吲哚类生物碱、制备方法及作为降血糖药物的应用技术

本发明专利技术公开一种吲哚类生物碱，结构式如下：

Indole alkaloids, preparation methods and application as hypoglycemic drugs

【技术实现步骤摘要】
吲哚类生物碱、制备方法及作为降血糖药物的应用
本专利技术涉及一种生物碱类化合物、制备方法及应用，尤其是一种吲哚类生物碱、制备方法及作为降血糖药物的应用。
技术介绍
中药吴茱萸为芸香科(Rutaceae)吴茱萸属(Tetradium)植物吴茱萸Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.、石虎Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸Euodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang的干燥近成熟果实。根据《神农本草经》记载，吴茱萸具有味苦、辛温、有小毒等特性，归肝、脾、胃、肾经，具有助阳止泻、温中止痛、降逆止呕、散寒止痛等功，临床上常用于寒凝疼痛、胃寒呕吐、虚寒泄泻等症状的治疗。迄今为止没有以吴茱萸为原料，提取降血糖活性成份的相关报道。
技术实现思路
本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种吲哚类生物碱、制备方法及作为降血糖药物的应用。本专利技术的技术解决方案是：一种吲哚类生物碱，其特征在于结构式如下：。所述吲哚类生物碱的制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：a.将吴茱萸近成熟果实粉碎，用质量浓度70%的乙醇加热回流提取三次，合并提取液，减压浓缩并回收乙醇，得吴茱萸浸膏；将吴茱萸浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇多次等体积萃取，分别减压浓缩得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物及正丁醇萃取物；b.将乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2梯度洗脱；c.合并石油醚-乙酸乙酯20:1至5:1洗脱流份；d.将所得洗脱流分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2梯度洗脱，每个梯度收集3个洗脱流份，每个洗脱流份为1L，将依次得到的24个洗脱流分分别记为N1~N24；e.将洗脱流份N6经反相ODS中压柱色谱分离，以甲醇-水梯度洗脱，流速15ml/min，洗脱6h，得到13个洗脱流份，每个洗脱流份为420ml，将依次得到的13个洗脱流份分别记为N6-1~N6-13；f.将洗脱流份N6-10经反相半制备C18色谱柱HPLC分离，甲醇：水=4：1，流速3.0ml/min，得到6个流份分别记为N6-10-1~N6-10-6；g.将洗脱流份N6-10-3经反相半制备C18色谱柱HPLC分离，甲醇：水=4：1，流速3.0ml/min，得单体化合物，即吲哚类生物碱。所述的吲哚类生物碱作为降血糖药物的应用。所述的吲哚类生物碱是作为抑制α-葡萄糖苷酶活性药物的应用。本专利技术的吲哚类生物碱是从中药吴茱萸中提取，具有对α-葡萄糖苷酶活性抑制活性，可应用于制备降血糖药物。附图说明图1是本专利技术实施例化合物1的HRESIMS谱图。图2是本专利技术实施例化合物1的关键1H-1HCOSY和HMBC相关图。图3是本专利技术实施例化合物1的1HNMR谱图。图4是本专利技术实施例化合物1的13CNMR谱图。图5是本专利技术实施例化合物1的1H-1HCOSY谱图。图6是本专利技术实施例化合物1的HSQC谱图。图7是本专利技术实施例化合物1的HMBC谱图。具体实施方式本专利技术的制备方法依次按照如下步骤进行：a.将吴茱萸近成熟果实粉碎，用质量浓度70%的乙醇加热回流提取三次，合并提取液，减压浓缩并回收乙醇，得吴茱萸浸膏；将吴茱萸浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇多次等体积萃取，分别减压浓缩得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物及正丁醇萃取物；b.将乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2梯度洗脱，每个梯度收集32L；c.合并石油醚-乙酸乙酯20:1至5:1洗脱流份；d.将所得洗脱流分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2梯度洗脱，每个梯度收集3个洗脱流份，每个洗脱流份为1L，将依次得到的24个洗脱流分分别记为N1~N24；e.将洗脱流份N6经反相ODS中压柱色谱分离，以甲醇-水梯度（10:90~90:10）洗脱，流速15ml/min，洗脱6h，得到13个洗脱流份，每个洗脱流份为420ml，将依次得到的13个洗脱流份分别记为N6-1~N6-13；f.将洗脱流份N6-10经反相半制备C18色谱柱HPLC分离，甲醇：水=4：1，流速3.0ml/min，得到6个流份分别记为N6-10-1~N6-10-6；g.将洗脱流份N6-10-3经反相半制备C18色谱柱HPLC分离，甲醇：水=4：1，流速3.0ml/min，得单体化合物1。一.化合物1的结构测定：化合物1为白色粉末。化合物1的HRESIMS谱图、H-1HCOSY和HMBC相关谱图、1HNMR谱图、13CNMR谱图、1H-1HCOSY谱图、HSQC谱图及HMBC谱图分别如图1~图7所示。化合物1的核磁共振氢谱和碳谱数据如表1所示。表1注：13C-NMR（600MHz，DMSO-d6），1H-NMR（150MHz，DMSO-d6）根据(+)-HR-ESIMSm/z372.1327[M+Na]+(calcdforC20H19N3NaO3,372.1319)结合核磁共振数据确定其分子式为C20H19N3O3（图1）。化合物1的1HNMR谱显示存在一个邻位二取代的苯环[δH7.47(d,J=8.4Hz,H-16)，7.79(td,J=8.4,1.2Hz,H-17)，7.32(td,J=7.8,1.2Hz,H-18)和8.09(dd,J=7.8,1.2Hz,H-19)]，一个ABX取代苯环[δH7.21(d,J=2.4Hz,H-9)，6.73(dd,J=8.4,2.4Hz,H-11)和7.23(d,J=8.4Hz,H-12)]，一个烯氢信号[δH7.17(d,J=1.8Hz,H-2)]，两个脂肪族亚甲基信号[δH4.21(m,H-5)和2.95(m,H-6)]，一个氮甲基信号[δH3.55(s,NCH3-14)]，一个甲氧基信号[δH3.76(s,OCH3-10)]以及一个可交换的质子[δH10.68(s,NH-1)]共振信号（表1）。13CNMR谱显示与以上基团相对应的碳信号外，还有四个sp2杂化的碳信号[δC123.5(C-2),150.3(C-3),110.7(C-7)和161.1(C-21)]（表1）。根据以上数据推测该化合物具有一个吲哚环和一个喹唑酮环，利用2DNMR实验和图谱解析对其结构进行了进一步确定。通过HSQC谱解析，对NMR谱中氢原子及其相连的碳原子信号进行了准确归属。在1H-1HCOSY谱中，同核质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种吲哚类生物碱，其特征在于结构式如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种吲哚类生物碱，其特征在于结构式如下：

。


2.一种如权利要求1所述吲哚类生物碱的制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：
a.将吴茱萸近成熟果实粉碎，用质量浓度70%的乙醇加热回流提取三次，合并提取液，减压浓缩并回收乙醇，得吴茱萸浸膏；将吴茱萸浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇多次等体积萃取，分别减压浓缩得石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物及正丁醇萃取物；
b.将乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2梯度洗脱；
c.合并石油醚-乙酸乙酯20:1至5:1洗脱流份；
d.将所得洗脱流分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯按50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，2:1，1:1，1:2梯度洗脱，每个梯度收集3个洗脱流份，每个洗脱流...

【专利技术属性】
技术研发人员：李大伟，冷爱晶，韩春辉，蔡明宸，王超，马骁驰，
申请(专利权)人：大连医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：辽宁;21