用于有害生物防治的蛋白水解稳定的U1-漏斗网蛛毒素-Ta1b变体多肽制造技术

技术编号:37367649 阅读:12 留言:0更新日期:2023-04-27 07:13
新杀昆虫蛋白、核苷酸、肽及其在植物中的表达。产生新核苷酸和新肽的方法、新工艺、新生产技术、新制剂和新生物体。本公开还涉及并描述了称为TVP的新型肽,所述TVP是基于来源于流浪蜘蛛的U1

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于有害生物防治的蛋白水解稳定的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b变体多肽
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年4月20日提交的美国临时申请序列号63/012,755的权益和优先权,该临时申请的公开内容全文以引用方式并入本文。
[0003]序列
[0004]本申请以引用方式全文并入标题为“225312

490536_ST25.txt”(68KB)的序列表,该序列表在2021年4月20日下午6:39创建并以电子方式随此提交。


[0005]本专利技术描述并要求保护新的杀昆虫蛋白、核苷酸、肽、它们在植物中的表达、生产所述肽的方法、新的方法、生产技术、新的肽、新的制剂以及新的和已知的生物体的组合,该生物体产生比用于防治昆虫的相关肽所预期的产率更高的产率。

技术介绍

[0006]许多昆虫是疾病的载体。按蚊(Anopheles)属中的蚊子是寨卡病毒、基孔肯雅病毒和疟疾的主要载体,疟疾是由锥虫属(Trypanosoma)中的原生动物引起的疾病。埃及伊蚊(Aedes aegypti)是引起黄热病和登革热的病毒的主要载体。其他病毒,即各种类型脑炎的致病因子,也由伊蚊属种蚊子携带。引起丝虫病的寄生蛔虫

班氏吴策线虫(Wuchereria bancrofti)和马来布鲁线虫(Brugia malayi)通常由库蚊属(Culex)、曼蚊属(Mansonia)和按蚊属中的蚊子传播。
[0007]马蝇和鹿蝇可传播土拉菌病(土拉巴斯德氏菌(Pasteurella tularensis))和炭疽(炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis))的细菌病原体,以及在热带非洲引起罗阿丝虫病的寄生蛔虫(罗阿丝虫(Loa loa))。
[0008]潜蝇(Hippelates)属中的眼蚋可携带引起雅司病的螺旋体病原体(细弱螺旋体(Treponema pertenue)),并且还可传播结膜炎(红眼病)。舌蝇(Glossina)属中的采采蝇传播引起非洲昏睡病的原生动物病原体(冈比亚锥虫(Trypanosoma gambiense)和罗德西亚锥虫(T.rhodesiense))。白蛉(Phlebotomus)属中的白蛉是在南美洲引起卡里翁病(奥罗亚热(oroyo fever))的细菌(杆菌状巴尔通氏体(Bartonella bacilliformis))的载体。在亚洲和北非的部分地区,它们传播引起沙蝇热(白蛉热(pappataci fever))的病毒因子以及引起利什曼病的原生动物病原体(利什曼原虫属种(Leishmania spp.))。

技术实现思路

[0009]本公开提供了U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b变体多肽(TVP)、包含TVP的组合物,包含一种或多种TVP任选地与其他蛋白质的杀昆虫蛋白,以及它们用于根除、杀死、防治、抑制、伤害、扰乱一种或多种昆虫物种、致使其不育或它们的组合的方法。本文所述的TVP对一种或多种昆虫物种具有杀昆虫活性。本公开的TVP具有与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少
为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;或其互补核苷酸序列。
[0014]此外,本公开描述了一种产生TVP的方法,该方法包括:(a)制备包含第一表达盒的载体,该第一表达盒包含可操作以编码TVP的多核苷酸或其互补核苷酸序列,所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

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I

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X1‑
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A

