人工活化的肽制造技术

描述了对某些毒性肽进行人工诱导的转化以生成那些肽的不同形式和原始肽的新型且可用的衍生物二者，这两者本身有用且可用作可用于制备其它重要化合物的新型化合物和新型稳定中间体。

Artificially activated peptide

【技术实现步骤摘要】
人工活化的肽本申请是申请日为2015年4月3日，申请号为201580029683.6，专利技术名称为“人工活化的毒性肽”的专利技术专利的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求于2014年4月4日提交的美国专利申请第61/975,147号的优先权，其全部内容通过引用并入本文。专利
本专利技术涉及提高天然和杂合生理活性肽的活性的化学方法和机械方法，所述肽例如与毒蜘蛛、蜗牛、软体动物及其它动物中发现的毒素相关或源自其中的肽毒素。序列表本申请整体并入题为“FAM_N_PRV_SEQ_LISTING_2015_04_03_ST25.txt”的序列表(106,014字节)，该序列表创建于2015年4月3日，并以电子形式随附提交。背景通常，采用高热和高压(例如由高压灭菌器产生的和用于灭菌的条件)来中和和灭活生物样品，例如真菌、细菌和病毒。通常蛋白质经这样的过程变性或甚至被破坏。通常，当生物体暴露于高温和高压时，它们不能生长或甚至存活，因为它们的蛋白质变性，生物体因此变得失活并死亡。随后的唯一生物过程是衰变。仅酸性条件有时可以产生类似的结果。将大多数活性肽(例如毒性蛋白质)暴露于低pH或酸性条件，肽变性并不再像天然肽或蛋白质那样起作用。高压灭菌器通常被医疗机构用来处理仪器、装置以使其安全和无菌地用于重复使用，并且高压灭菌器越来越多地用于处理生物污染的废物，以将其变成安全的中性无害废物用于处置。在此，我们报道了对某些毒性肽进行人工诱导的转化以生成那些肽的不同形式和原始肽的新型且可用的衍生物二者，这两者本身有用，且可用作可用于制备其它重要化合物的新型化合物和新型稳定的中间体。专利技术概述本专利技术有两部分。在第1部分中，我们描述了使用人工诱导的化学和机械方法来提高肽(包括毒性肽)的活性和毒性的方法，所述方法任选地以字母顺序包括以下步骤：a)将所述肽与水混合，以制备所述肽的液体或半液体形式的水溶液或水乳液，其中所述水溶液或水乳液含至少10％的水；b)测量所述肽在所述水溶液或水乳液中的pH；c)将所述溶液或乳液的pH调节至低于pH7.0。所述pH可以为约1.0至约6.5；约2.0至约6.0；约2.5至约5.5；约3.0至约5.0；约3.0至约4.0；或约3.2、3.4、3.5、3.6或3.8。在所述方法中，在所述pH调节后，将所述肽干燥为干粉或颗粒形式。可以使用强酸或弱酸进行所述pH调节；强酸的实例为任何下述酸：氯酸(HClO3)、盐酸(HCl)、氢溴酸(HBr)、氢碘酸(HI)、磷酸(H3PO4)、硫酸(H2SO4)、高氯酸(HClO4)和硝酸(HNO3)。弱酸的实例为乙酸和/或草酸。在所述pH调节期间，将所述水溶液或水乳液暴露于干热，即无蒸汽或压力或热、压力和蒸汽的温度升高。说明书中所述热及热和压力条件还可以与包括本文所述的干粉程序在内的任何程序一起使用。在肽为水溶液或乳液时通过将所述溶液或乳液的pH降低至低于7.0从所述肽中除去任何一个或更多个共价结合的2H+O或分子的方法。利用所述方法尤其好地起作用的肽是说明书或序列表中所述的肽，特别是SEQIDNO.119和SEQIDNO.121。除了所述方法，我们对肽的杀虫组合物和适于施用于待用所述肽处理的昆虫所在地的制剂进行了描述。除了所述方法和组合物，我们对毒性肽本身进行了描述，其中除去了任何一个或更多个共价结合的2H+O或分子，所述肽在水溶液或乳液中的pH降低至低于7.0。我们对提高肽的毒性和/或活性的方法进行了描述，所述方法包括以下步骤：a)将所述肽制备为纯的形式1肽或肽酸或含少于约10％的水的组合物，b)将所述形式1肽或肽酸置于可控室或加热平台中；c)将所述肽加热至期望的温度，有或无压力，有或无蒸汽；d)将所述加热的肽维持在期望的温度、压力和蒸汽下直至期望量的称为肽酸的形式1肽转化为称为肽内酯的形式2肽；所述可控室可维持温度为0至500℃，压力为大气压力至500psi。可以将所述肽加热至约如下温度；加热至至少约10℃，但不高于选自约200℃、300℃或至多400℃的最高温度。我们对如下方法进行了描述：其中将所述肽加热至至少选自约任何如下温度、温度范围或温度范围的组合的温度：10℃至20℃、20℃至30℃、30℃至40℃、40℃至50℃、50℃至60℃、60℃至70℃、70℃至80℃、80℃至90℃、90℃至100℃、100℃至110℃、110℃至120℃、120℃至130℃、130℃至140℃、140℃至150℃、150℃至160℃、160℃至170℃、170℃至180℃、180℃至190℃、190℃至200℃、200℃至210℃、210℃至220℃、220℃至230℃、230℃至240℃、240℃至250℃、250℃至260℃、260℃至270℃、270℃至280℃、280℃至290℃、290℃至300℃、300℃至400℃以及400℃至500℃；我们对如下方法进行了描述：将所述肽或肽酸暴露于任何如下压力或压力范围：a)约10psi至约40psi；b)约15psi至约35psi；c)约18psi至约25psi；d)约21psi。根据所选温度和压力将所述肽在所述所选温度和压力下维持如下时间段：a)约5分钟至约40分钟；b)约10分钟至约30分钟；c)约15分钟至约25分钟；d)约21分钟；可以使用如下条件，应将所述肽维持在如下温度和压力和时间：a)约100℃至约140℃；约10psi至约40psi的压力；约5分钟至约40分钟；b)约110℃至约130℃；约15psi至约35psi的压力；约10分钟至约30分钟；c)约115℃至约125℃；约18psi至约25psi的压力；约15分钟至约25分钟；d)约121℃；约21psi的压力；约20分钟。在压力不高于大气压力的情况下，所述温度选自至少50℃至60℃或更高的温度。在一些情况下，使用如下温度、温度范围或温度范围的组合：50℃至60℃、60℃至70℃、70℃至80℃、80℃至90℃、90℃至100℃、100℃至110℃、110℃至120℃、120℃至130℃、130℃至140℃、140℃至150℃、150℃至160℃、160℃至170℃、170℃至180℃、180℃至190℃、190℃至200℃、200℃至210℃、210℃至220℃、220℃至230℃、230℃至240℃、240℃至250℃、250℃至260℃、260℃至270℃、270℃至280℃、280℃至290℃、290℃至300℃、300℃至400℃以及400℃至500℃。该方法可使用如下温度和时间，其中将所述肽：a)加热并在高于约100℃的温度下维持至少约1小时；b)加热并在约80℃至约120℃的温度下维持至少约2小时；c)加热并在约50℃至约80℃的温度下维持至少约3小时。或者，可以将所述肽a)加热并在高于约180℃的温度和至少约5psi的压力下维持至少约5分钟；b)加热并在高于约100℃的温度和至少约10psi的压力下维持至少约10分钟；c)加热并在高于约80℃至约120℃的温度和至少约10psi的压本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肽酰肼，其通过包括以下的方法产生：将具有SEQ ID NO: 1-171中任一个所示的氨基酸序列或其变体的肽的肽内酯形式与肼混合；并且其中肽内酯从肽内酯形式转化为肽酰肼形式。/n

