【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合NKG2D、CD16和肿瘤相关抗原的蛋白质与相关申请的交叉引用本申请要求2017年9月7日提交的美国临时专利申请号62/555,110和2017年10月2日提交的美国临时专利申请号62/566,824的利益和优先权，每个所述临时申请的全部公开内容为所有目的整体通过引用并入本文。序列表本申请含有以ASCII格式电子提交并整体通过引用并入本文的序列表。所述在2018年9月6日生成的ASCII拷贝被命名为DFY-038WO_SL.txt，大小为321,395字节。
本专利技术涉及结合到NKG2D、CD16和肿瘤相关抗原的多特异性结合蛋白。
技术介绍
尽管在文献中已报道了治疗癌症的大量研究尝试和科学进展，但这种疾病依然是显著的健康问题。一些最频繁被诊断到的癌症包括前列腺癌、乳腺癌、肺癌和结肠直肠癌。前列腺癌是男性中最常见的癌症形式。乳腺癌仍然是女性中主导的死亡原因。血液和骨髓癌症、包括多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤，也是频繁被诊断到的癌症类型。当前用于这些癌症的治疗选项不对所有患者有效和/或可能具有...
【技术保护点】
1.一种蛋白质，其包含：/n(a)结合自然杀伤细胞表面激活性受体2族成员D(NKG2D)的第一抗原结合位点；/n(b)结合选自下述的抗原的第二抗原结合位点：EpCAM，癌抗原125(CA125)、钠/磷酸盐共转运蛋白2B(NaPi2b)、结合素细胞粘附分子4(结合素4)、岩藻糖基-GM1(单唾液酰四己糖基神经节苷脂)、含去整合蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白8(ADAM8)、含去整合蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白9(ADAM9)、溶质载体家族44成员4(SLC44A4)和唾液酸化路易斯a抗原(CA19-9)；和/n(c)抗体Fc结构域或其足以结合分化抗原簇16(CD16)的部分，或结...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170907 US 62/555,110;20171002 US 62/566,8241.一种蛋白质，其包含：
(a)结合自然杀伤细胞表面激活性受体2族成员D(NKG2D)的第一抗原结合位点；
(b)结合选自下述的抗原的第二抗原结合位点：EpCAM，癌抗原125(CA125)、钠/磷酸盐共转运蛋白2B(NaPi2b)、结合素细胞粘附分子4(结合素4)、岩藻糖基-GM1(单唾液酰四己糖基神经节苷脂)、含去整合蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白8(ADAM8)、含去整合蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白9(ADAM9)、溶质载体家族44成员4(SLC44A4)和唾液酸化路易斯a抗原(CA19-9)；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合分化抗原簇16(CD16)的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
2.一种蛋白质，其包含：
(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；
(b)结合EpCAM的第二抗原结合位点；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
3.一种蛋白质，其包含：
(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；
(b)结合选自下述的肿瘤相关抗原的第二抗原结合位点：癌抗原125(CA125)、钠/磷酸盐共转运蛋白2B(NaPi2b)，结合素细胞粘附分子4(结合素4)，岩藻糖基-GM1(单唾液酰四己糖基神经节苷脂)、含去整合蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白8(ADAM8)、含去整合蛋白和金属蛋白酶结构域蛋白9(ADAM9)、溶质载体家族44成员4(SLC44A4)和唾液酸化路易斯a抗原(CA19-9)；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
4.一种蛋白质，其包含：
(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；
(b)结合选自钠依赖性磷酸盐转运蛋白2b(NaPi2b)的肿瘤相关抗原的第二抗原结合位点；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
5.一种蛋白质，其包含：