A

C

E

A

E

C

F

X5‑
N

D

V

Y

Z1‑
A

C

H

E

A

Q

X6‑
X7,其中该多肽相对于如SEQ ID NO:1所示的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b的野生型序列包含至少一个氨基酸取代,并且其中X1为A、S或N;X2为R、Q、N、A、G、N、L、D、V、M、I、Q、C、E、T或S;X3为T或P;X4为K或A;X5为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;(b)将该载体引入宿主细胞中;以及(c)使宿主细胞在可操作以使TVP能够表达并分泌到生长培养基中的条件下在生长培养基中生长。
[0015]此外,本公开描述了一种使用上述组合物防治昆虫的方法,其包括向昆虫的所在部位提供组合物。
[0016]此外,本公开描述了一种保护植物免受昆虫侵害的方法,其包括提供表达TVP或编码其的多核苷酸的植物。
[0017]此外,本公开描述了一种对抗、防治或抑制有害生物的方法,其包括将杀有害生物有效量的上述组合物施用于该有害生物的所在部位,或施用于易受该有害生物攻击的植物或动物。
[0018]此外,本公开描述了一种包含可操作以编码TVP的多核苷酸的载体,该TVP具有与如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的序列具有90%相似性的氨基酸序列。
[0019]此外,本公开描述了一种酵母菌株,其包含:包含可操作以编码TVP的多核苷酸的第一表达盒,所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

D

E

I

C

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X1‑
X2‑
M

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N

K

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‑本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种杀昆虫的U1‑
漏斗网蛛毒素

Ta1b变体多肽(TVP),所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

D

E

I

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R

X1‑
X2‑
M

X3‑
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A

C

E

A

E

C

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X5‑
N

D

V

Y

Z1‑
A

C

H

E

A

Q

X6‑
X7,其中所述多肽相对于如SEQ ID NO:1所示的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b的野生型序列包含至少一个氨基酸取代,并且其中X1为A、S或N;X2为R、Q、N、A、G、N、L、D、V、M、I、C、E、T或S;X3为T或P;X4为K或A;X5为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;或其药学上可接受的盐。2.如权利要求1所述的TVP,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代,或其药学上可接受的盐。3.如权利要求1所述的TVP,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7为甘氨酸,或其药学上可接受的盐。4.如权利要求1所述的TVP,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7不存在,或其药学上可接受的盐。5.如权利要求1所述的TVP,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X6和X7不存在,或其药学上可接受的盐。6.如权利要求1

5中任一项所述的TVP,其中所述TVP包含如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的氨基序列,或其药学上可接受的盐。7.如权利要求6所述的TVP,其中所述TVP由如SEQ ID NO:17

30、54

58或117

150中任一项所示的多核苷酸序列或其互补核苷酸序列编码。8.如权利要求1所述的TVP,其中所述TVP还包含两种或更多种TVP的均聚物或杂聚物,其中每种TVP的氨基酸序列相同或不同。9.如权利要求1所述的TVP,其中所述TVP是包含两种或更多种由可切割接头或不可切割接头分开的TVP的融合蛋白,并且其中每种TVP的氨基酸序列可相同或不同。10.如权利要求9所述的TVP,其中所述接头是可切割接头。11.如权利要求10所述的TVP,其中所述可切割接头在昆虫的肠道或血淋巴中可切割。12.如权利要求11所述的TVP,其中所述接头具有如SEQ IDNO:61

70中任一项所示的氨基酸序列。13.如权利要求1

12中任一项所述的TVP,其中如果Z1为T或S,则所述TVP是糖基化的。14.一种组合物,所述组合物由TVP和一种或多种赋形剂组成;其中所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

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I

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X1‑
X2‑
M

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A

A

C

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A

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C

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X5‑
N

D

V

Y

Z1‑
A

C

H

E

A

Q

X6‑
X7,其中所述多肽相对于如SEQ ID NO:1所示的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b的野生型序列包含至少一个氨基酸取代,并且其中X1为A、S或N;X2为R、Q、N、A、G、N、L、D、V、M、I、C、E、T或S;X3为T或P;X4为K或A;X5为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;或其药学上可接受的盐;并且其中所述一种或多种赋形剂选自由以下项组成的组:海藻糖、麦芽糊精、麦芽糖、磷酸氢二钾(K2HPO4)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、木质素磺酸盐、石膏、山梨醇、苯甲酸钠、山梨酸钾、EDTA、苯并异噻唑啉酮(BIT)和发酵固体。15.如权利要求14所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸
取代,或其药学上可接受的盐。16.如权利要求14所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7为甘氨酸,或其药学上可接受的盐。17.如权利要求14所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7不存在,或其药学上可接受的盐。18.如权利要求14所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X6和X7不存在,或其药学上可接受的盐。19.如权利要求14

18中任一项所述的组合物,其中所述TVP包含如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的氨基序列。20.如权利要求19所述的组合物,其中所述TVP由如SEQ IDNO:17

