【技术实现步骤摘要】
一种人ApoE基因分型检测试剂盒
本专利技术涉及一种人类ApoE基因分型检测的引物探针组合物、试剂盒及应用，属于基因检测领域。
技术介绍
载脂蛋白E(ApolipoproteinE，ApoE)是一种由299个氨基酸组成的载脂蛋白，载脂蛋白E是一种富含精氨酸的碱性蛋白，是一种多功能糖蛋白，ApoE蛋白参与脂质的运输、储存及排泄，同时也参与神经系统的发育和损伤后的修复。人类高发的动脉粥样硬化和阿尔茨海默症均与ApoE蛋白参与的脂质代谢调节异常有关。研究表明，ApoE基因的多态性还与冠心病、高脂血症、脑梗塞的发生相关。载脂蛋白E的氨基酸序列由两个SNP决定，位于112位氨基酸的碱基(C.388T>C，Cys130Arg)和158位氨基酸的碱基(C.526C>T，Arg176Cys)。依据112和158位氨基酸的不同组合，形成三种ApoE，即E2、E3和E4，在人群占比分别为8％，78％，14％，其中ApoE3是野生型基因，E3的112、158位氨基酸分别是半胱氨酸和精氨酸，ApoE2、E4分别是突变型，E2在1...
【技术保护点】
1.一种人ApoE基因分型的特异性引物探针组合，所述组合包括ApoE2分型检测的引物探针组合、ApoE4分型检测的引物探针组合，具体的，ApoE2分型检测的引物探针组合包含：上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，探针核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；ApoE4分型检测的引物探针组合包含：上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示，探针核苷酸序列如SEQID NO:6所示。/n
【技术特征摘要】
1.一种人ApoE基因分型的特异性引物探针组合，所述组合包括ApoE2分型检测的引物探针组合、ApoE4分型检测的引物探针组合，具体的，ApoE2分型检测的引物探针组合包含：上游引物核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，下游引物核苷酸序列如SEQIDNO:2所示，探针核苷酸序列如SEQIDNO:3所示；ApoE4分型检测的引物探针组合包含：上游引物核苷酸序列如SEQIDNO:4所示，下游引物核苷酸序列如SEQIDNO:5所示，探针核苷酸序列如SEQIDNO:6所示。
2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述的一种人ApoE基因分型的特异性引物探针组合还包括内参引物对和内参探针，内参引物对核苷酸序列如SEQIDNO:7、SEQIDNO:8所示，内参探针核苷酸序列如SEQIDNO:9所示。
3.根据权利要求1或2所述的引物探针组合，其特征在于，所述的检测探针和内参探针5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团，所述荧光基团选自FAM、JOE、VIC、HEX中的一种，淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、TAMRA中的一种。
4.一种人ApoE基因分型检测的试剂盒，所述试剂盒包括如权利要求1-3任一所述的引物探针组合，以及PCR反应液，在所述反应体系中，引物及探针的浓度范围为0.01-1μmol/L，MgCl2终浓度选择1.5-2.0mM，等浓度的四种脱氧三磷酸腺苷(dNTPs)混合液终浓度为100-120nM，热启动DNA聚合酶浓度为1-2U/反应。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中PCR反应体系如下表所示：
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【专利技术属性】
技术研发人员：曾亚平，赖楚明，
申请(专利权)人：深圳市天大生物医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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