【技术实现步骤摘要】
一种广谱的烈性噬藻体Me-ZS1及其应用
本专利技术涉及一种广谱烈性噬藻体,尤其是涉及一种广谱烈性噬藻体及其应用。
技术介绍
随着经济的高速发展,水体污染、富营养化日益严重,“水华”频繁爆发,其中蓝藻是引起水华暴发的主要藻类。“水华”能引起水体溶解氧量下降,水质恶化,释放难闻的气味,释放藻毒素,引起鱼类及其他生物的大量死亡等一系列问题。蓝藻毒素不仅会导致水生动植物的大量死亡,还能够抑制真核生物的蛋白磷酸酶2A的活性从而引起肝癌等。“水华”是当今世界最严重的环境灾害之一,严重危害水域生态系统、威胁饮用水安全。目前控制藻类水华的技术可分为化学法、机械清除法、营养控制法、水动力学控制法以及生物控制法等几类。在这几种方法中,物理法和化学法最为常用。物理法虽控藻见效快,但是需要耗费大量的人力物力。化学法主要是通过化学药剂来控制藻类,其缺点是化学药剂在水体中会造成污染。生物控制法经济环保,具有巨大的应用前景。在生物控藻法中,由于微生物易于繁殖的特点,使其成为生物控藻里最有前途的控藻方式。噬藻体(Cyanophage)属于浮游病毒 ...
【技术保护点】
1.一种广谱的烈性噬藻体Me-ZS1,该噬藻体于2018年11月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.16812。/n
【技术特征摘要】
1.一种广谱的烈性噬藻体Me-ZS1,该噬藻体于2018年11月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.16812。
2.根据权利要求1所述的一种广谱的烈性噬藻体Me-ZS1,该噬藻体具有如下生物学特征:噬藻体是以华美微囊藻FACHB-916为靶标分离获得的,命名为Me-ZS1。
3.根据权利要求1所述的一种广谱的烈性噬藻体Me-ZS1,该噬藻体具有如下生物学特征:噬藻体Me-ZS1具有呈二十面体的头部结构和细长的尾部,头部直径约60nm,尾部长约260nm;噬藻体Me-ZS1在藻平板上可以形成大小形状均一的、透明的噬藻斑,噬藻斑周围无晕环,边缘清晰规则。
4.一种根据权利要求1所述的广谱的烈性噬藻体Me-ZS1的制备方法,其特征包括:水样采自浙江省宁波市宁波大学曹光彪科技楼附近池塘,其位于Northlatitude:29.9108051933;Eastlongitude:121.6313112778;靶标宿主藻为华美微囊藻FACHB-916;具体制备方法如下:
(1)靶标藻种的活化
取50μL华美微囊藻FACHB-916藻液,涂布到含1.5%琼脂的BG11培养基平板上,置于光照培养箱中培养15天;光照培养箱的设置参数是:温度25℃,光照强度为2000lx,光暗周期为12h∶12h;挑取单藻落至5mL新鲜BG11培养基中培养,每天手动摇藻3次,使其充分利用营养物质;至对数生长期后,以体积比1∶5的比例将藻液接种于新鲜BG11培养基中培养,如此逐步扩大培养便可得到纯净的藻液;
(2)噬藻体的富集、筛选
采集淡水表层水样,置冰盒内,并立即带回实验室处理;水样在4℃条件下10000g离心20分钟去除沉淀,上清依次经中速滤纸、0.45μm和0.22μm硝酸纤维素滤膜过滤;取3mL滤液加到6mL对数生长期的华美微囊藻FACHB-916中混匀、培养,设为实验组;同时,对照组用BG11培养基替换滤液,以相同比例加入到FACHB-916藻液中混匀、培养;与对照组相比,如果实验组中藻液变黄则初步判断采集的水样中可能含有噬藻体;通过肉眼和光学显微镜观察藻细胞数量骤减和破碎情况;将黄化的培养液经6000g离心20分钟,取上清,依次经0.45μm和0.22μm硝酸纤维素滤膜过滤;取3mL滤液加到6mL对数生长期的华美微囊藻FACHB-916藻液中混匀、培养,如此连续感染三代至保持稳定噬藻性,得到感染液;
(3)噬藻体的初步纯化
浓缩藻细胞:取160mL的对数生长期华美微囊藻FACHB-916,10000g离心20分钟,去掉上清,用7.2mLBG11培养基悬浮沉淀;
取步骤(2)获得的感染液,6000g离心20分钟,取上清依次经0.45μm和0.22μm硝酸纤维素滤膜过滤后,用BG11...
【专利技术属性】
技术研发人员:李登峰,孙智同,林威,严小军,童贻刚,秦伟南,许丽华,
申请(专利权)人:宁波大学,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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