稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2细胞株及其构建方法技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，尤其涉及稳定表达AMPA受体的GluR1/GluR2细胞株及其构建方法。本发明专利技术所述的构建方法制得稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2的细胞株。本方案采用逆转录病毒介导基因表达，外加潮霉素B筛选2周，得到稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2的细胞株。AMPA受体GluR1/GluR2稳转细胞株进行6次传代后，该细胞株中GluR1与GluR2仍稳定表达且两者存在相互作用。该细胞株可在疾病如脑卒中等疾病中AMPA受体功能的解析及探针开发提供基础研究材料及实验工具及载体。

Stable expression of AMPA receptor GluR1 / GluR2 cell line and its construction method

【技术实现步骤摘要】
稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2细胞株及其构建方法
本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及稳定表达AMPA受体的GluR1/GluR2细胞株及其构建方法。
技术介绍
AMPA受体(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionicacidreceptor,α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体，AMPAR)，是配体门控通道离子型受体，在中枢神经系统中调节快速兴奋性突触后传递。大脑海马区域AMPAR的数目、定位以及AMPAR亚基的不同功能结构、不同胞内-C端相互作用蛋白等在LTP和LTD过程中起着不同作用，从而介导以LTP和LTD机制为基础的人类学习、记忆以及认知活动。此外，异常的AMPAR运输以及过度激活与许多神经退行性疾病有关。调控AMPAR的运输已成为成瘾(Addiction)和阿尔兹海默病(Alzheimerdisease,AD)等精神疾病的潜在靶标。最近的研究表明，Aβ诱导的突触缺陷和记忆障碍可以通过内吞作用丧失AMPA和NMDA受体来解释。同时，Aβ寡聚体造成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2的细胞株的构建方法，其包括：/n构建含有GluR1基因CDS序列和信号肽A的pQCXIH载体，为载体A；/n构建含有GluR2基因CDS序列和信号肽B的pQCXIH载体，为载体B；/n分别以逆转录病毒包装载体A和载体B，获得假病毒A、假病毒B；/n以所述假病毒A和假病毒B侵染宿主细胞后，经潮霉素B筛选得到稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2的细胞株。/n

【技术特征摘要】
1.稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2的细胞株的构建方法，其包括：
构建含有GluR1基因CDS序列和信号肽A的pQCXIH载体，为载体A；
构建含有GluR2基因CDS序列和信号肽B的pQCXIH载体，为载体B；
分别以逆转录病毒包装载体A和载体B，获得假病毒A、假病毒B；
以所述假病毒A和假病毒B侵染宿主细胞后，经潮霉素B筛选得到稳定表达AMPA受体GluR1/GluR2的细胞株。


2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，
所述GluR1基因CDS序列如SEQIDNO:1所示；
信号肽A的序列如SEQIDNO:3所示；
所述GluR2基因CDS序列如SEQIDNO:2所示；
信号肽B的序列如SEQIDNO:4所示。


3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，
所述载体A中还包括Flag标签；所述载体B中...

【专利技术属性】
技术研发人员：涂海军，
申请(专利权)人：湖南大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44