一种核壳结构的替拉扎明药物载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种核壳结构的替拉扎明药物载体及其制备方法和应用，属于药物制备技术领域。本发明专利技术透明质酸、二硫二乙酸、四氨基锌酞菁和左旋肉碱通过化学作用连接形成一种具有核壳结构的替拉扎明药物载体，其中四氨基锌酞菁‑左旋肉碱部分为核，透明质酸‑二硫二乙酸部分为壳，利用透明质酸和左旋肉碱改善四氨基锌酞菁具有的疏水性，形成具有亲水性、靶向细胞膜以及线粒体双靶向作用的载体胶束。将替拉扎明药物(TPZ)载入上述载体形成一种核壳结构的替拉扎明药物载药胶束，通过光动力治疗消耗氧气激活替拉扎明药物(TPZ)，实现光动力和化疗的协同疗法，避免了化疗的耐药性，以及细胞对光动力的抗性，在制备抗肿瘤药物中有着良好的应用前景。

A core-shell tirazamin drug carrier and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种核壳结构的替拉扎明药物载体及其制备方法和应用
本专利技术属于药物制备
，具体涉及一种核壳结构的替拉扎明药物载体及其制备方法和应用。
技术介绍
目前肿瘤仍然是威胁人类生命健康的重大疾病之一，光动力学作为一种治疗肿瘤的的治疗手段，能够利用光敏剂在特定激发波长下激发下产生ROS，杀死肿瘤细胞。但ROS在细胞内存在时间短，作用距离范围低，从而造成利用率低，通过线粒体靶向分子将光敏剂递送到线粒体，ROS直接损伤线粒体，可以有效增强光动力。于此同时，光动力作用会消耗氧气，造成细胞内低氧状态，从而激活前药替拉扎明的作用，使光动力和化疗同时发挥作用，增强肿瘤细胞的杀伤效果。因此需要制备一种具有靶向线粒体的替拉扎明载体。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的之一在于提供一种核壳结构的替拉扎明药物载体；本专利技术的目的之二在于提供一种核壳结构的替拉扎明药物载体的制备方法；本专利技术的目的之三在于提供一种核壳结构的替拉扎明药物载药胶束；本专利技术的目的之四在于提供一种核壳结构的替拉扎明药物载药胶束的制备方法；本专利技术的目的之五在于提供一种核壳结构的替拉扎明药物载药胶束在制备抗肿瘤药物中的应用。为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：1、一种核壳结构的替拉扎明药物载体，所述载体为透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱，其中四氨基锌酞菁-左旋肉碱部分为核，透明质酸-二硫二乙酸部分为壳；所述载体的结构式如下所示：其中n＝20。2、上述一种核壳结构的药物载体胶束的制备方法，所述方法包括以下步骤：(1)制备四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶：将2-乙酸二硫二吡啶加入到N,N-二甲基甲酰胺中溶解，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，冰浴条件下反应5～30min，撤去冰浴，继续反应活化30～60min，然后加入四氨基锌酞菁，在室温条件下反应24～36h，除去溶剂后用丙酮洗涤，得到四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶；(2)制备四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱：首先将步骤(1)中制备的四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶溶解在DMF和水的混合溶剂中形成四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶溶液，然后将左旋肉碱溶解在PBS中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，活化1～6h后加入到所述四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶溶液，反应12～48h后用水洗涤，得到四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱；(3)制备透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱：将透明质酸巯基溶解在PBS中，在冰浴条件在加入N,N-二甲基甲酰胺，混合均匀，继续加入所述四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱，超声溶解后在室温下搅拌反应12～48h，通过透析除去DMF后冻干，反复加入DMF进行超声、离心，得到透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱。优选的，步骤(1)中所述2-乙酸二硫二吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物、N-羟基琥珀酰亚胺和四氨基锌酞菁的摩尔体积比为0.03～0.06:5～20:0.078:0.078:0.156，mol:L:mol:mol:mol。进一步优选的，所述2-乙酸二硫二吡啶的制备方法如下：(1)首先将二硫二吡啶在乙醇、甲醇或二氯甲烷中的任意一种溶剂中充分溶解，加入冰醋酸进行震荡；然后逐滴加入3-巯基丙酸，在室温下反应12～48h，除去乙醇后用柱层析提取得到2-乙羧基二硫二吡啶，所述二硫二吡啶与3-巯基丙酸的摩尔比为2:0.5～1；(2)将所述2-乙羧基二硫二吡啶充分溶解在二氯甲烷和乙醇形成的混合溶剂中，真空抽取除去乙酸，再除去乙醇，所述二氯甲烷和乙醇的体积比为3:1～5；(3)重复步骤(2)的操作直至完全除去乙酸即可得到2-乙酸二硫二吡啶。进一步优选的，所述四氨基锌酞菁的制备方法如下：(1)制备四硝基锌酞菁：首先将尿素、4-硝基邻苯二甲酰亚胺和钼酸铵按照0.1665:0.02:0.000147的摩尔比混合后研磨，加热搅拌使其融化，然后加入醋酸锌后继续加热搅拌使其熔化，在160℃下反应至无气泡产生，冷却后用浓度为0.5～1.5mol/L的盐酸进行微沸处理1～5h，过滤并将固体洗涤至中性，继续用浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液微沸处理2h，过滤并洗涤值中性，重复洗涤直至得到蓝紫色固体即为四硝基锌酞菁，所述4-硝基邻苯二甲酰亚胺和醋酸锌的摩尔比为4:1；(2)制备四氨基锌酞菁：将所述四硝基锌酞菁与九水硫化钠按照1:12～30的摩尔比加入到DMF中，抽真空后充入氮气，缓慢搅拌下加热至60℃后，60℃恒温下加速搅拌1～5h后倒入水中混合均匀后抽滤，反复洗涤固体至洗涤液呈中性，将洗涤后的固体冻干即可得到四氨基锌酞菁。优选的，步骤(2)中所述混合溶剂中DMF和水的体积比为1:1～1.2，所述左旋肉碱、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺和四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶的质量比为8～20:22:14:100。优选的，步骤(3)中所述透明质酸巯基、PBS、DMF以及四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱的摩尔体积比为0.5:50:50:0.5，nmol:ml:ml:mmol，所述透析时采用的透析袋的分子量为10KD，所述离心时的转速为8000rpm。3、一种核壳结构的替拉扎明药物载药胶束，所述载药胶束中以上述载体为载体，所述替拉扎明药物为3-氨基-1,2,4－苯并三嗪-1,4-二氧化物。4、上述载药胶束的制备方法，所述方法包括如下步骤：(1)制备载体胶束：将所述载体透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱加入到等体积的PBS和THF的混合溶剂中，搅拌使其充分溶解，旋蒸除去THF后即可形成具有核壳结构的载体胶束；(2)制备替拉扎明药物：首先，按照0.1449:18，的摩尔体积比向50℃的邻硝基苯胺中缓慢滴加浓度为50％单氰胺溶液，滴加完成后升温至100℃，反应体系变为深红色后降至室温析出橘黄色固体，继续缓慢滴加12mol/L的浓盐酸15min，再升温至100℃至出现分层，搅拌30min后缓慢滴加16mol/L的NaOH溶液15min，继续升温至100℃反应直至出现粘状固体悬浮物，加水搅拌后冷却至室温，重结晶析出黄色固体，依次用水、乙酸乙酯反复洗涤，干燥得到黄色粉末即为3-氨基-1,2,4-苯并三嗪-1-氧化物的合成，所述邻硝基苯胺、50％单氰胺溶液、HCl和NaOH的摩尔体积比为：0.1449:18:18:18，mol:mL:mol:mol；然后，向所述3-氨基-1,2,4-苯并三嗪-1-氧化物(4.4g,0.03mol)中加入220mL冰醋酸，搅拌至出现悬浮液，升温到50℃后滴加107mL30％双氧水，避光条件下反应至溶液编程淡红色，除去溶剂后蒸干的到红色固体物质，重结晶得到红色晶体物质即为替本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核壳结构的替拉扎明药物载体，其特征在于，所述载体为透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱；所述载体为核壳结构，其中四氨基锌酞菁-左旋肉碱部分为核，透明质酸-二硫二乙酸部分为壳。/n

