一种同时检测血液样品中多种水溶性维生素的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种同时检测血液样品中多种水溶性维生素的方法，首先通过简单的提取方法对生物样本进行前处理，然后进入色谱分离及质谱检测，针对每种维生素分别选择一对定性离子和一对定量离子，以各种维生素的相对保留时间和定性离子对作为定性依据，以标准品制作标准曲线定量。同时，本方法应用三个水平的质控品考察方法的准确性、有效性，避免检测结果失真。本发明专利技术首次实现了应用LC‑MS技术对一份血清样本中的十三种水溶性维生素同时检测的目的，减小了干扰物影响，该方法操作简便快速分析时间仅10min，高通量、成本低，有效监测人体内水溶性维生素水平，对维生素的合理、安全补充具有指导意义，易于临床推广及普及。

A method for simultaneous determination of water soluble vitamins in blood samples and its application

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测血液样品中多种水溶性维生素的方法及其应用
本专利技术属于维生素分析检测领域，涉及一种同时检测血液样品中多种水溶性维生素的方法及其应用。
技术介绍
维生素，分为脂溶性和水溶性维生素两类，是维持人体生命活动必须的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质。维生素缺乏或过量均会导致营养性疾病的发生，维生素B1，维生素B2，维生素B3-烟酸，维生素B3-烟酰胺，维生素B5，维生素B6-吡哆胺，维生素B6-吡哆醛，维生素B6-吡哆醇，维生素B7，维生素B9，维生素B12，维生素B13和维生素C均属于水溶性维生素，人体十三种水溶维生素缺乏或过量时会表现出不同的症状：维生素B1缺乏会导致脚气病；厌食、腹胀、消化不良、便秘；心脏功能失调等；维生素B2缺乏会导致舌炎、口角炎；脂溢性皮炎；妊娠妇女缺铁性贫血等；维生素B3缺乏可产生糙皮病，表现为皮炎、舌炎、口咽、腹泻及烦躁、失眠感觉异常等症状等；维生素B5缺乏会导致痛风或风湿性关节炎；低血糖等；维生素B6缺乏会导致慢性炎症；神经兴奋性增强、烦躁不安、睡眠不安、全身性抽搐等；维生素B7缺乏会导致皮炎、湿本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血液水溶性维生素的检测方法，其特征在于，采用液质联用方法进行检测，包括以下步骤：/n一.溶液的制备/n供试品溶液制备：取血液样品加入到甲醇、乙腈溶液中，混匀离心，取上清后再加入水：甲醇，得供试品溶液；/n标准品溶液的制备：将各标准品用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成标准品母液，将各标准品母液液用乙腈/甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混合标准品溶液；/n内标溶液制备：将各内标用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成标准品母液，将各标准品母液液用乙腈/甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混内标溶液；/n二.测定/n将上述制备的供试品溶液、标准品和内标溶液进行LC-MS测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种血液水溶性维生素的检测方法，其特征在于，采用液质联用方法进行检测，包括以下步骤：
一.溶液的制备
供试品溶液制备：取血液样品加入到甲醇、乙腈溶液中，混匀离心，取上清后再加入水：甲醇，得供试品溶液；
标准品溶液的制备：将各标准品用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成标准品母液，将各标准品母液液用乙腈/甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混合标准品溶液；
内标溶液制备：将各内标用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成标准品母液，将各标准品母液液用乙腈/甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混内标溶液；
二.测定
将上述制备的供试品溶液、标准品和内标溶液进行LC-MS测定。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述血液样品为血液中血浆或血清样品。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中洗脱采用梯度方式洗脱，流动相A为10mM乙酸铵和0.01％甲酸混合的水溶液，流动相B为0.01％甲酸和10mM乙酸铵混合的乙腈溶液。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液制备的操作为：取样品200～300μL，加入甲醇：乙腈溶液800～900μL，混匀，离心，取上清氮气吹干后加入甲醇溶液得供试品溶液。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张召，刁嘉茵，雷春燕，肖妮，陈涛，
申请(专利权)人：广东南芯医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44