与xCT抗体相关的组合物和方法技术

一些实施方案涉及具有xCT特异性抗体的治疗组合物。

Composition and method related to XCT antibody

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与xCT抗体相关的组合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年5月1日提交的美国临时专利申请第62/492912号的优先权，其整体内容通过引用并入此文。
技术介绍
三阴性乳腺癌(TNBC)是一种侵袭性的乳腺癌，其缺乏雌激素、孕激素和HER2受体，且在美国占所有乳腺癌的15％至20％。TNBC比其他形式的乳腺癌具有更高的复发率和更差的预后，并且由于缺乏可靶向的表面受体，TNBC对激素和靶向HER2的疗法具有抵抗力。TNBC的特别具有侵略性的特征可能是由于癌症干细胞(CSC)的富集，癌症干细胞具有维持和扩散肿瘤所必需的独特生物学特性，并且通过不对称分裂可以分化为组成肿瘤块的癌细胞(Magee等人，CancerCell2012，21(3)：283-96)。由于它们对常规放射疗法和化学疗法具有抵抗力(Nagano等人，Oncogene2013，32(44)：5191-8)，CSC代表了治疗后疾病复发、转移性演变和疾病进展的蓄积库。因此，成功根除CSC代表了有效癌症治疗的主要障碍。CSC抵抗常见细胞毒性疗法的能力取决于不同的机制，包括改善的解毒能力。胱氨酸-谷氨酸逆转运蛋白xCT(SLC7A11)调节半胱氨酸的摄入、向半胱氨酸的转化以及随后的谷胱甘肽合成、通过p38MAPK途径保护细胞免受氧化和化学损伤(Chen等人，Oncogene2009，28(4)：599-609；Guo等人，CancerLett.2011，312(1)：55-61)。xCT的表达高度受限于少数几种正常细胞类型(神经元和巨噬细胞的子集)，但是在包括TNBC的大量侵袭性乳腺导管肿瘤中观察到xCT蛋白的水平升高(Lanzardo等人CancerRes.2016，76(1)：62-72)。高水平的xCTmRNA和蛋白与显著降低的无远端转移和总体生存率相关(Briggs等人，Cell2016，166(1)：126-39；Gyorffy等人，BreastCancerResTreat.2010，123(3)：725-31)。xCT在乳腺癌CSC(BCSC)和其他实体瘤干细胞中的表达上调，并且一些研究表明xCT与众所周知的干细胞标志物CD44发生物理相互作用(Nagano等人，Oncogene2013，32(44)：5191-8；Hasegawa等人，Oncotarget2016，7(11)：11756-69；Ishimoto等人，CancerCell2011，19(3)：387-400；Ju等人，MechanismsandTherapeuticImplications.Theranostics2016，6(8)：1160-75；Yoshikawa等人，CancerRes.2013，73(6)：1855-66)。多种CSC上xCT表达的频率表明，靶向xCT的疗法可能对包括胃肠道癌和胰腺癌的具有高干细胞频率的多种肿瘤有效。通过小分子柳氮磺胺吡啶(SASP)抑制xCT功能显示了xCT在乳腺癌转移中的直接作用，这导致动物模型中转移灶的显著减少和CSC频率的降低(Nagano等人，Oncogene2013，32(44)：5191-8；Chen等人，Oncogene2009，28(4)：599-609；Guan等人，CancerChemotherPharmacol.2009，64(3)：463-72；Timmerman等人，CancerCell2013，24(4)：450-65)。然而，SASP在生理条件下不稳定且不溶，具有巨大的脱靶效应、低的生物利用度，且需要高剂量才能在体内抑制xCT(Timmerman等人，CancerCell2013，24(4)：450-65；Shitara等人，GastricCancer2016；Linares等人，ExpertOpinDrugSaf.2011，10(2)：253-63；Robe等人，BMCCancer2009，9：372)。因此，需要开发专门针对xCT的新治疗方法以用于临床用途。
技术实现思路
一些实施方案涉及特异性结合xCT表位的治疗性抗体和单克隆抗体。一些方面涉及针对xCT肽和/或表位的单克隆抗体(MAB)，包括但不限于存在于胞外域(ECD)1、2、3、4、6或其各种组合中的肽或表位。在一些情况下，可以使用基于VLP的疫苗接种来制备MAB。展示各种xCT肽的此类VLP可用于诱导可用于制备MAB的表位特异性免疫应答。在一些方面，肽或表位定义为SPKGVLQNTG(SEQIDNO：2)、RPAATAVISLAFGRYILEPFFIQC(SEQIDNO：3)、MQLIKGQTQNFKDAFSGRDSSITR(SEQIDNO：4)、AYFTTINAEELLLSNAVAVTFSERLLGNFSL(SEQIDNO：5)、YSDPFS(SEQIDNO：6)、SPKGVLQNTGSVGMSLTIWT(SEQIDNO：7)、ILEPFFIQCEIPEL(SEQIDNO：8)、KGQTQNFKDAFSGRDSSITRLP(SEQIDNO：9)、YFTTINAEELLLSNAVAVTFSERLLG(SEQIDNO：10)、GDLDSLLN(SEQIDNO：11)和LYSDPFST(SEQIDNO：12)。其他实施方案涉及特异性结合具有SEQIDNO：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12中的3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个或多于12个连续的氨基酸的肽的抗体。本专利技术提供了特异性结合xCT或xCT的ECD的高亲和力抗体和抗体片段。如本文所使用的，术语抗体指本领域公认的全长、完整的抗体分子。在本申请的上下文中，术语片段指抗体的一部分，其保留以高亲和力和特异性结合xCT、xCT肽或xCT表位的能力。可以基于原始全域结构中包含的和/或从原始全域结构中排除的域数量来定义抗体片段。因此，片段可以表示可变重链(VH)或可变轻链(VL)或单链Fv(VH-VL)或Fab(VL-CL-VH-CH1)或Fab2(VL-CL-VH-CH1)2或与抗癌部分(例如，化学疗法或放射疗法)、小分子、PEG、其他蛋白结构域或标记剂连接的上述任何一种。这些片段的优选实例是单链抗体可变区片段(ScFv)。除非另有说明，否则本申请中使用的术语抗体通常指完整的抗体分子或片段。可以使用抗体或非抗体框架或支架上存在的互补决定区(CDR)的氨基酸序列对其他xCT结合部分进行工程改造。抗体优选是人抗体、人源化抗体、嵌合抗体或ScFv抗体或片段。还提供本专利技术的抗体和片段作为用于治疗用途的药物制剂。本专利技术还提供了编码本专利技术的xCT抗体的重组DNA分子和用于重组制备或生产抗体的表达系统。本专利技术的xCT结合剂(例如抗xCT抗体)可用于治疗xCT过表达的疾病，例如癌症。抗体可以通过在细胞表面的特异性高亲和力相互作用来诱导细胞凋亡，并通过抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)杀死细胞。一些实施方案涉及xCT抗体，其特异性结合由SEQIDNO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12的氨基酸序列限定的表位，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种xCT抗体，其特异性结合由氨基酸序列SEQ ID NO：4定义的表位。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170501 US 62/492,9121.一种xCT抗体，其特异性结合由氨基酸序列SEQIDNO：4定义的表位。