【技术特征摘要】
20140404 US 61/975,1471.一种肽酰肼，其通过包括以下的方法产生：将具有SEQIDNO:1-171中任一个所示的氨基酸序列或其变体的肽的肽内酯形式与肼混合；并且其中肽内酯从肽内酯形式转化为肽酰肼形式。


2.权利要求1所述的肽酰肼，其中根据以下步骤将肽内酯形式转化为肽酰肼形式：
a)在水中制备肽内酯形式；
b)加入肼单水合物；和
c)搅拌。


3.权利要求1所述的肽酰肼，其中所述肽内酯形式是通过包括以下的方法从肽酸形式转化而来的：
a)在含有少于约10％水的水溶液或水乳液中制备所述肽酸；和
b)在有或无压力下，或者在有或无蒸汽下，将肽酸加热至期望的温度；直至期望量的肽酸转化为肽内酯；
其中期望的温度为约10℃至约500℃；并且其中压力是环境大气压，或高于环境大气压约10psi至约40psi。


4.权利要求3所述的肽酰肼，其中将肽酸形式转化为肽内酯形式的方法导致从肽内酯形式中除去共价结合的2H+O分子。


5.权利要求1所述的肽酰肼，其中所述肽具有与SEQIDNO:119或SEQIDNO:121所示的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。


6.通过将肽的肽酰肼形式转化为肽腙(II)形式而产生的肽腙(II)，所述转化包括以下步骤：
a)通过将酰肼肽形式与水和乙醇中的己醛混合，产生腙(II)混合物；
b)用己醛、乙酸和乙醇的溶液处理腙(II)混合物；和
c)在有或没有施加热的情况下，使腙(II)混合物孵育。


7.权利要求6所述的肽腙(II)，其中所述肽腙(II)具有SEQIDNO:119、SEQIDNO:121或其变体的氨基酸序列。


8.通过将肽的肽酰肼形式...

【专利技术属性】
技术研发人员：RM肯尼迪，鲍林，AR卡尔森，CL富恩，AM哈斯，BA施泰因鲍夫，
申请(专利权)人：韦斯塔隆公司，
类型：发明
国别省市：美国;US