【技术特征摘要】
1.一种核壳结构的替拉扎明药物载体，其特征在于，所述载体为透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱；所述载体为核壳结构，其中四氨基锌酞菁-左旋肉碱部分为核，透明质酸-二硫二乙酸部分为壳。


2.权利要求1所述一种核壳结构的药物载体胶束的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)制备四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶：将2-乙酸二硫二吡啶加入到N,N-二甲基甲酰胺中溶解，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，冰浴条件下反应5～30min，撤去冰浴，继续反应活化30～60min，然后加入四氨基锌酞菁，在室温条件下反应24～36h，除去溶剂后用丙酮洗涤，得到四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶；
(2)制备四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱：首先将步骤(1)中制备的四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶溶解在DMF和水的混合溶剂中形成四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶溶液，然后将左旋肉碱溶解在PBS中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，活化1～6h后加入到所述四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶溶液，反应12～48h后用水洗涤，得到四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱；
(3)制备透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱：将透明质酸巯基溶解在PBS中，在冰浴条件在加入N,N-二甲基甲酰胺，混合均匀，继续加入所述四氨基锌酞菁-2-乙酸二硫二吡啶-左旋肉碱，超声溶解后在室温下搅拌反应12～48h，通过透析除去DMF后冻干，反复加入DMF进行超声、离心，得到透明质酸-二硫二乙酸-四氨基锌酞菁-左旋肉碱。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述2-乙酸二硫二吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物、N-羟基琥珀酰亚胺和四氨基锌酞菁的摩尔体积比为0.03～0.06:5～20:0.078:0.078:0.156，mol:L:mol:mol:mol。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述2-乙酸二硫二吡啶的制备方法如下：
(1)首先将二硫二吡啶在乙醇、甲醇或二氯甲烷中的任意一种溶剂中充分溶解，加入冰醋酸进行震荡；然后逐滴加入3-巯基丙酸，在室温下反应12～48h，除去乙醇后用柱层析提取得到2-乙羧基二硫二吡啶，所述二硫二吡啶与3-巯基丙酸的摩尔比为2:0.5～1；
(2)将所述2-乙羧基二硫二吡啶充分溶解在二氯甲烷和乙醇形成的混合溶剂中，真空抽取除去乙酸，再除去乙醇，所述二氯甲烷和乙醇的体积比为3:1～5；
(3)重复步骤(2)的操作直至完全除去乙酸即可得到2-乙酸二硫二吡啶。


5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述四氨基锌酞菁的制备方法如下：
(1)制备四硝基锌酞菁：首先将尿素、4-硝基邻苯二甲酰亚胺和钼酸铵按照0.1665:0.02:0.000147的摩尔比混合后研磨，加热搅拌使其融化，然后加入醋酸锌后继续加热搅拌使其熔化，在160℃下反应至无气泡产生，冷却后用浓度为0.5～1.5mol/L的盐酸进行微沸处理1～5h，过滤并将固体洗涤至中性，继续用浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液微沸处理2h，过滤并洗涤值中性，重复洗涤直至得到蓝紫色固体即为四硝基锌酞菁，所述4-硝基邻苯二甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗忠，李亚楠，侯彦华，李孟桓，胡燕，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50