30、54

58或117

150中任一项所示的多核苷酸序列或其互补核苷酸序列编码。21.如权利要求14所述的组合物,其中所述TVP还包含两种或更多种TVP的均聚物或杂聚物,其中每种TVP的氨基酸序列相同或不同。22.如权利要求14所述的组合物,其中所述TVP是包含两种或更多种由可切割接头或不可切割接头分开的TVP的融合蛋白,并且其中每种TVP的氨基酸序列可相同或不同。23.如权利要求22所述的TVP,其中所述接头是可切割接头。24.如权利要求23所述的TVP,其中所述可切割接头在昆虫的肠道或血淋巴中可切割。25.如权利要求24所述的TVP,其中所述接头具有如SEQ IDNO:61

70中任一项所示的氨基酸序列。26.如权利要求14

25中任一项所述的组合物,其中如果Z1为T或S,则所述TVP是糖基化的。27.如权利要求14

26中任一项所述的组合物,其中所述一种或多种赋形剂选自由以下项组成的组:海藻糖、麦芽糊精、无水磷酸氢二钾(K2HPO4)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、BIT和发酵固体。28.如权利要求27所述的组合物,其中以所述组合物的总重量计,所述TVP的范围为约2%至约16%w/w;并且其中海藻糖的范围为约5%至约40%w/w;BIT的范围为约0.01%至约0.1%w/w;麦芽糊精的范围为约10%至约50%w/w;无水磷酸氢二钾(K2HPO4)的范围为约1%至约5%w/w;和磷酸二氢钾(KH2PO4)的范围为约0.10%至约1%w/w;以及发酵固体的范围为约15%至约40%w/w。29.如权利要求28所述的组合物,其中以所述组合物的总重量计,所述TVP的范围为约7%至约9%w/w;并且其中海藻糖的范围为约20%至约30%w/w;BIT的范围为约0.025%至约0.075%w/w;麦芽糊精的范围为约30%至约40%w/w;无水磷酸氢二钾(K2HPO4)的范围为约2%至约3%w/w;磷酸二氢钾(KH2PO4)的范围为约0.2%至约0.6%;以及发酵固体的范围为约20%至约30%。30.如权利要求29所述的组合物,其中以所述组合物的总重量计,所述TVP为约8.5%w/w;并且其中海藻糖为约25%w/w;BIT为约0.05%w/w;麦芽糊精为约36.3%w/w;无水磷酸氢二钾(K2HPO4)为约2.6%w/w;磷酸二氢钾(KH2PO4)为约0.4%w/w;以及发酵固体为约26.85%w/w。31.如权利要求14所述的组合物,其中所述组合物基本上由以下组成:以所述组合物的
总重量计,量为8.5%w/w的TVP;量为25%w/w的海藻糖;量为0.05%w/w的BIT;量为36.3%w/w的麦芽糊精;量为2.6%w/w的无水磷酸氢二钾(K2HPO4);量为0.4%w/w的磷酸二氢钾(KH2PO4);和量为26.85%w/w的发酵固体。32.如权利要求14所述的组合物,其中所述组合物由以下组成:以所述组合物的总重量计,量为8.5%w/w的TVP;量为25%w/w的海藻糖;量为0.05%w/w的BIT;量为36.3%w/w的麦芽糊精;量为2.6%w/w的无水磷酸氢二钾(K2HPO4);量为0.4%w/w的磷酸二氢钾(KH2PO4);和量为26.85%w/w的发酵固体。33.一种组合物,所述组合物由TVP和多种赋形剂组成;其中所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

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N

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A

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A

E

C

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X5‑
N

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Y

Z1‑
A

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A

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X6‑
X7,其中所述多肽相对于如SEQ ID NO:1所示的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b的野生型序列包含至少一个氨基酸取代,并且其中X1为A、S或N;X2为R、Q、N、A、G、N、L、D、V、M、I、C、E、T或S;X3为T或P;X4为K或A;X5为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;或其药学上可接受的盐;其中所述组合物由以所述组合物的总重量计量为8.5%w/w的TVP组成;并且其中所述多种赋形剂由以下组成:以所述组合物的总重量计,量为25%w/w的海藻糖;量为0.05%w/w的BIT;量为36.3%w/w的麦芽糊精;量为2.6%w/w的无水磷酸氢二钾(K2HPO4);量为0.4%w/w的磷酸二氢钾(KH2PO4);和量为26.85%w/w的发酵固体。34.如权利要求33所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代,或其药学上可接受的盐。35.如权利要求33所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7为甘氨酸,或其药学上可接受的盐。36.如权利要求33所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7不存在,或其药学上可接受的盐。37.如权利要求33所述的组合物,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X6和X7不存在,或其药学上可接受的盐。38.如权利要求33

37中任一项所述的组合物,其中所述TVP包含如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的氨基序列。39.如权利要求38所述的组合物,其中所述TVP由如SEQ IDNO:17

30、54

58或117

150中任一项所示的多核苷酸序列或其互补核苷酸序列编码。40.如权利要求33所述的组合物,其中所述TVP还包含两种或更多种TVP的均聚物或杂聚物,其中每种TVP的氨基酸序列相同或不同。41.如权利要求33所述的组合物,其中所述TVP是包含两种或更多种由可切割或不可切割接头分开的TVP的融合蛋白,并且其中每种TVP的氨基酸序列可相同或不同。42.如权利要求41所述的组合物,其中所述接头是可切割接头。43.如权利要求42所述的组合物,其中所述可切割接头在昆虫的肠道或血淋巴中可切割。44.如权利要求43所述的组合物,其中所述接头具有如SEQ IDNO:61

70中任一项所示的氨基酸序列。
45.如权利要求33

44中任一项所述的组合物,其中如果Z1为T或S,则所述TVP是糖基化的。46.一种编码TVP的多核苷酸,所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

D

E

I

C

R

X1‑
X2‑
M

X3‑
N

K

E

F

T

Y

X4‑
S

N

V

C

N

N

C

G

D

Q

V

A

A

C

E

A

E

C

F

X5‑
N

D

V

Y

Z1‑
A

C

H

E

A

Q

X6‑
X7,其中所述TVP相对于如SEQ ID NO:1所示的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b的野生型序列包含至少一个氨基酸取代,并且其中X1为A、S或N;X2为R、Q、N、A、G、N、L、D、V、M、I、C、E、T或S;X3为T或P;X4为K或A;X5为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;或其互补核苷酸序列。47.如权利要求46所述的多核苷酸,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代。48.如权利要求46所述的多核苷酸,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7为甘氨酸。49.如权利要求46所述的多核苷酸,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7不存在。50.如权利要求46所述的多核苷酸,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X6和X7不存在。51.如权利要求46

50中任一项所述的多核苷酸,其中所述TVP包含如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的氨基序列。52.如权利要求46

51中任一项所述的多核苷酸,其中所述多核苷酸序列具有如SEQ ID NO:17

30、54

58或117

150中任一项所示的序列或其互补核苷酸序列。53.如权利要求46

53中任一项所述的多核苷酸,其中如果Z1为T或S,则所述TVP是糖基化的。54.一种产生TVP的方法,所述方法包括:(a)制备包含第一表达盒的载体,所述第一表达盒包含可操作以编码TVP的多核苷酸或其互补核苷酸序列,所述TVP包含与根据以下式(I)的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列:E

P

D

E

I

C

R

X1‑
X2‑
M

X3‑
N

K

E

F

T

Y

X4‑
S

N

V

C

N

N

C

G

D

Q

V

A

A

C

E

A

E

C

F

X5‑
N

D

V

Y

Z1‑
A

C

H

E

A

Q

X6‑
X7,其中所述多肽相对于如SEQ ID NO:1所示的U1

漏斗网蛛毒素

Ta1b的野生型序列包含至少一个氨基酸取代,并且其中X1为A、S或N;X2为R、Q、N、A、G、N、L、D、V、M、I、C、E、T或S;X3为T或P;X4为K或A;X5为R或A;Z1为T、S、A、F、P、Y、K、W、H、A、G、N、L、V、M、I、Q、C、E或R;X6为K或不存在;并且X7为G或不存在;(b)将所述载体引入宿主细胞中;以及(c)使所述宿主细胞在可操作以使所述TVP能够表达并分泌到生长培养基中的条件下在所述生长培养基中生长。55.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代。56.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X7为甘氨酸。57.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取
代;并且其中X7不存在。58.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP具有在X1、X2、X3、X4或X5处的一个氨基酸取代;并且其中X6和X7不存在。59.如权利要求54

