一种制备脱细胞生物组织材料的方法技术

本发明专利技术属于生物组织材料的技术领域，具体涉及一种制备脱细胞生物组织材料的方法。所述方法包括如下步骤：包括冻融处理、超高压处理和去核酸三道工序，其中超高压处理采用的压力为400‑600MPa。与现有技术相比，本发明专利技术提供的技术方案采用反复冻融与超高压结合的方法，可明显缩短工艺耗时，提高脱细胞效率，另外实验参数更温和，减少了对生物支架结构的破坏；本发明专利技术实施例中超高压处理采用的压力不会导致介质水出现临界冰现象，可以更好的保留组织结构的完整性和机械性能。

A method of preparing acellular biological tissue materials

【技术实现步骤摘要】
一种制备脱细胞生物组织材料的方法
本专利技术属于生物组织材料的
，具体涉及一种制备脱细胞生物组织材料的方法。
技术介绍
由于脱细胞生物组织材料具有低免疫源性、完整的纤维结构和良好的机械强度，因而在医疗器械领域得到了越来越多的关注和应用。目前，常用的脱细胞方法主要有物理法、酶消化法、酸碱法及化学去垢剂法等。然而，大量研究表明，以上几种方法存在很多问题：(1)物理法脱细胞效果较差，易导致细胞和DNA残留，引起机体免疫反应；(2)酶消化法对酶的浓度要求较高，高浓度的酶易导致胶原纤维组织受损，低浓度的酶则难以去除深层细胞，脱细胞效果差；(3)酸碱法中强酸强碱的环境对组织结构破坏较大；(4)化学去垢剂法不仅易破坏生物组织的胶原蛋白结构，残留的化学去垢剂还容易导致细胞毒性，且漂洗耗时长。因此，开发一种更简便、高效、安全的脱细胞方法将具有广泛的应用前景和重要的实用价值。2006年，上海交通大学医学院上海儿童医学中心的殷猛等首次报道了在生物材料制备领域采用超高压技术进行脱细胞操作。首先将组织置入浸满MillliQ水的塑料袋中，在超高压设备本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备脱细胞生物组织材料的方法，其特征在于，包括冻融处理、超高压处理和去核酸三道工序，其中超高压处理采用的压力为400-600MPa。/n

【技术特征摘要】
1.一种制备脱细胞生物组织材料的方法，其特征在于，包括冻融处理、超高压处理和去核酸三道工序，其中超高压处理采用的压力为400-600MPa。


2.根据权利要求1所述制备脱细胞生物组织材料的方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：
步骤一，将生物组织上的脂肪剥离并对所述生物组织进行修剪和清洗；
步骤二，冻融处理：将步骤一处理后的生物组织反复冻融多次；
步骤三，超高压处理：将步骤二处理后的生物组织清洗密封，置于超高压仪器内进行超高压处理；
步骤四，去核酸：将步骤三处理后的生物组织，用核酸酶去除细胞残余核酸组分；
步骤五，保存：将步骤四处理后的生物组织清洗后密封保存。


3.根据权利要求2所述制备脱细胞生物组织材料的方法，其特征在于，所述步骤一具体包括如下步骤：无菌磷酸盐缓冲液浸没无纺布，将生物组织在浸润的无纺布上铺开，剥去脂肪组织层，然后将生物组织的纤维层朝上，用无尘布去除生物组织表面脂肪并剪去游离纤维，然后将生物组织裁切成规则小片进行后续处理，最后用生理盐水在室温下清洗多次，每次清洗3～5分钟。


4.根据权利要求2所述制备脱细胞生物组织材料的方法，其特征在于，所述冻融单次过程如下：将生物组织置于4℃预冷10～20min、然后在-80℃±10℃冷冻1.5～2h，最后在37℃水浴复温15～20min。


5.根据权利要求2所述制备脱细胞生物组织材料的方法，其特征在于，所述步骤三具体包括如下步骤：在无菌D-Hanks溶液中清洗后置入浸满D-Hanks溶液的塑料袋...

【专利技术属性】
技术研发人员：何海红，尹宗明，赵婧，桂宝珠，陈国明，李雨，
申请(专利权)人：上海微创心通医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31