人EXOSC2基因的用途及相关产品制造技术

本发明专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及人EXOSC2基因作为靶标在制备结直肠癌治疗药物中的用途。本发明专利技术经过广泛而深入的研究发现，采用RNAi方法下调人EXOSC2基因的表达后可有效地抑制结直肠癌细胞的增殖、促进细胞凋亡，可以有效地控制结直肠癌的生长进程。本发明专利技术提供的siRNA或者包含该siRNA序列的核酸构建体、慢病毒能够特异性抑制结直肠癌细胞的增殖速率、促进结直肠癌细胞凋亡、抑制结直肠癌细胞克隆、抑制结直肠癌细胞侵袭转移，从而治疗结直肠癌，为结直肠癌治疗开辟新的方向。

Use of human exosc2 gene and related products

【技术实现步骤摘要】
人EXOSC2基因的用途及相关产品
本专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及人EXOSC2基因的用途及相关产品。
技术介绍
RNA外切体复合物(RNAexosomecomplex)简称外切酶，是由至少5种外切酶组成的复合物。RNA外切体复合物2(EXOSC2)也称为核糖体RNA加工蛋白4(RRP4)，位于染色体Xp11.23，EXOSC2的错义突变会导致一种独特的综合征，包括色素性视网膜炎，听力下降和轻度智力障碍。致病性G198D突变会阻止EXOSC2与其他RNA外切体成分的结合，从而导致组成蛋白和复合物的不稳定性及自噬通路中关键基因表达和/或活性的改变。EXOSC2是RNA外切体复合物的非催化组分，具有3’→5’核酸外切酶活性，参与细胞中RNA加工和降解过程。tRNA的上调可增强其同源密码子富集的转录本的稳定性和核糖体占有率。在细胞核内,RNA外切体复合物参与RNA(如rRNA,snRNA和snoRNA)的成熟过程；清除RNA加工中的副产品和非编码转录本，如反义RNA链，启动子上游转录本以及转录过程中生成的缺陷RNA，从而抑制或防止它们转运至细胞核。此外，tRNAGluUUC可能通过促进EXOSC2、GRIPAP1(构成由tRNA驱动的相关通路)的表达来促进肿瘤转移。目前还未有EXOSC2基因用于结直肠癌治疗的相关报道。
技术实现思路
为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供人EXOSC2基因的用途及相关产品。为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供人EXOSC2基因作为靶标在制备结直肠癌治疗药物中的用途。所述人EXOSC2基因作为靶标在制备结直肠癌治疗药物具体是指：将EXOSC2基因作为作用对象，对药物或制剂进行筛选，以找到可以抑制人EXOSC2基因表达的药物作为结直肠癌治疗备选药物。如本专利技术所述的EXOSC2基因小分子干扰RNA(siRNA)即是以人EXOSC2基因为作用对象筛选获得的，可用作具有抑制结直肠癌细胞增殖作用的药物。除此之外，诸如抗体药物，小分子药物等也可将EXOSC2基因作为作用对象。所述结直肠癌治疗药物为能够特异性抑制EXOSC2基因的转录或翻译，或能够特异性抑制EXOSC2蛋白的表达或活性的分子，从而降低结直肠癌细胞中EXOSC2基因的表达水平，达到抑制结直肠癌细胞的增殖、生长、分化和/或存活的目的。所述通过EXOSC2基因制备获得的结直肠癌治疗药物包括但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂类、小分子化学药、抗体药、多肽、蛋白或干扰慢病毒。所述核酸包括但不限于：反义寡核苷酸、双链RNA(dsRNA)、核酶、核糖核酸内切酶III制备的小干扰RNA或者短发夹RNA(shRNA)。所述结直肠癌治疗药物的施用量为足够降低人EXOSC2基因的转录或翻译，或者足够降低人EXOSC2蛋白的表达或活性的剂量。以使人EXOSC2基因的表达至少被降低50％、80％、90％、95％或99％。采用前述结直肠癌治疗药物治疗结直肠癌的方法，主要是通过降低人EXOSC2基因的表达水平抑制结直肠癌细胞的增殖来达到治疗的目的。具体的，治疗时，将能有效降低人EXOSC2基因表达水平的物质给药于患者。在一种实施方式中，所述EXOSC2基因的靶标序列如SEQIDNO：1所示。具体为：5’-GAAGCTCATTGCATCTGTT-3’。本专利技术的第二方面，提供EXOSC2抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：治疗结直肠癌；抑制结直肠癌细胞的增殖速率；促进结直肠癌细胞凋亡；抑制结直肠癌细胞克隆；抑制结直肠癌细胞侵袭转移。所述产品必然包括EXOSC2抑制剂，并以EXOSC2抑制剂作为前述功效的有效成分。所述产品中，发挥前述功用的有效成分可仅为EXOSC2抑制剂，亦可包含其他可起到前述功用的分子。亦即，EXOSC2抑制剂为所述产品的唯一有效成分或有效成分之一。所述产品可以为单成分物质，亦可为多成分物质。所述产品的形式无特殊限制，可以为固体、液体、凝胶、半流质、气雾等各种物质形式。