抗硫酸化糖胺聚糖抗体制造技术

本发明专利技术提供可用于治疗包括弥漫性胃癌在内的胃癌等的新型免疫治疗剂。提供抗体，该抗体与硫酸化糖胺聚糖结合，具有细胞增殖抑制活性。本发明专利技术的抗体可用作细胞增殖抑制剂、用于药物递送的靶向化试剂和癌症的检测药。

Anti sulfated glycosaminoglycan antibody

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗硫酸化糖胺聚糖抗体
本专利技术涉及与硫酸化糖胺聚糖结合的抗体。本专利技术的抗体具有细胞增殖抑制活性，可用作细胞增殖抑制剂、用于药物递送的靶向化试剂和癌症的检测药。
技术介绍
已知糖胺聚糖是具有氨基糖和糖醛酸或半乳糖的二糖重复单元的长链多糖，存在于动物体内的各种组织中。糖胺聚糖根据构成糖的种类、硫酸基的有无/程度和部位、构成糖的结合方式等进行分类，作为主要类别，已知有透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、硫酸乙酰肝素和肝素。硫酸乙酰肝素糖胺聚糖是由各种程度地添加了硫酸基的二糖的重复结构构成的多糖类，典型的是，作为与称作核心蛋白的蛋白结合而成的蛋白聚糖而存在(非专利文献1)。肝素也与核心蛋白结合形成蛋白聚糖，具有与硫酸乙酰肝素相比硫酸化的程度高的特征(非专利文献2)。在非专利文献3中，对糖胺聚糖的存在与肿瘤的相关性进行了概述，记载了糖胺聚糖能够成为针对肿瘤的治疗靶。另外，还公开了与硫酸软骨素结合的疟疾来源肽与白喉毒素的缀合物会抑制体内的肿瘤细胞的增殖(非专利文献4)。另一方面，胃癌是世界上出现频率最高的恶性肿瘤之一，其中已知在弥漫性胃癌(diffuse-typegastriccarcinoma,DGC)中存在预后非常差的亚型(例如非专利文献5)。作为胃癌的治疗，除了包括内窥镜下的切除在内的手术以外，还进行抗癌药、或根据情况并用曲妥珠单抗的化学疗法。现有技术文献非专利文献非专利文献1：SasisekharanR等人,NatRevCancer2002Jul;2(7):521-8；非专利文献2：Mulloy等人,PharmacolReview68,76-141,January2016；非专利文献3：Yip等人,MolCancerTher2006;5(9)2139-2148；非专利文献4：Salanti等人,CancerCell28,500-514,October12,2015；非专利文献5：Koriyama等人,WorldJCastroenterol2007,13,3925-3931。
技术实现思路
专利技术所要解决的课题在癌中特异性表达的分子明确的情况下，存在着能够将以其分子为靶的免疫疗法作为治疗选项的可能性。免疫疗法因其特异性，与使用普通的抗癌药的化学疗法相比不易产生有害的副作用，能够成为有希望的治疗方法。然而，已知弥漫性胃癌的体细胞突变频率低，另外，一些报道的靶向突变蛋白的治疗策略尚未奏效。而且，即使是近年来备受关注的免疫检查点抑制剂，其有效性目前尚未明确。因此，需要一种对包括弥漫性胃癌在内的胃癌有效的、基于抗肿瘤免疫的新型治疗方法。在上述的现有技术文献中，公开了糖胺聚糖与肿瘤的相关性和使用与糖胺聚糖结合的肽进行癌症治疗的可能性。然而，关于能够成为抗体药物的具体的单克隆抗体既没有教导也没有暗示。用于解决课题的手段本专利技术人在人的弥漫性胃癌病例中对浸润于肿瘤内的免疫细胞的特征进行各种研究时，确认到特定的B细胞克隆组的增殖，并且针对该克隆组获取了编码所产生的抗体分子的基因序列信息。根据所得的信息重构抗体分子，探索该抗体所识别的抗原，结果令人惊讶的是，判明了抗原不是蛋白、而是作为多糖的硫酸化糖胺聚糖。本专利技术人进一步确认到：该抗体对胃癌、大肠癌、肝癌、胰腺癌、肺癌等各种人细胞株呈现出增殖抑制效果。发现本专利技术的抗硫酸化糖胺聚糖抗体在效应细胞和补体的不存在下也具有细胞增殖抑制活性，即使单独使用也对肿瘤的治疗有效，与抗癌药等其他药物组合，还可用作用于药物递送的靶向化试剂。本专利技术是根据这些见解而进行的专利技术，提供以下的1～12。1.抗体，该抗体与硫酸化糖胺聚糖结合，具有细胞增殖抑制活性。2.上述1所述的抗体，其中，硫酸化糖胺聚糖为硫酸乙酰肝素糖胺聚糖或肝素。3.上述1所述的抗体，其中，硫酸化糖胺聚糖为肝素。4.上述1～3中任一项所述的抗体，该抗体在效应细胞和补体的不存在下具有细胞增殖抑制活性。5.抗体，其与硫酸化糖胺聚糖结合，选自以下(1)～(10)的任一种：(1)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:13所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:14所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:15所示的氨基酸序列构成的CDR3的重链可变区；(2)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:16所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:17所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:18所示的氨基酸序列构成的CDR3的轻链可变区；(3)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:19所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:20所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:21所示的氨基酸序列构成的CDR3的重链可变区；(4)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:22所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:23所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:24所示的氨基酸序列构成的CDR3的轻链可变区；(5)抗体，该抗体具有：具有SEQIDNO:1或4所示的氨基酸序列的重链可变区和具有SEQIDNO:2或6所示的氨基酸序列的轻链可变区；(6)抗体，该抗体具有：具有SEQIDNO:7或10所示的氨基酸序列的重链可变区和具有SEQIDNO:8或12所示的氨基酸序列的轻链可变区；(7)抗体，该抗体具有：由相对于SEQIDNO:1具有90%以上的序列同源性的氨基酸序列构成的重链可变区和由相对于SEQIDNO:2具有90%以上的序列同源性的氨基酸序列构成的轻链可变区；(8)抗体，该抗体具有：由相对于SEQIDNO:7具有90%以上的序列同源性的氨基酸序列构成的重链可变区和由相对于SEQIDNO:8具有90%以上的序列同源性的氨基酸序列构成的轻链可变区；(9)抗体，该抗体具有：由上述(1)～(6)的抗体中的重链可变区和/或轻链可变区的1个或多个氨基酸被取代、缺失和/或添加而得到的氨基酸序列构成的重链和/或轻链；以及(10)上述(9)的抗体，该抗体具有选自下述的1个以上的取代：SEQIDNO:1所示的氨基酸序列中的第51位的氨基酸Asp取代成Asn、第56位的氨基酸Ala取代成Gly、以及第66位的氨基酸Ile取代成Thr。6.细胞增殖抑制剂，其含有上述1～5中任一项所述的抗体作为有效成分。7.上述6所述的细胞增殖抑制剂，其与具有细胞毒性的药物组合使用。8.上述6或7所述的细胞增殖抑制剂，其用于抑制癌细胞的增殖。9.上述8所述的细胞增殖抑制剂，其中，癌细胞为胃癌、胰腺癌、大肠癌、肝癌、肺癌和/或胸膜恶性肿瘤中的癌细胞。10.用于药物递送的靶向化试剂，其包含上述1～5中任一项所述的抗体。11.药物组合物，其含有上述6～9中任一项所述的细胞增殖抑制剂或上述10所述的靶向化试剂作为有效成分。12.癌症的检测药，该检测药包含上述1～5中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗体，该抗体与硫酸化糖胺聚糖结合，具有细胞增殖抑制活性。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170620 JP 2017-1204351.抗体，该抗体与硫酸化糖胺聚糖结合，具有细胞增殖抑制活性。


