一种基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱及其在筛选天然产物中活性组分的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱及其在筛选天然产物中活性组分的应用。所述的基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱的制备方法为：将载体硅胶高温干燥后与脂质体的乳化液在真空条件下旋转蒸发除去有机溶剂，用磷酸缓冲液洗涤除去游离脂质体和酶，真空条件下挥发除去残余有机溶剂和水，得到目标产物。本发明专利技术所述的基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱应用于筛选天然产物中的α‑葡萄糖苷酶抑制剂。本发明专利技术所述的基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱运用在药物筛选中，既可以研究药物与膜及受体之间的相互作用，又可以利用受体与目标成分的结合从复杂化合物中筛选有效成分，具有样品用量少，可重复利用，筛选精度高等优势，制备方法简单。

A liposome biofilm chromatographic column based on target protein and its application in the screening of active components in natural products

【技术实现步骤摘要】
一种基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱及其在筛选天然产物中活性组分的应用
本专利技术涉及一种基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱及其在筛选天然产物中活性组分的应用。
技术介绍
药物筛选是指利用适当的筛选方法和技术，建立合适的筛选模型，从可能作为药物使用的天然或合成化合物中得到高效的先导化合物，对其进行药理及药效活性的检测，药用价值的评估，评价某一化合物的药用前景的方法，是新药研发中缩短时间、减少成本、降低风险的关键步骤。如今的药物筛选方法主要包括整体动物水平筛选、细胞水平药物筛选、分子水平药物筛选，而由于动物水平筛选价格昂贵，病理部位和药物作用机制不明，细胞水平筛选技术要求较高，细胞易失活的缺点，分子水平药物筛选模型逐渐成为使用范围最广，技术最成熟的筛选方法之一。基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱筛选方法即为分子水平药物筛选的一种。色谱方法应用于α-葡萄糖苷酶活性成分筛选主要还包括细胞膜色谱法，脂质体色谱法，受体色谱法。受体色谱的受体蛋白固定化存在活性损失及蛋白流失的问题，细胞膜色谱的色谱柱寿命较短，其细胞膜蛋白易脱落或失去活性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱，其特征在于：基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱按照如下方法进行制备：/n①硅胶置于20％的盐酸(v/v)中回流6～10h后，用蒸馏水洗至中性，110～120℃下真空干燥，得到活化后的硅胶备用；/n②将大豆卵磷脂与胆固醇充分溶于氯仿中得到混合液；所述的大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为2～6:1；/n③取α-葡萄糖苷酶溶于去离子水中配置浓度为7万u/mLα-葡萄糖苷酶溶液，谷胱甘肽溶于去离子水中配置成1mg/mL谷胱甘肽溶液，向所述的α-葡萄糖苷酶溶液中加入谷胱甘肽溶液，再与步骤②所得混合液混合，超声震动形成乳浊液；所述的α-葡萄糖苷酶溶液与谷胱甘肽溶液、混合液...

【技术特征摘要】
1.一种基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱，其特征在于：基于靶点蛋白的脂质体生物膜色谱柱按照如下方法进行制备：
①硅胶置于20％的盐酸(v/v)中回流6～10h后，用蒸馏水洗至中性，110～120℃下真空干燥，得到活化后的硅胶备用；
②将大豆卵磷脂与胆固醇充分溶于氯仿中得到混合液；所述的大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为2～6:1；
③取α-葡萄糖苷酶溶于去离子水中配置浓度为7万u/mLα-葡萄糖苷酶溶液，谷胱甘肽溶于去离子水中配置成1mg/mL谷胱甘肽溶液，向所述的α-葡萄糖苷酶溶液中加入谷胱甘肽溶液，再与步骤②所得混合液混合，超声震动形成乳浊液；所述的α-葡萄糖苷酶溶液与谷胱甘肽溶液、混合液的体积比为1：1：1～20；
④将步骤①所得活化后的硅胶浸渍于步骤③所得乳浊液中，常温下减压旋转缓慢蒸发除去有机溶剂，硅胶表面即形成一层将α-葡萄糖苷酶包裹其中的磷脂膜；
⑤将步骤④...

【专利技术属性】
技术研发人员：单伟光，楼晓艺，郭倩，侯晓蓉，陈秋，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33