抗体纯化制造技术

本发明专利技术涉及从羊乳例如山羊乳中纯化异源抗体的方法。本发明专利技术包括基于蛋白A的亲和色谱法，以获得纯化的转基因表达的抗体，特别是不含内源性羊抗体的浓缩物。

Antibody purification

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗体纯化
本专利技术涉及抗体的纯化，特别是在哺乳动物乳例如山羊(goat)乳中转基因表达和分泌的重组单克隆抗体的纯化。
技术介绍
抗体长期以来一直用于研究中，并广泛用于诊断中，最近又作为治疗剂或治疗诊断剂。抗体的研究用途主要包括特定抗原的检测，例如如Western印迹、免疫组织化学、流式细胞术等，或者作为替选地，可涉及特定抗原的分离。诊断类似地依赖于抗原的检测，所述抗原例如疾病特异性抗原，包括致病性抗原，还有自身抗原，例如与癌症或自身免疫病相关的抗原。在过去的几十年中，治疗性抗体变得越来越重要。当前市场上有大量治疗性抗体。这些抗体主要用于干扰特定的抗原功能，例如包括抗体的中和作用，但作为替选地可参与调节免疫系统，例如诱导或抑制特定的免疫应答。在2014年，单克隆抗体(mAb)占投放市场的新分子的20％以上。多克隆抗体的生产相对直接，而单克隆抗体的生产，尤其是以满足包括治疗用途在内的当今需求的量的生产，成本更高且劳动强度更高。尽管单克隆抗体通常源自杂交瘤，但大规模生产通常涉及分离抗体编码序列并在异源体系中重组地表达抗体。最直接的抗体生产体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.纯化抗体的方法，其包括：/n(a)提供包含异源抗体的羊乳清，任选地脱脂羊乳清；/n(b)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；/n(c)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及/n(d)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；/n其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171114 EP 17201536.41.纯化抗体的方法，其包括：
(a)提供包含异源抗体的羊乳清，任选地脱脂羊乳清；
(b)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；
(c)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及
(d)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；
其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。


2.根据权利要求1所述的方法，其包括：
(a)提供包含异源抗体的羊乳，任选地脱脂羊乳；
(b)从所述乳中去除酪蛋白以获得乳清；
(c)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；
(d)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及
(e)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；
其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其包括：
(a)提供包含异源抗体的羊乳；
(b)对所述乳进行脱脂；
(c)从所述脱脂乳中去除酪蛋白以获得乳清；
(d)使所述乳清与含有蛋白A的基质接触；
(e)使所述含有蛋白A的固体基质与所述乳清分离；以及
(f)从所述含有蛋白A的固体基质中洗脱所述异源抗体；
其中在洗脱所述异源抗体之前，内源性羊抗体被洗脱。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述内源性羊抗体在低于用于洗脱所述异源抗体的pH的pH下洗脱；优选地，其中所述用于洗脱内源性羊抗体的pH为4.0至5.0，优选4.3至5.0，更优选4.5至5.0，例如pH为4.7或4.8。


5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷吉娜·弗雷切尔斯，奥利维耶·法夫尔比勒，弗朗索瓦·科特，贝特朗·梅罗，
申请(专利权)人：生物资源公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE