抗HER2/PD1双特异性抗体制造技术

本发明专利技术属于肿瘤治疗领域，公开了一种抗HER2/PD1双特异性抗体、制备方法和在抗肿瘤中的应用。具体地，单链可变片段scFv和免疫球蛋白抗体IgG通过肽接头连接获得双特异性抗体，该双特异性抗体能靶向肿瘤细胞表面分子HER2和T淋巴细胞表面分子PD1。实验结果显示，本发明专利技术提供的双特异性抗体都能抑制肿瘤细胞生长，并激活T淋巴细胞，促进T细胞对肿瘤细胞的杀伤。

Anti HER2 / PD1 bispecific antibody

【技术实现步骤摘要】
抗HER2/PD1双特异性抗体
本专利技术属于肿瘤治疗和生物
，涉及一种抗HER2和PD1的双特异性抗体分子制备方法和用途。
技术介绍
HER2(humanepidermalgrowthfactorreceptor2)，具有受体酪氨酸蛋白激酶活性，是人表皮生长因子受体家族成员之一，只在成年人的少数正常组织中呈低水平表达。但研究表明，HER2在多种肿瘤中过表达，如在约30％的乳腺癌患者和16％的胃癌患者中均存在过度表达情况，HER2在肿瘤中的过表达可以显著促进肿瘤血管的新生、肿瘤的生长，并增强肿瘤的侵袭和转移能力，是这类患者预后较差的重要指征。因此，早在1998年，第一个靶向于HER2的单克隆抗体药物Herceptin(Genentech/Roche)被FDA批准上市，并用于HER2过表达的乳腺癌和胃癌的治疗。人程序性细胞死亡受体-1(PD1)是由288个氨基酸组成的I型膜蛋白，胞外段为负责结合配体的Ig可变型(V-型)结构域，胞内段为负责结合信号转导分子的胞质尾区。PD1胞质尾区含有两个基于酪氨酸的信号转导模体，分别为ITIM(免本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种能与HER2和PD1特异结合的双特异性抗体，其特征在于，其包含免疫球蛋白抗体IgG和两个相同的单链可变片段scFv，其中每个scFv包含可变区VH和可变区VL，VH与VL通过肽接头L1连接，每个scFv通过接头肽L2与IgG串联。/n

【技术特征摘要】
1.一种能与HER2和PD1特异结合的双特异性抗体，其特征在于，其包含免疫球蛋白抗体IgG和两个相同的单链可变片段scFv，其中每个scFv包含可变区VH和可变区VL，VH与VL通过肽接头L1连接，每个scFv通过接头肽L2与IgG串联。


2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述VH包含互补决定区HCDR1-3，其中HCDR1的氨基酸序列为SEQIDNO：1，HCDR2的氨基酸序列为SEQIDNO：2，HCDR3的氨基酸序列为SEQIDNO：3；
所述VL包含互补决定区LCDR1-3，其中LCDR4的氨基酸序列为SEQIDNO：4，LCDR5的氨基酸序列为SEQIDNO：5，LCDR6的氨基酸序列为SEQIDNO：6；
所述IgG的重链包含互补决定区HCDR4-6，其中HCDR4的氨基酸序列为SEQIDNO：7，其中HCDR5的氨基酸序列为SEQIDNO：8，其中HCDR6的氨基酸序列为SEQIDNO：9；
所述IgG的轻链包含互补决定区LCDR4-6，其中LCDR4的氨基酸序列为SEQIDNO：10，其中LCDR5的氨基酸序列为SEQIDNO：11，其中LCDR6的氨基酸序列为SEQIDNO：12。


3.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，VH的氨基酸序列为SEQIDNO：13，VL的氨基酸序列为SEQIDNO：14；
所述IgG的重链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO：15，轻链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO：16。


4.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述肽接头L1的氨基酸序列为SEQIDNO：17。


5.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述肽接头L2的氨基酸序列为SEQIDNO：18。


6.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述单链可变片段scFv的分子结构形式为VL-L1-VH，每个scFv的N末端经由肽接头L2连接至IgG重链的C末端。


7.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述单链可变片段scFv的氨基酸序列为SEQIDNO：19。


8.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体的重链氨基酸序列为SEQIDNO：20，其轻链氨基酸序列为SEQIDNO：21。


9.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码如权利要求1-8任一所述的双特异性抗体。


10.如权利要求9所述的核苷酸分子，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱祯平，黄浩旻，顾昌玲，
申请(专利权)人：三生国健药业上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31