58中任一项所述的方法,其中所述TVP包含如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的氨基序列。60.如权利要求59所述的方法,其中所述TVP由如SEQ ID NO:17

30、54

58或117

150中任一项所示的多核苷酸序列或其互补核苷酸序列编码。61.如权利要求60所述的方法,其中所述载体是包含α

MF信号的质粒。62.如权利要求61所述的方法,其中所述α

MF信号可操作以表达α

MF信号肽。63.如权利要求62所述的方法,其中所述载体被转化到宿主细胞中。64.如权利要求63所述的方法,其中所述宿主细胞是真核细胞或原核细胞。65.如权利要求64所述的方法,其中所述真核细胞是酵母细胞。66.如权利要求65所述的方法,其中所述酵母细胞选自属于以下属的任何种:酵母属、毕赤酵母属、克鲁维酵母属、汉逊酵母属、耶氏酵母属或裂殖酵母属。67.如权利要求66所述的方法,其中所述酵母细胞选自由以下项组成的组:乳酸克鲁维酵母、马克斯克鲁维酵母、酿酒酵母和巴斯德毕赤酵母。68.如权利要求67所述的方法,其中所述酵母细胞是乳酸克鲁维酵母或马克斯克鲁维酵母。69.如权利要求68所述的方法,其中所述酵母细胞是乳酸克鲁维酵母。70.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP分泌到所述生长培养基中。71.如权利要求70所述的方法,其中所述TVP与所述α

MF信号肽可操作地连接。72.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP的表达提供以下产率:每升酵母培养基至少70mg/L、至少80mg/L、至少90mg/L、至少100mg/L、至少110mg/L、至少120mg/L、至少130mg/L、至少140mg/L、至少150mg/L、至少160mg/L、至少170mg/L、至少180mg/L、至少190mg/L 200mg/L、至少500mg/L、至少750mg/L、至少1,000mg/L、至少1,250mg/L、至少1,500mg/L、至少1,750mg/L、至少2,000mg/L、至少2,500mg/L、至少3,000mg/L、至少3,500mg/L、至少4,000mg/L、至少4,500mg/L、至少5,000mg/L、至少5,500mg/L、至少6,000mg/L、至少6,500mg/L、至少7,000mg/L、至少7,500mg/L、至少8,000mg/L、至少8,500mg/L、至少9,000mg/L、至少9,500mg/L、至少10,000mg/L、至少11,000mg/L、至少12,000mg/L、至少12,500mg/L、至少13,000mg/L、至少14,000mg/L、至少15,000mg/L、至少16,000mg/L、至少17,000mg/L、至少17,500mg/L、至少18,000mg/L、至少19,000mg/L、至少20,000mg/L、至少25,000mg/L、至少30,000mg/L、至少40,000mg/L、至少50,000mg/L、至少60,000mg/L、至少70,000mg/L、至少80,000mg/L、至少90,000mg/L或至少100,000mg/L的TVP。73.如权利要求71所述的方法,其中所述TVP的表达提供每升培养基至少100mg/L TVP的产率。74.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP在所述培养基中的表达导致单个TVP在所述培养基中的表达。75.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP在所述培养基中的表达导致包含两种或更多种TVP多肽的TVP融合聚合物在所述培养基中的表达。
76.如权利要求54所述的方法,其中所述载体包含两个或三个表达盒,每个表达盒可操作以编码所述第一表达盒的所述TVP。77.如权利要求54所述的方法,其中所述载体包含两个或三个表达盒,每个表达盒可操作以编码所述第一表达盒的所述TVP或不同表达盒的TVP。78.如权利要求54所述的方法,其中所述第一表达盒可操作以编码如SEQ ID NO:2

