靶向肿瘤细胞的抗人角蛋白18的单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种靶向CK18的抗体、其制备方法和应用。具体地，本发明专利技术提供了一种新的抗CK18单克隆抗体。本发明专利技术的抗体能够高特异性地结合CK18抗原，具有很高的亲和力及很低的免疫原性，并且用于制备预防或治疗CK18相关的疾病。

【技术实现步骤摘要】
靶向肿瘤细胞的抗人角蛋白18的单克隆抗体及其应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体地涉及靶向肿瘤细胞的抗人角蛋白18的单克隆抗体及其应用。
技术介绍
角蛋白18(CK18)是一类角蛋白的一种，大小约为48kd；在人体单层上皮组织里面广泛表达，一般和CK8成对出现。CK8/CK18的突变可以引起多种疾病。CK18是多种肿瘤诊断的血清标志物，同时也是肝损伤的血清标志物；而CK18在乳腺癌中的低表达是不良预后的标志。然而，目前的针对CK18蛋白的抗体性能尚难以令人满意。因此本领域需要开发新的、性能优异针对上述靶点的CK18蛋白抗体试剂或抗体药物，以满足临床上的需求。
技术实现思路
本专利技术目的是提供了一种抗CK18的抗体、其制备方法和用途。本专利技术的第一方面，提供了一种抗体，所述抗体靶向CK18，且所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，其中，所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:1所示的CDR1，SEQIDNO.:2所示的CDR2，和SEQIDNO.:3所示的CDR3；所述的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:4所示的CDR1’，SEQIDNO.:5所示的CDR2’，和SEQIDNO.:6所示的CDR3’。在另一优选例中，所述抗体的重链可变区序列如SEQIDNO.:7所示；和/或所述抗体的轻链可变区序列如SEQIDNO.:8所示。在另一优选例中，所述抗体的重链可变区序列如SEQIDNO.:9所示；和/或所述抗体的轻链可变区序列如SEQIDNO.:10所示。在另一优选例中，所述抗体包括序列如SEQIDNO.:7所示的重链可变区；和序列如SEQIDNO.:8所示轻链可变区。在另一优选例中，所述抗体包括序列如SEQIDNO.:9所示的重链可变区；和序列如SEQIDNO.:10所示轻链可变区。在另一优选例中，所述抗体选自：动物源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、或其组合。在另一优选例中，所述的抗体为双链抗体、或单链抗体。在另一优选例中，所述的抗体为单克隆抗体。在另一优选例中，所述的抗体是部分或全人源化的单克隆抗体。在另一优选例中，所述抗体为单特异性、双特异性或者多特异性。本专利技术的第二方面，提供了一种抗体药物偶联物，所述的抗体药物偶联物含有：(a)抗体部分，所述抗体部分为本专利技术第一方面所述的抗体；和(b)与所述抗体部分偶联的偶联部分，所述偶联部分选自下组：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、酶、或其组合。在另一优选例中，所述的抗体部分与所述的偶联部分通过化学键或接头进行偶联。本专利技术的第三方面，提供了一种重组蛋白，所述的重组蛋白具有：(i)如本专利技术第一方面所述的抗体；以及(ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。在另一优选例中，所述的标签序列包括6His标签。在另一优选例中，所述的重组蛋白(或多肽)包括融合蛋白。在另一优选例中，所述的重组蛋白为单体、二聚体、或多聚体。本专利技术的第四方面，提供了一种嵌合抗原受体，所述的嵌合抗原受体的抗原结合区域为特异性结合于CK18的结合区，并且所述抗原结合区域具有重链可变区和轻链可变区，其中所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:1所示的CDR1，SEQIDNO.:2所示的CDR2，和SEQIDNO.:3所示的CDR3；所述的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:4所示的CDR1’，SEQIDNO.:5所示的CDR2’，和SEQIDNO.:6所示的CDR3’。本专利技术的第五方面，提供了一种重组的免疫细胞，所述的免疫细胞表达外源的如本专利技术第四方面所述的嵌合抗原受体。在另一优选例中，所述的免疫细胞选自下组：NK细胞、T细胞。在另一优选例中，所述的免疫细胞来自人或非人哺乳动物(如鼠)。本专利技术的第六方面，提供了一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有：(i)活性成分，所述活性成分选自下组：如本专利技术第一方面所述的抗体、或如本专利技术第二方面所述的抗体药物偶联物、或如本专利技术第三方面所述的重组蛋白、或如本专利技术第四方面所述的嵌合抗原受体、或如本专利技术第五方面所述的免疫细胞、或其组合；以及(ii)药学上可接受的载体。在另一优选例中，所述的药物组合物为液态制剂。在另一优选例中，所述的药物组合物为注射剂。在另一优选例中，所述药物组合物还含有选择性杀伤肿瘤细胞的其他药物(如核酸药物、抗体药物、靶向性药物，其他免疫细胞药物、其他CAR-T药物、化疗药物、或其组合)。在另一优选例中，所述的药物组合物用于治疗肿瘤。在另一优选例中，所述肿瘤为高表达CK18的肿瘤。本专利技术的第七方面，提供了一种活性成分的用途，所述活性成分选自下组：如本专利技术第一方面所述的抗体、或如本专利技术第二方面所述的抗体药物偶联物、或如本专利技术第三方面所述的重组蛋白、或如本专利技术第四方面所述的嵌合抗原受体、或如本专利技术第五方面所述的免疫细胞、或其组合，所述活性成分用于所述活性成分用于(a)制备检测试剂或试剂盒；(b)制备预防和/或治疗CK18相关疾病的药物或制剂；(c)制备富集或捕获肿瘤活细胞的试剂或试剂盒；和/或(d)制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。在另一优选例中，所述肿瘤活细胞为表达CK18的肿瘤活细胞，如肺癌细胞。在另一优选例中，所述活性成分用于预防和/或治疗CK18相关疾病。在另一优选例中，所述的检测试剂或试剂盒用于诊断CK18相关疾病。在另一优选例中，所述检测试剂或试剂盒用于检测样品中CK18蛋白。在另一优选例中，所述检测试剂或试剂盒用于捕获或富集肿瘤活细胞，优选地所述的肿瘤活细胞为表达CK18的肺癌细胞。在另一优选例中，所述的检测试剂为检测片。在另一优选例中，所述肿瘤选自下组：血液肿瘤、实体瘤、或其组合。在另一优选例中，所述血液肿瘤选自下组：急性髓细胞白血病(AML)、多发性骨髓瘤(MM)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性淋巴白血病(ALL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、霍奇金淋巴瘤、或其组合。在另一优选例中，所述实体瘤选自下组：胃癌、胃癌腹膜转移、肝癌、白血病、肾脏肿瘤、肺癌、小肠癌、骨癌、前列腺癌、结直肠癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、卵巢癌、淋巴癌、鼻咽癌、肾上腺肿瘤、膀胱肿瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、脑胶质瘤、子宫内膜癌、或其组合。在另一优选例中，所述肿瘤为高表达CK18的肿瘤。本专利技术的第八方面，提供了一种多核苷酸，所述的多核苷酸编码选自下组的多肽：(1)如本专利技术第一方面所述的抗体；或(2)如本专利技术第三方面所述的重组蛋白；或(3)如本专利技术第四方面所述的嵌合抗原受体。本专利技术的第九方面，提供了一种载体，所述的载体含有如本专利技术第八方面所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体，其特征在于，所述抗体靶向CK18，且所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，其中，/n所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQ ID NO.:1所示的CDR1，SEQ IDNO.:2所示的CDR2，和SEQ ID NO.:3所示的CDR3；/n所述的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQ ID NO.:4所示的CDR1’，SEQ IDNO.:5所示的CDR2’，和SEQ ID NO.:6所示的CDR3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗体，其特征在于，所述抗体靶向CK18，且所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，其中，
所述的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:1所示的CDR1，SEQIDNO.:2所示的CDR2，和SEQIDNO.:3所示的CDR3；
所述的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:4所示的CDR1’，SEQIDNO.:5所示的CDR2’，和SEQIDNO.:6所示的CDR3’。


2.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区序列如SEQIDNO.:7所示；和/或
所述抗体的轻链可变区序列如SEQIDNO.:8所示。


3.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区序列如SEQIDNO.:9所示；和/或
所述抗体的轻链可变区序列如SEQIDNO.:10所示。


4.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体选自下组：动物源抗体、嵌合抗体或人源化抗体。


5.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体为单特异性、双特异性或者多特异性。


6.一种抗体药物偶联物，其特征在于，所述的抗体药物偶联物含有：
(a)抗体部分，所述抗体部分为权利要求1所述的抗体；和
(b)与所述抗体部分偶联的偶联部分，所述偶联部分选自下组：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、酶、或其组合。


7.一种重组蛋白，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄宁，
申请(专利权)人：山东立菲生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37