Tris-EDTA缓冲液或Tris缓冲液。


5.如权利要求1-4任一所述的一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述缓冲液的浓度为5～20mmol/L、pH为7～8。


6.如权利要求1-5任一所述的一种制备蛋白酶筛选底物的方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，颜正飞，秦琴，唐诚业，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32