15、49

53或77

110中任一项所示的TVP。79.如权利要求54所述的方法,其中所述TVP由如SEQ ID NO:17

30、54

58或117

150中任一项所示的多核苷酸序列或其互补核苷酸序列编码。80.如权利要求54

79中任一项所述的方法,其中如果Z1为T或S,则所述TVP是糖基化的。81.一种使用如权利要求14所述的组合物防治昆虫的方法,所述方法包括向昆虫的所在地提供如权利要求14所述的组合物。82.如权利要求81所述的方法,其中所述昆虫选自由以下项组成的组:葡萄蔓天蛾(天蛾幼虫)(欧罗巴天蛾);苜蓿粉蝶(纹黄豆粉蝶);粉斑螟(粉斑螟);白条卷叶蛾(白条卷叶蛾);夜盜蛾(夜蛾属种,例如甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、海灰翅夜蛾、一星粘虫);洋蓟羽蛾(洋蓟羽蛾);杜鹃毛虫(杜鹃毛虫);蓑蛾(常绿树蓑蛾);香蕉灯蛾(香蕉灯蛾);黃斑蕉弄蝶(尖翅蕉弄蝶);黑头芽虫(西部黑头长翅卷蛾);加州橡木虫(加州槲蛾);春尺蠖(春尺蠖);樱桃果虫(樱桃小食心虫);塘水螟(塘水螟);柑橘夜蛾(柑橘夜蛾);苹果蠹蛾(苹果蠹蛾);越橘果虫(越橘蜂斑螟);交叉条纹卷心菜蠕虫(卷心菜薄翅野螟);切根虫(夜蛾属种,小地老虎);黄杉毒蛾(黄杉毒蛾);天蛾(天蛾幼虫)(木薯天蛾);白尺蠖蛾(白尺蠖蛾);欧洲葡萄蛾(葡萄花翅小蛾);欧洲弄蝶(无斑豹弄蝶(埃塞克斯弄蝶));美国白蛾(美国白蛾);榛卷蛾(蔷薇黄卷蛾);果树黄卷蛾(果树黄卷蛾);葡萄浆果小卷叶蛾(葡萄浆果小卷叶蛾);葡萄卷叶蛾(葡萄卷叶蛾);黑拟蛉蛾(黑拟蛉蛾)(仅地面);苜蓿绿夜蛾(苜蓿绿夜蛾);绿条纹枫树蛾(绿条纹枫树蛾);流胶病

蛙蛾;Comosae(Hodges);舞毒蛾(舞毒蛾);铁杉尺蠖(铁杉尺蠖);天蛾幼虫(天蛾属种);菜粉蝶(菜粉蝶);玉米天蚕蛾(玉米天蚕蛾);短叶松芽卷叶蛾(短叶松芽卷叶蛾);苹浅褐卷蛾(苹浅褐卷蛾);瓜虫(甜瓜绢野螟);合欢巢蛾(合欢巢蛾);斜纹卷叶虫(玫瑰色卷蛾);夹竹桃蛾(黄蜂飞蛾);杂食卷叶蛾(荷兰石竹小卷蛾);杂食尺蠖(杂食尺蠖);桔凤蝶(美洲大芷凤蝶);桔带卷蛾(桔带卷蛾);梨小食心虫(梨小食心虫);桃蚜蛾(桃枝麦蛾);松蝴蝶(美洲松粉蝶);美洲棉铃虫(美洲棉铃虫);红带卷叶蛾(红带卷叶蛾);红疣天社蛾(红疣天社蛾);瓜皮虫群(各种鳞翅目);鞍背毛虫(鞍背刺蛾);鞍斑美洲舟蛾(鞍斑美洲舟蛾);盐泽灯蛾(盐泽灯蛾);草皮网螟(草螟属种);尺蠖(白尺蠖蛾);秋星尺蠖(秋星尺蠖);云杉卷叶蛾(云杉卷叶蛾);天幕毛虫(各种枯叶蛾科);菠萝褐灰蝶(Geyr)(菠萝褐灰蝶);烟草天蛾(烟草天蛾);烟草粉斑蛾(烟草粉斑蛾);苹果丛生芽卷蛾(苹果芽小卷蛾);桃蚜蛾(桃枝麦蛾);豆杂色夜蛾(疆夜蛾);杂色卷叶蛾(杂色卷叶蛾);黎豆夜蛾(黎豆夜蛾);胡桃毛虫(胡桃毛虫);结网虫(美国白蛾幼虫);西部栎柳毒蛾(西部栎柳毒蛾);南方玉米螟(南方玉米螟);玉米穗虫;甘薯小象甲;胡椒茎象甲;柑橘根象甲;草莓根象甲;山核桃象甲;榛象甲;稻水象甲;苜蓿叶象甲;三叶草象甲;茶枝小蠹虫;根象甲;甘庶犀金龟;咖啡果小蠹;一年生早熟禾象甲(一年生早熟禾象...

【专利技术属性】
技术研发人员:K
申请(专利权)人:韦斯塔隆公司
类型:发明
国别省市:

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