所述产品主要针对的对象为哺乳动物。所述哺乳动物优选为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述灵长目动物优选为猴、猿或人。所述产品包括但不限于药物、保健品、食品等。所述EXOSC2抑制剂可以为核酸分子、抗体、小分子化合物。如本专利技术实施例列举的，所述EXOSC2抑制剂可以为降低结直肠癌细胞中EXOSC2基因表达的核酸分子。具体的，可以是双链RNA或shRNA。本专利技术的第三方面，提供了一种治疗结直肠癌的方法，为向对象施用EXOSC2抑制剂。所述的对象可以为哺乳动物或哺乳动物的结直肠癌细胞。所述哺乳动物优选为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述灵长目动物优选为猴、猿或人。所述结直肠癌细胞可以为离体结直肠癌细胞。所述对象可以是罹患结直肠癌的患者或者期待治疗的结直肠癌的个体。或者所述对象为结直肠癌患者或者期待治疗结直肠癌的个体的离体结直肠癌细胞。所述EXOSC2抑制剂可以在接受结直肠癌治疗前、中、后向对象施用。本专利技术第四方面公开了一种降低结直肠癌细胞中EXOSC2基因表达的核酸分子，所述核酸分子包含双链RNA或shRNA。其中，所述双链RNA中含有能够与EXOSC2基因杂交的核苷酸序列；所述shRNA中含有能够与EXOSC2基因杂交的核苷酸序列。进一步的，所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列与EXOSC2基因中的靶序列基本相同。所述EXOSC2基因中的靶序列即为核酸分子用于特异性沉默EXOSC2基因表达时，被所述核酸分子识别并沉默的mRNA片段所对应的EXOSC2基因中的片段。进一步的，所述双链RNA的靶序列如SEQIDNO：1所示。具体为：5’-GAAGCTCATTGCATCTGTT-3’。更进一步的，所述双链RNA第一链的序列如SEQIDNO：2所示。具体为5’-GAAGCUCAUUGCAUCUGUU-3’。进一步的，所述双链RNA为小干扰RNA(siRNA)。SEQIDNO：2为以SEQIDNO:1所示的序列为RNA干扰靶序列设计的、针对人EXOSC2基因的小干扰RNA的一条链，另一条链即第二链的序列与第一链序列互补，该siRNA可以起到特异性沉默结直肠癌细胞中内源EXOSC2基因表达的作用。所述shRNA包括正义链片段和反义链片段，以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环结构，所述正义链片段和所述反义链片段的序列互补，并且所述正义链片段的序列与EXOSC2基因中的靶序列基本相同。进一步的，所述shRNA的靶序列如SEQIDNO：1所示。所述shRNA经酶切加工后可成为小干扰RNA(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人EXOSC2基因作为靶标在制备结直肠癌治疗药物中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.人EXOSC2基因作为靶标在制备结直肠癌治疗药物中的用途。


2.EXOSC2抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：
治疗结直肠癌；
抑制结直肠癌细胞的增殖能力；
促进结直肠癌细胞凋亡；
抑制结直肠癌细胞克隆；
抑制结直肠癌细胞侵袭转移。


3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)所述EXOSC2抑制剂是指对EXOSC2具有抑制效果的分子；
2)所述EXOSC2抑制剂为产品的唯一有效成分或有效成分之一；
3)所述EXOSC2抑制剂选自双链RNA、shRNA、抗体或小分子化合物。


4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)所述shRNA或双链RNA靶序列如SEQIDNO：1所示；
2)所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，所述第一链的序列如SEQIDNO：2所示；
3)所述shRNA的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示。


5.一种降低结直肠癌细胞中EXOSC2基因表达的核酸分子，所述核酸分子包含：
a.双链RNA，所述双链RNA中含有能够与EXOSC2基因杂交的核苷酸序列；或者
b.shRNA，所述shRNA中含有能够与EXOSC2基因杂交的核苷酸序列；
其中，所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列与EXOSC2基因中的靶序列基本相...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐蔚，宋程，潘博，蒋益兰，付剑锋，曾瀚，罗星，
申请(专利权)人：唐蔚，
类型：发明
国别省市：湖南;43