通过检测产品进行质谱法判别雷米普利个体化用药的方法技术

本发明专利技术提供一种利用不同单核苷酸多态性(SNP)位点具有不同分子量的延伸引物，从而通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Mass Array matrix‑assisted laser desorption ionisation‑time‑of‑flight mass spectrometry，MALDI‑TOF MS)同时检测多个位点，最终获得通过检测产品进行质谱法判别雷米普利个体化用药的方法，该方法包括：根据待测的多个目的SNP位点分别设计多重扩增引物和延伸引物；配制多重扩增引物反应体系和延伸引物反应体系；在反应体系中，用多套引物同时分别对多个目的SNP位点进行扩增和单碱基延伸反应；将单碱基延伸反应后的产物进行飞行时间质谱分析，根据质谱峰所代表的不同分子量延伸引物的产物，鉴定不同药物代谢相关SNP的基因型，指导降高血压药物雷米普利的个体化用药。本发明专利技术能同时检测2个雷米普利药物代谢相关的SNP位点，并具有成本低、无需合成探针、耗时短、结果分析简单便捷、应用领域极其广泛的优点。

Identification of ramipril by mass spectrometry

【技术实现步骤摘要】
通过检测产品进行质谱法判别雷米普利个体化用药的方法
本专利技术属于分子生物学检测领域，涉及一种利用质谱特征峰图检测多重PCR单碱基延伸产物的方法及其产品，该方法可以在两个多重PCR反应中同时检测多个PCR单碱基延伸扩增的寡核苷酸产物。更具体的说，该方法利用不同目的寡核苷酸片段在质谱分型过程中生成的不同的时间飞行质谱特征峰图，针对多个目的SNP位点同时进行检测，指导降高血压药物雷米普利的个体化用药。
技术介绍
人类的遗传信息储存在基因组中，2002年国际合作项目人类基因组计划的最终完成，绘制出了人类基因组结构的精细图，为相关研究提供了参考序列。人类基因组序列共由30亿个碱基组成，大量研究表明，人群中>1％的遗传差异大约占基因组序列的0.1％左右，即大约300万个碱基的差异，在人群中超过1％的变异频率。这些差异极有可能是造成两个人之间个体差异的遗传因素。发现这些位点，可广泛地应用于遗传标记的研究、评估个体遗传关系、评估物种进化等研究领域。在人类基因组中，约90％的差异是以单个核苷酸的形式体现出来的，这样的差异位点被称作单核苷酸多态性(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种通过检测产品进行质谱法判别雷米普利个体化用药的方法，其中所述检测产品通过特定引物组合物所制备，该引物组合包括针对能判别个体化用药型的2个SNP标记的PCR引物对和延伸引物，其中，PCR引物序列对选自如SEQ ID NO:1a-2a所示的序列，延伸引物序列选自如SEQ ID NO:1b-2b所示的序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种通过检测产品进行质谱法判别雷米普利个体化用药的方法，其中所述检测产品通过特定引物组合物所制备，该引物组合包括针对能判别个体化用药型的2个SNP标记的PCR引物对和延伸引物，其中，PCR引物序列对选自如SEQIDNO:1a-2a所示的序列，延伸引物序列选自如SEQIDNO:1b-2b所示的序列。


2.权利要求1所述的方法，其中该引物组合为1个独立进行的多重PCR反应引物组合物，并且所述序列如下所示：





3.权利要求2所述的方法，其中各位点对应的延伸引物及延伸产物分子量如下所示：





4.权利要求3所述的方法，其中上述PCR引物序列为核心序列，其在5'端可包括5-15个保护碱基序列，优选为10bp的tag：ACGTTGGATG。


5.权利要求3所述的方法，其中延伸引物5'端可增加作为接头的碱基序列，优选接头碱基序列为1-15个碱基，更优选为1-3个碱基。


6.权利要求1-5任一所述的检测方法，其中该检测产品还包括：
(1)用于PCR的反应试剂，包括：上述扩增引物对，耐高温的DNA聚合酶，dNTPs，PCR反应缓冲液；
(2)用于PCR产物纯化的试剂；
(...

【专利技术属性】
技术研发人员：马庆伟，钟逾，刘昕超，李大为，
申请(专利权)人：北京毅新博创生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11