一种同时检测血液样品中多种脂溶性维生素的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种同时检测血液样品中多种脂溶性维生素的方法，先样品前处理，通过萃取对样本中的维生素进行提取，再色谱分离及质谱检测，针对每种维生素分别选择一对定性离子和一对定量离子，以各种维生素的相对保留时间和定性离子对作为定性依据，以标准品制作标准曲线定量。同时，本方法应用三个水平的质控品考察方法的准确性、有效性，避免检测结果失真。本发明专利技术首次实现了应用LC‑MS技术对一份血清样本中的六种脂溶性维生素同时检测的目的，减小了干扰物影响，该方法操作简便快速分析时间仅10min，高通量、成本低，有效监测人体内脂溶性维生素水平，对维生素的合理、安全补充具有指导意义，易于临床推广及普及。

A method for simultaneous determination of multiple fat soluble vitamins in blood samples and its application

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测血液样品中多种脂溶性维生素的方法及其应用
本专利技术属于维生素分析检测领域，涉及一种同时检测血液样品中多种脂溶性维生素的方法及其应用。
技术介绍
维生素，分为脂溶性和水溶性维生素两类，是维持人体生命活动必须的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质。维生素缺乏或过量均会导致营养性疾病的发生，维生素A、维生素25(0H)D2、维生素25(0H)D3、维生素E、维生素K1、维生素K2均属于脂溶性维生素，人体六种维生素缺乏或过量时会表现出不同的症状:维生素A缺乏会导致夜盲症、眼部炎症等，过量会恶心、头痛等、易激激动、乏力；维生素D缺乏会导致儿童佝偻病、成人骨质软化病、老人骨质疏松症等，过量会导致骨骼退化和钙化、食欲减退、恶心、呕吐；维生素E缺乏会导致新生儿溶血性贫血、神经系统疾病等，过量会导致恶心呕吐、头疼、血压升高、口角炎；维生素K缺乏会导致凝血功能障碍、血液凝固时间延长和出血等，过量则会损害肝功能、导致血红蛋白尿和溶血性贫血。现有技术中，常用的维生素检测方法主要包括毛细管电泳法、电化学分析法、高效液相色谱法、高效液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血液脂溶性维生素的检测方法，其特征在于，采用液质联用方法进行检测，包括以下步骤：/n一.溶液的制备/n供试品溶液制备：取样品加入到甲醇中，混匀离心，取上清后用正己烷萃取3～4次，收集上清液，氮气吹干，甲醇复溶得供试品溶液；/n标准品溶液的制备：将维生素A、维生素25(OH)D2、维生素25(OH)D3、维生素E和维生素K2标准品用甲醇溶解配制成标准品母液，将维生素K1用异丙醇溶解为标准品母液，将各标准品母液用甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混合标准品溶液；/n内标溶液制备：将维生素A、维生素25(OH)D2、维生素25(OH)D3、维生素E和维生素K2标准品用甲醇溶解配制...

【技术特征摘要】
1.一种血液脂溶性维生素的检测方法，其特征在于，采用液质联用方法进行检测，包括以下步骤：
一.溶液的制备
供试品溶液制备：取样品加入到甲醇中，混匀离心，取上清后用正己烷萃取3～4次，收集上清液，氮气吹干，甲醇复溶得供试品溶液；
标准品溶液的制备：将维生素A、维生素25(OH)D2、维生素25(OH)D3、维生素E和维生素K2标准品用甲醇溶解配制成标准品母液，将维生素K1用异丙醇溶解为标准品母液，将各标准品母液用甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混合标准品溶液；
内标溶液制备：将维生素A、维生素25(OH)D2、维生素25(OH)D3、维生素E和维生素K2标准品用甲醇溶解配制成标准品母液，将维生素K1用异丙醇溶解为标准品母液，将各标准品母液用甲醇进行稀释至同一容量瓶中，得到系列不同浓度的混内标溶液；
二.测定
将上述制备的供试品溶液、标准品和内标溶液进行LC-MS测定。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述血液样品为血浆或血清样品。


3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中洗脱采用梯度方式洗脱，流动相A为5mM甲酸铵和0.1％甲酸混合的乙腈溶液，流动相B为0.1％甲酸和5mM乙酸铵混合的甲醇溶液。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液制备的操作为：取样品200～300μL，加入甲醇溶液800～...

【专利技术属性】
技术研发人员：张召，刁嘉茵，雷春燕，肖妮，陈涛，
申请(专利权)人：广东南芯医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44