2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述xCT抗体的重链包含具有氨基酸序列SEQIDNO：15的CDR1、具有氨基酸序列SEQIDNO：16的CDR2和具有氨基酸序列SEQIDNO：17的CDR3。


3.根据权利要求1所述的抗体，其中所述xCT抗体的轻链包含具有氨基酸序列SEQIDNO：20的CDR1、具有氨基酸序列SEQIDNO：21的CDR2和具有氨基酸序列SEQIDNO：22的CDR3。


4.根据权利要求1所述的抗体，其中所述xCT抗体包含重链和轻链，所述重链包含具有氨基酸序列SEQIDNO：15的CDR1、具有氨基酸序列SEQIDNO：16的CDR2和具有氨基酸序列SEQIDNO：17的CDR3；所述轻链包含具有氨基酸序列SEQIDNO：20的CDR1、具有氨基酸序列SEQIDNO：21的CDR2和具有氨基酸序列SEQIDNO：22的CDR3。


5.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体或抗体片段是人源化的。


6.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体或抗体片段是嵌合的。
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【专利技术属性】
技术研发人员：费德丽卡·佩里克莱，约翰·奥罗克，费德丽卡·卡瓦洛，
申请(专利权)人：阿吉尔瓦克斯公司，
类型：发明
国别省市：美国;US