(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；
(b)结合肿瘤相关抗原结合素4的第二抗原结合位点；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
6.一种蛋白质，其包含：
(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；
(b)结合多发性骨髓瘤相关抗原岩藻糖基-GM1的第二抗原结合位点；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
7.一种蛋白质，其包含：
(a)结合NKG2D的第一抗原结合位点；
(b)结合选自SLC44A4的T-细胞相关肿瘤抗原的第二抗原结合位点；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
8.权利要求1-7中任一项所述的蛋白质，其中所述第一抗原结合位点结合到人类、非人类灵长动物和啮齿动物中的NKG2D。
9.权利要求1-8中任一项所述的蛋白质，其中所述第一抗原结合位点包含重链可变结构域和轻链可变结构域。
10.根据权利要求9所述的蛋白质，其中所述重链可变结构域和轻链可变结构域存在于同一多肽上。
11.根据权利要求9或10所述的蛋白质，其中所述第二抗原结合位点包含重链可变结构域和轻链可变结构域。
12.根据权利要求11所述的蛋白质，其中所述第二抗原结合位点的重链可变结构域和轻链可变结构域存在于同一多肽上。
13.根据权利要求11或12所述的蛋白质，其中所述第一抗原结合位点的轻链可变结构域具有与所述第二抗原结合位点的轻链可变结构域的氨基酸序列相同的氨基酸序列。
14.一种蛋白质，其包含：
(a)第一抗原结合位点，其包含结合NKG2D的Fab片段；
(b)第二抗原结合位点，其包含结合EpCAM的单链可变片段(scFv)；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
15.权利要求14所述的蛋白质，其中所述scFv通过包含Ala-Ser或Gly-Ala-Ser的铰链连接到所述抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分或所述结合CD16的第三抗原结合位点，其中所述scFv包含重链可变结构域和轻链可变结构域。
16.权利要求15所述的蛋白质，其中所述scFv被连接到所述抗体Fc结构域。
17.权利要求14或15所述的蛋白质，其中所述scFv的重链可变结构域与所述scFv的轻链可变结构域形成二硫桥。
18.权利要求17所述的蛋白质，其中所述二硫桥在来自于所述重链可变结构域的C44与来自于所述轻链可变结构域的C100之间形成。
19.权利要求18所述的蛋白质，其中所述scFv被连接到所述抗体Fc结构域，其中所述scFv的轻链可变结构域位于所述scFv的重链可变结构域的N-端处，并且通过柔性连接物(GlyGlyGlyGlySer)4((G4S)4)连接到所述scFv的重链可变结构域，并且所述Fab被连接到所述抗体Fc结构域。
20.根据权利要求15-19中任一项所述的蛋白质，其中所述scFv的重链可变结构域通过柔性连接物连接到所述scFv的轻链可变结构域。
21.权利要求20所述的蛋白质，其中所述柔性连接物包含(GlyGlyGlyGlySer)4((G4S)4)。
22.根据权利要求15-21中任一项所述的蛋白质，其中所述scFv的重链可变结构域位于所述scFv的轻链可变结构域的N-端或C-端处。
23.权利要求22所述的蛋白质，其中所述scFv的轻链可变结构域位于所述scFv的重链可变结构域的N-端处。
24.根据权利要求14至23中任一项所述的蛋白质，其中所述Fab片段被连接到所述抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分或所述结合CD16的第三抗原结合位点。
25.权利要求24所述的蛋白质，其中所述Fab片段的重链部分包含重链可变结构域和CH1结构域，并且其中所述重链可变结构域被连接到所述CH1结构域。
26.根据权利要求24或25所述的蛋白质，其中所述Fab片段被连接到所述抗体Fc结构域。
27.根据权利要求14至26中任一项所述的蛋白质，其包含选自SEQIDNO：208和SEQIDNO：209的序列。
28.根据权利要求15-27中任一项所述的蛋白质，其包含连接到抗体Fc结构域的scFv，其中所述连接到抗体Fc结构域的scFv由选自SEQIDNO：210和SEQIDNO：211的序列表示。
29.根据权利要求15-27中任一项所述的蛋白质，其包含选自SEQIDNO：212和SEQIDNO：213的序列。
30.根据权利要求15-26中任一项所述的蛋白质，其包含与选自SEQIDNO：210和SEQIDNO：211的氨基酸序列至少90％同一性的序列。
31.根据权利要求15-26中任一项所述的蛋白质，其包含与选自SEQIDNO：210和SEQIDNO：211的氨基酸序列至少95％同一性的序列。
