参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法技术

本发明专利技术公开参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，包括以下步骤：色谱条件与系统适用性试验；对照品溶液；供试品溶液的制备；测定。本发明专利技术经方法学验证试验，准确度考察：加样回收率为103.7％，RSD为1.1％(n＝9)；精密度考察：重复性RSD为1.2％(n＝9)；阴性对照无干扰，该方法重现性好，操作简单，可以一次测出人参皂苷和三七总皂苷含量，一个项目可同时监测两种药材的质量情况。

Determination of total ginsenosides in Shentian capsule

【技术实现步骤摘要】
参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法
本专利技术涉及药物分析领域，主要涉及一种参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法。
技术介绍
心血管类疾病是极为常见的多发病，尤以冠心病最为多见。随着生活水平的提高、饮食结构的改善、人口老龄化的日趋明显，冠心病发病率也日渐攀升。据调查，冠心病发病率约占老龄患者发病率的50.47％，是老年人最常见的疾病，位居发病率第一位。据WHO报告，1997年世界上有超过1500万人死于心血管系统疾病，其中有720万死于冠心病。在未来的20～30年间，冠心病发病数量将会增多，约四个家庭中将会有一个心脑血管病人，并且发病年龄逐渐提前，严重地影响人们的健康和生活质量。因此，预防或治疗冠心病、心绞痛在当前具有相当重要的现实意义。目前，西医对冠心病、心绞痛等疾病以化学药物治疗为主，往往是治标不治本，而且副作用大，费用高昂。在2008年申请人研发了一种用于预防、保健和辅助治疗心血管类疾病的中药组合物，药品名为参田胶囊，是由人参888份，三七333份，陈皮111份组成。在本申请日以前，参田胶囊原标准为国家食品药品家督管理总局国家药品标准颁布件[批件号：(2014)国药标字ZB-0698号]所附标准，标准编号WS-5145(B-0145)-2014Z，其中关于含量的测定，只包含了陈皮含量的测定。当时，由于技术水平的限制，人参和三七含量测定项目存在阴性干扰，且皂苷类成分分离不佳，因此无法准确测定人参皂苷和三七总皂苷含量。该标准中由于人参皂苷和三七总皂苷在参田胶囊中具有十分重要的药理作用，对其含量进行测定具有十分重要的意义。因此，申请人为进一步完善参田胶囊的质量标准，一直研究如何一次性测人参和三七总皂苷含量，用一个项目监测两种药材的质量情况。
技术实现思路
鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，通过对人参和三七的高效液相色谱法的研究，得到了一种可以同时监测人参皂苷和三七总皂苷含量的测定方法，旨在完善现有参田胶囊质量标准，增订人参和三七总皂苷含量的测定。本专利技术的技术方案如下：参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，其中，包括以下步骤：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长为203nm；流速为1ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B；洗脱条件为0～35min，流动相A：流动相B＝19％：8％1；35～55min，流动相A：流动相B＝19％→81％→71％；55～70min，流动相A：流动相B＝29％：71％；70～100min，流动相A：流动相B＝29％→71％→60％；对照品溶液：每mL人参皂苷Rg1对照品溶液含人参皂苷Rg10.2mg，每mL人参皂苷Rb1对照品溶液含人参皂苷Rb10.2mg，每mL三七皂苷R1对照品溶液含三七皂苷R10.05mg，每mL人参皂苷Re对照品溶液含人参皂苷Re0.05mg；供试品溶液的制备：取参田胶囊内容物，研细，取约1g，精密称定，精密加入70％甲醇100mL，称定重量，超声提取20-40分钟，放冷，再称定重量，加70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的浓度。所述的测定方法，其中，超声提取设定为30分钟。所述的测定方法，其中，色谱柱的柱温设定为20～30℃。优选地，色谱柱的柱温设定为20℃或25℃。所述的测定方法，其中，对照品溶液制备包括以下步骤：取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、三七皂苷R1对照品及人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1各0.2mg，三七皂苷R1及人参皂苷Re各0.05mg的混合溶液。所述的测定方法，其中，三七皂苷R1的线性回归方程为：Y＝6254.708X-19030.20，r＝0.9999，n＝7；人参皂苷Rg1的线性回归方程为：Y＝7165.74X+8393.933，r＝0.99998，n＝7；人参皂苷Re的线性回归方程为：Y＝5918.507X-4370.040，r＝0.9999，n＝7；人参皂苷Rb1的线性回归方程为：Y＝5267.325X-8858.497，r＝0.99997，n＝7。