抗CD30ki-1&4抗体及其制备方法及其应用技术

本申请涉及抗体领域，具体公开了一种抗CD30ki

【技术实现步骤摘要】
抗CD30ki
‑
1＆4抗体及其制备方法及其应用


[0001]本申请涉及抗体领域，更具体地说，它涉及一种抗CD30ki
‑
1&4抗体及其制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]CD30，也称为TNFRSF8,是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的成员，作为一种120kd跨膜糖蛋白受体，具有细胞内、跨膜、细胞外结构域，包含4个蛋白质亚基，分别为ki
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1,2,3,4。其中ki
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1为膜外区，ki
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2,3为跨膜通道形成区，ki
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4包括细胞膜锚定区和部分膜内区。
[0003]大量研究表明，CD30是淋巴瘤主要的肿瘤标志物之一，CD30可以参与细胞活化和分化，参与NF
‑
kB等活化信号的传导，以及T细胞免疫的激活过程。在霍奇金淋巴瘤(HL)发病过程中，CD30的表达可显著升高，在与其他因素的共同作用下，对CD8+和CD4+Th2细胞的活化具有很强的促进作用。研究发现，在多种病理状态下CD30表达量显著增加，因此，对CD30进行免疫组化检测对多种疾病的诊断和预后具有重要意义。
[0004]目前，CD30的免疫组化类试剂使用的抗体大多为鼠源单克隆抗体，结合经典位点为CD30 ki
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1，另有一部分为ki
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4结合抗体。然而，由于CD30在自然状态下会出现膜外区ki
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1脱落，加之在免疫组化流程中抗原修复步骤导致其进一步脱落，使当前主流的CD30 ki
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1经典抗体出现检测不均匀，室间差较大，信号强度不一致等问题。而CD30 ki
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4分为细胞膜锚定区和膜内区，在检测过程中可能暴露不充分，CD30 ki
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4结合抗体会出现漏检等情况。故有待改善。

技术实现思路

[0005]为了提高CD30免疫组化检测结果的可靠性，本申请提供一种抗CD30ki
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1&4抗体及其制备方法及其应用。
[0006]第一方面，本申请提供一种抗CD30ki
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1&4抗体，采用如下的技术方案：一种抗CD30抗体，所述抗CD30ki
‑
1&4抗体的结合位点为CD30ki
‑
1与CD30ki
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4的同源片段；所述抗CD30ki
‑
1&4抗体包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区包含如下的氨基酸序列：VVFGGGTQLTVTGQPAVTPSVILFPPSSEELKDNKATLVCLIFEIYPGTVKVNWKADGTQGVPVTDTTQPSKQASNSKYASSFLSLSANQWKSYQSVTCQVTHEGHTVEKSLAPAE；所述重链可变区包含如下的氨基酸序列：QELQPQDSQVSTQSHSTQTLTMETGLRWLSWSLCSAKVMWHMGNTGNVWERGTVRDTE FSVTASDQSDAVFAGVQYQESQLEESGGSHLVTPGGSLTLTCLIFEISLSSYN。
[0007]优选的，所述抗CD30ki
‑
1&4抗体还包括轻链恒定区和重链恒定区，所述轻链恒定区来自人源lgG的Kappa轻链恒定区；所述重链恒定区来自人源lgG的重链恒定区。
[0008]通过采用上述技术方案，具有上述新的氨基酸序列的抗CD30抗体能够特异性地与
CD30ki
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1/ki
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4的同源片段结合，即能够同时与ki
‑
1、ki
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4两个亚基进行结合，扩宽了CD30抗体的靶点，提高了抗CD30抗体的广谱性，能够应用于免疫组化检测中，使检测结果更为可靠、统一。
[0009]第二方面，本申请提供一种抗CD30ki
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1&4抗体的编码基因，采用如下的技术方案：一种核酸分子，编码上述的抗CD30ki
‑
1&4抗体。
[0010]在一个具体的可实施方案中,所述核酸分子包括编码抗CD30抗体轻链可变区的核苷酸序列
‑
L，所述核苷酸序列
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L包括如下序列：GTGGTGTTTGGCGGCGGCACCCAGCTGACCGTGACCGGCCAGCCGGCGGTGACCCCGAGCGTGATTCTGTTTCCGCCGAGCAGCGAAGAACTGAAAGATAACAAAGCGACCCTGGTGTGCCTGATTTTTGAAATTTATCCGGGCACCGTGAAAGTGAACTGGAAAGCGGATGGCACCCAGGGCGTGCCGGTGACCGATACCACCCAGCCGAGCAAACAGGCGAGCAACAGCAAATATGCGAGCAGCTTTCTGAGCCTGAGCGCGAACCAGTGGAAAAGCTATCAGAGCGTGACCTGCCAGGTGACCCATGAAGGCCATACCGTGGAAAAAAGCCTGGCGCCGGCGGAA。
[0011]在一个具体的可实施方案中,所述DNA序列包括编码抗CD30抗体的重链可变区的核苷酸序列
‑
H，所述核苷酸序列
‑
H包括如下序列：CAGGAACTGCAGCCGCAGGATAGCCAGGTGAGCACCCAGAGCCATAGCACCCAGACCCTGACCATGGAAACCGGCCTGCGCTGGCTGAGCTGGAGCCTGTGCAGCGCGAAAGTGATGTGGCATATGGGCAACACCGGCAACGTGTGGGAACGCGGCACCGTGCGCGATACCGAATTTAGCGTGACCGCGAGCGATCAGAGCGATGCGGTGTTTGCGGGCGTGCAGTATCAGGAAAGCCAGCTGGAAGAAAGCGGCGGCAGCCATCTGGTGACCCCGGGCGGCAGCCTGACCCTGACCTGCCTGATTTTTGAAATTAGCCTGAGCAGCTATAAC。
[0012]通过采用上述技术方案，具有上述新的核苷酸序列的DNA序列能够编码特异性结合CD30ki
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1/ki
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4的同源片段的抗CD30ki
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1&4抗体，有利于制备得到高特异性、高广谱性的抗CD30ki
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1&4抗体。
[0013]第三方面，本申请提供一种抗CD30ki
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1&4抗体的制备方法，采用如下的技术方案：一种抗CD30抗体的制备方法，包括以下步骤：制备CD30 ki
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1/ki
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4双亚基通用抗原；利用CD30 ki
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗CD30ki
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1&4抗体，其特征在于，所述抗CD30ki
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1&4抗体的结合位点为CD30的ki
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1亚基与ki
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4亚基的同源片段；所述抗CD30ki
‑
1&4抗体包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区包含如下的氨基酸序列：VVFGGGTQLTVTGQPAVTPSVILFPPSSEELKDNKATLVCLIFEIYPGTVKVNWKADGTQGVPVTDTTQPSKQASNSKYASSFLSLSANQWKSYQSVTCQVTHEGHTVEKSLAPAE所述重链可变区包含如下的氨基酸序列：QELQPQDSQVSTQSHSTQTLTMETGLRWLSWSLCSAKVMWHMGNTGNVWERGTVRDTEFSVTASDQSDAVFAGVQYQESQLEESGGSHLVTPGGSLTLTCLIFEISLSSYN。2.根据权利要求1所述的抗CD30ki
‑
1&4抗体，其特征在于：还包括轻链恒定区和重链恒定区，所述轻链恒定区来自人源lgG的Kappa轻链恒定区；所述重链恒定区来自人源lgG的重链恒定区。3.一种核酸分子，其特征在于：编码如权利要求1
‑
2任一项所述的抗CD30ki
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1&4抗体。4.根据权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述DNA序列包括编码抗CD30ki
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1&4抗体轻链可变区的核苷酸序列
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L，以及编码抗CD30ki
‑
1&am...

【专利技术属性】
技术研发人员：王欢，温明达，马永正，
申请(专利权)人：山东立菲生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：