32.根据权利要求15-26中任一项所述的蛋白质，其包含与选自SEQIDNO：210和SEQIDNO：211的氨基酸序列至少99％同一性的序列。
33.根据权利要求15-32中任一项所述的蛋白质，其包含与选自SEQIDNO：212和SEQIDNO：213的氨基酸序列至少90％同一性的序列。
34.根据权利要求15-32中任一项所述的蛋白质，其包含与选自SEQIDNO：212和SEQIDNO：213的氨基酸序列至少95％同一性的序列。
35.根据权利要求15-32中任一项所述的蛋白质，其包含与选自SEQIDNO：212和SEQIDNO：213的氨基酸序列至少99％同一性的序列。
36.一种蛋白质，其包含：
(a)包含结合NKG2D的单链可变片段(scFv)的第一抗原结合位点；
(b)结合EpCAM的第二抗原结合位点；和
(c)抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分，或结合CD16的第三抗原结合位点。
37.根据权利要求36所述的蛋白质，其还包含结合EpCAM的另外的抗原结合位点。
38.根据权利要求36或37所述的蛋白质，其中所述结合EpCAM的第二抗原结合位点是Fab片段。
39.根据权利要求37或38所述的蛋白质，其中所述结合EpCAM的第二和另外的抗原结合位点是Fab片段。
40.根据权利要求36或37所述的蛋白质，其中所述结合EpCAM的第二和另外的抗原结合位点是scFv。
41.根据权利要求36-40中任一项所述的蛋白质，其中所述结合NKG2D的scFv的重链可变结构域位于所述scFv的轻链可变结构域的N-端或C-端处。
42.根据权利要求41所述的蛋白质，其中所述轻链可变结构域位于所述结合NKG2D的scFv的重链可变结构域的N-端处。
43.根据权利要求36-42中任一项所述的蛋白质，其中所述结合到NKG2D的scFv被连接到所述抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分或结合CD16的第三抗原结合位点。
44.根据权利要求43所述的蛋白质，其中所述结合到NKG2D的scFv通过包含Ala-Ser或Gly-Ala-Ser的铰链连接到所述抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分或结合CD16的第三抗原结合位点。
45.根据权利要求43所述的蛋白质，其中所述结合到NKG2D的scFv通过包含SGSGGGGS(SEQIDNO：207)的柔性连接物连接到所述抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分或结合CD16的第三抗原结合位点的C-端。
46.根据权利要求45所述的蛋白质，其中所述抗体Fc结构域的C-端被连接到所述结合NKG2D的scFv的轻链可变结构域的N-端。
47.根据权利要求36-46中任一项所述的蛋白质，其中在所述结合NKG2D的scFv内，二硫桥在所述scFv的重链可变结构域与所述scFv的轻链可变结构域之间形成。
48.根据权利要求47所述的蛋白质，其中所述二硫桥在来自于所述重链可变结构域的C44与来自于所述轻链可变结构域的C100之间形成。
49.根据权利要求36-48中任一项所述的蛋白质，其中在所述结合NKG2D的scFv内，所述重链可变结构域通过柔性连接物连接到所述轻链可变结构域。
50.根据权利要求49所述的蛋白质，其中所述柔性连接物包含(GlyGlyGlyGlySer)4((G4S)4)。
51.根据权利要求40至50中任一项所述的蛋白质，其中所述第二和另外的抗原结合位点scFv通过包含Ala-Ser的铰链连接到所述抗体Fc结构域或其足以结合CD16的部分或所述结合CD16的第三抗原结合位点。
52.根据权利要求40至51中任一项所述的蛋白质，其中所述第二和另外的抗原结合位点scFv通过包含Ala-Ser的铰链连接到所述抗体Fc结构域。
53.根据权利要求51或52所述的蛋白质，其中二硫桥在所述第二抗原结合位点和/或另外的抗原结合位点的重链可变结构域与轻链可变结构域之间形成。
54.根据权利要求53所述的蛋白质，其中所述二硫桥形成在来自于所述重链可变结构域的C44与来自于所述轻链可变结构域的C100之间。
55.根据权利要求36至54中任一项所述的蛋白质，其中所述结合NKG2D的scFv包含位于重链可变结构域的N-端处的轻链可变结构域，其中所述轻链可变结构域通过柔性连接物(GlyGlyGlyGlySer)4((G4S)4)连接到所述scFv的重链可变结构域，并且所述结合NKG2D的scFv通过包含Ala-Ser或Gly-Ala-Ser的铰链连接到所述抗体Fc结构域。...
【专利技术属性】
技术研发人员：格雷戈里·P·常，安·F·张，威廉·哈尼，布拉德利·M·伦德，比昂卡·普林茨，阿斯亚·格林贝格，
申请(专利权)人：蜻蜓疗法股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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