所述的测定方法，其中，色谱柱采用74号OMNIBONDHubbleC18、83号UltimateXB-C18或56号EcosilC18。有益效果：本专利技术经方法学验证试验，准确度考察：加样回收率为103.7％，RSD为1.1％(n＝9)；精密度考察：重复性RSD为1.2％(n＝9)；阴性对照无干扰，该方法重现性好，操作简单，本专利技术突出优点就在于一次测出人参皂苷和三七总皂苷含量，一个项目可以同时监测两种药材的质量情况。附图说明图1为人参、三七总皂苷专属性考察液相色谱图。图2为三七皂苷R1线性关系图表。图3为人参皂苷Rg1的线性关系图表。图4为人参皂苷Re的线性关系图表。图5为人参皂苷Rb1的线性关系图表。图6为不同色谱柱对分离效果的对比图。图7为20℃柱温时的色谱图。图8为25℃柱温时的色谱图。图9为30℃柱温时的色谱图。图10为采用流动相①时对照品、阴性溶液的色谱图。图11为采用流动相②对照品、阴性、供试品溶液的色谱图。图12为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1对照品光谱扫描图。具体实施方式本专利技术提供一种参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术提供一种参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，照高效液相色谱法(通则0512)测定，具体包括以下步骤：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长为203nm；流速为1ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B按下表1中的规定进行梯度洗脱；柱温可以为20～30℃；理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的分离度应大于1.8。表1洗脱条件时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)0～35198135～5519→2981→7155～70297170～10029→4071→60对照品溶液：每mL人参皂苷Rg1对照品溶液含人参皂苷Rg10.2mg，每mL人参皂苷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长为203nm；流速为1ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B；洗脱条件为0～35min，流动相A：流动相B＝19％：8％1；/n35～55min，流动相A：流动相B＝19％→81％→71％；/n55～70min，流动相A：流动相B＝29％：71％；/n70～100min，流动相A：流动相B＝29％→71％→60％；/n对照品溶液：每mL人参皂苷Rg1对照品溶液含人参皂苷Rg1 0.2mg，每mL人参皂苷Rb1对照品溶液含人参皂苷Rb1 0.2mg，每mL三七皂苷R1对照品溶液含三七皂苷R1 0.05mg，每mL人参皂苷Re对照品溶液含人参皂苷Re 0.05mg；/n供试品溶液的制备：取参田胶囊内容物，研细，取约1g，精密称定，精密加入70％甲醇100mL，称定重量，超声提取20-40分钟，放冷，再称定重量，加70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；/n测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的浓度。/n...

【技术特征摘要】
1.参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长为203nm；流速为1ml/min；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B；洗脱条件为0～35min，流动相A：流动相B＝19％：8％1；
35～55min，流动相A：流动相B＝19％→81％→71％；
55～70min，流动相A：流动相B＝29％：71％；
70～100min，流动相A：流动相B＝29％→71％→60％；
对照品溶液：每mL人参皂苷Rg1对照品溶液含人参皂苷Rg10.2mg，每mL人参皂苷Rb1对照品溶液含人参皂苷Rb10.2mg，每mL三七皂苷R1对照品溶液含三七皂苷R10.05mg，每mL人参皂苷Re对照品溶液含人参皂苷Re0.05mg；
供试品溶液的制备：取参田胶囊内容物，研细，取约1g，精密称定，精密加入70％甲醇100mL，称定重量，超声提取20-40分钟，放冷，再称定重量，加70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的浓度。


2.根据权利要求1所述的参田胶囊中人参和三七总皂苷含量的测定方法，其特征在于，超声提取设定为30分钟。


3.根据权利要求1所述的参田胶囊中人参和三七总皂...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖银桥，杜蔼媚，招嘉文，梁超铭，何惠欣，吴安，张誉晴，
申请(专利权)人：国药集团德众佛山药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44