2.权利要求1所述的抗体，其中，硫酸化糖胺聚糖为硫酸乙酰肝素糖胺聚糖或肝素。


3.权利要求1所述的抗体，其中，硫酸化糖胺聚糖为肝素。


4.权利要求1～3中任一项所述的抗体，该抗体在效应细胞和补体的不存在下具有细胞增殖抑制活性。


5.抗体，该抗体与硫酸化糖胺聚糖结合，选自以下(1)～(10)的任一种：
(1)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:13所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:14所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:15所示的氨基酸序列构成的CDR3的重链可变区；
(2)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:16所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:17所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:18所示的氨基酸序列构成的CDR3的轻链可变区；
(3)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:19所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:20所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:21所示的氨基酸序列构成的CDR3的重链可变区；
(4)抗体，该抗体具有包含由SEQIDNO:22所示的氨基酸序列构成的CDR1、由SEQIDNO:23所示的氨基酸序列构成的CDR2和由SEQIDNO:24所示的氨基酸序列构成的CDR3的轻链可变区；
(5)抗体，该抗体具有：具有SEQIDNO:1或4所示的氨基酸序列的重链可变区和具有SEQIDNO:2或6所示的氨基酸序列的轻链可变区；
(6)抗体，该抗体具有：具有SEQIDNO:7或10所示的氨基酸序列的重链可变区和具有SEQIDNO:8或12所示的氨基酸序列的轻链可变区；
(7)抗体，该抗体具有：由相对于SEQIDNO:1具有90%以上的序列同源...

【专利技术属性】
技术研发人员：石川俊平，加藤洋人，河村大辅，
申请(专利权)人：赛威德医疗公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP