双向调节素在制备细胞衰老及肿瘤的诊断或调控制剂中的应用制造技术

本发明专利技术涉及双向调节素(Amphiregulin，AREG)在制备细胞衰老及肿瘤的诊断或调控制剂中的应用。首次揭示了AREG在SASP表型以及肿瘤微环境中发挥重要的生物学作用，其与化疗治疗后的预后密切相关。因此，AREG可作为SASP表型调控研究以及基于肿瘤微环境的抗肿瘤研究的靶点，作为肿瘤经化疗治疗后的预后评估以及分级的标志物，以及作为靶点开发抑制肿瘤的药物。

【技术实现步骤摘要】
双向调节素在制备细胞衰老及肿瘤的诊断或调控制剂中的应用
本专利技术属于疾病诊断及调控领域，更具体地，本专利技术涉及双向调节素在制备细胞衰老及肿瘤的诊断或调控制剂中的应用。
技术介绍
细胞衰老表现为核膜内折，染色质固缩，脂褐质积累，细胞体积增大，细胞核变大，β-半乳糖苷酶活性上升以及分泌多种因子等。细胞衰老由一种或多种因素触发，激活下游包括p53、p16INK4A/Rb、PI3K/Akt、FoxO转录因子和线粒体SIRT1等在内的多条信号通路。除了进入永久性增殖停滞，衰老细胞常关系到许多病理学特征，包括局部炎症。细胞衰老发生于受损细胞，并防止其在生物体内增殖。在各种外界刺激和内部因素影响下，细胞损伤可以导致明显的细胞衰老迹象；当损伤累积和达到一定的限度，组织中呈现各种肉眼可辨的组织退行变化和生理上的衰老表型。尤其值得注意的是，衰老细胞中炎症性细胞因子的表达水平显著升高，这一现象被称为衰老相关分泌表型(senescence-associatedsecretoryphenotype，SASP)。SASP这一概念是由Coppe等人在2008年首次提出。他们发现衰老细胞能通过分泌胞外基质蛋白、炎症相关因子及癌细胞生长因子促进邻近癌前细胞发生癌变或恶性增强，并称这些蛋白为SASP因子。衰老细胞产生的外泌蛋白功能，往往取决于衰老肿瘤细胞的基因背景。尽管SASP对肿瘤生物学具有重要的意义，但是它如何调控肿瘤仍然不甚明确。近年来已有研究将抗衰老着眼于靶向干预SASP的上游信号通路，药物或遗传特异性抑制衰老细胞中IKK/NF-κB、mTOR、p38MAPK、JAK/STAT等，能钝化SASP引起的旁分泌效应，从而改善细胞及机体的衰老状态。目前，如何靶向杀死衰老细胞而不损伤邻近健康细胞，如何在阻断SASP负性因子的同时保留正性因子的作用，如何将动物实验的研究结果推广及临床等诸多问题都有待进一步的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供双向调节素在制备细胞衰老及肿瘤的诊断或调控制剂中的应用。在本专利技术的第一方面，提供一种用于抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中包括：特异性抑制双向调节素(AREG)的抗体，以及化疗药物。在一个优选例中，所述化疗药物是基因毒药物；较佳地，所述的化疗药物包括：米托蒽醌，长春新碱，阿霉素，博莱霉素，沙铂，顺铂，卡铂，道诺霉素，诺加霉素，阿柔比星，表柔比星，多柔比星，阿糖胞苷，卡培他滨，吉西他滨，5-氟尿嘧啶。在另一优选例中，所述的药物组合物包括特异性抑制双向调节素的抗体和米托蒽醌，且两者质量比为1:0.005～1:2.0；较佳地为1:0.01～1:1.0；更佳地为1:0.02～1:0.6，如1:0.2。在另一优选例中，所述的药物组合物包括特异性抑制双向调节素的抗体和阿霉素，且两者质量比为1:0.02～1:1.5；较佳地为1:0.05～1:0.8；更佳地为1:0.06～1:0.3，如1:0.1。在另一优选例中，所述的药物组合物包括特异性抑制双向调节素的抗体和博来霉素，且两者质量比为1:0.02～1.5；较佳地为1:0.05～1:0.8；更佳地为1:0.06～1:0.3，如1:0.1。在另一优选例中，所述的药物组合物包括特异性抑制双向调节素的抗体和选自沙铂、顺铂、卡铂的一种或多种，且抗体与后者的质量比为1:0.02～1.5；较佳地为1:0.05～1:0.8；更佳地为1:0.06～1:0.3，如1:0.1。在另一优选例中，所述的特异性抑制双向调节素的抗体是由杂交瘤细胞系CCTCCNO:C2018214分泌。在本专利技术的另一方面，提供前面任一所述的药物组合物的用途，用于制备抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药盒。在一个优选例中，所述的药物组合物中，特异性抑制双向调节素的抗体通过抑制肿瘤微环境中基质细胞表达的双向调节素，从而降低肿瘤耐药性。在另一优选例中，所述的肿瘤包括：前列腺癌，乳腺癌，肺癌，结直肠癌，胃癌、肝癌、胰腺癌、膀胱癌。在另一优选例中，所述的肿瘤耐药性是肿瘤对化疗药物产生的耐药性。在本专利技术的另一方面，提供特异性抑制双向调节素的抗体，其是由杂交瘤细胞系CCTCCNO:C2018214分泌。在本专利技术的另一方面，提供特异性抑制双向调节素的抗体在制备抗体药物中的应用，所述抗体药物与化疗药物联合应用，抑制肿瘤或消除肿瘤耐药性；或用于消除肿瘤细胞对化疗药物的耐药性。在本专利技术的另一方面，提供一种杂交瘤细胞株杂交瘤细胞株SP2/0-02-AREG-SUN，其在中国典型培养物保藏中心的保藏号是CCTCCNO:C2018214。在本专利技术的另一方面，提供一种用于抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药盒，所述药盒包括：特异性抑制双向调节素的抗体，或产生该抗体的细胞株。在一个优选例中，所述的药盒中还包括：化疗药物；较佳地所述化疗药物是基因毒药物；较佳地，所述的化疗药物包括：米托蒽醌，长春新碱，阿霉素，博莱霉素，沙铂，顺铂，卡铂，道诺霉素，诺加霉素，阿柔比星，表柔比星，多柔比星，阿糖胞苷，卡培他滨，吉西他滨，5-氟尿嘧啶。在本专利技术的另一方面，提供双向调节素在制备用于肿瘤化疗预后评估的诊断试剂中的用途，其中，所述的双向调节素为肿瘤微环境中基质细胞产生的双向调节素。在一个优选例中，所述的肿瘤微环境中基质细胞产生的双向调节素可以通过常规分离手段从样本组织分离获得。在本专利技术的另一方面，提供特异性识别双向调节素的试剂在制备用于肿瘤化疗预后评估或病理分级的诊断试剂中的用途，其中，所述的双向调节素为肿瘤微环境中基质细胞产生的双向调节素。在一个优选例中，所述的特异性识别双向调节素的试剂包括：抗体试剂，引物，探针。在本专利技术的另一方面，提供一种筛选抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的潜在物质的方法，所述方法包括：(1)用候选物质处理一表达体系，该体系表达NF-κB以及双向调节素，且该双向调节素编码基因上游存在NF-κB结合位点；和(2)检测所述体系中NF-κB对于双向调节素的调控作用；若所述候选物质在统计学上抑制NF-κB对于双向调节素的转录调控，则表明该候选物质是抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的潜在物质。在一个优选例中，步骤(1)包括：在测试组中，将候选物质加入到所述表达体系中；和/或步骤(2)包括：检测测试组的体系中NF-κB对于双向调节素的转录调控，并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的表达体系；如果测试组中NF-κB对于双向调节素的转录调控显著被抑制(如抑制20％以上，较佳的抑制50％以上；更佳的抑制80％以上)，则表明该候选物质是抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的潜在物质。在另一优选例中，所述的NF-κB结合位点为双向调节素编码基因上游-3510、-1223、-1131、+79位。在本专利技术的另一方面，提供一种筛选抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的潜在物质的方法，所述方法包括：(1)用候选物质处理一表达体系，该体系表达EGFR介导的信号通路以及双向调节素；和(2)检测所述体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中包括：特异性抑制双向调节素的抗体，以及化疗药物。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中包括：特异性抑制双向调节素的抗体，以及化疗药物。


2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的化疗药物是基因毒药物；较佳地，所述的化疗药物包括：米托蒽醌，长春新碱，阿霉素，博莱霉素，沙铂，顺铂，卡铂，道诺霉素，诺加霉素，阿柔比星，表柔比星，多柔比星，阿糖胞苷，卡培他滨，吉西他滨，5-氟尿嘧啶。


3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，其包括：
特异性抑制双向调节素的抗体和米托蒽醌，且两者质量比为1:0.005～1:2.0；
特异性抑制双向调节素的抗体和阿霉素，且两者质量比为1:0.02～1:1.5；
特异性抑制双向调节素的抗体和博来霉素，且两者质量比为1:0.02～1.5；或
特异性抑制双向调节素的抗体和选自沙铂、顺铂、卡铂的一种或多种，且抗体与后者的质量比为1:0.02～1.5。


4.如权利要求1～3任一所述的药物组合物，其特征在于，所述的特异性抑制双向调节素的抗体是由杂交瘤细胞系CCTCCNO:C2018214分泌。


5.权利要求1～4任一所述的药物组合物的用途，用于制备抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药盒。


6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物中，特异性抑制双向调节素的抗体通过抑制肿瘤微环境中基质细胞表达的双向调节素，从而降低肿瘤耐药性。


7.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的肿瘤包括：前列腺癌，乳腺癌，肺癌，结直肠癌，胃癌、肝癌、胰腺癌、膀胱癌。


8.特异性抑制双向调节素的抗体，其是由杂交瘤细胞系CCTCCNO:C2018214分泌。


9.特异性抑制双向调节素的抗体在制备抗体药物中的应用，所述抗体药物与化疗药物联合应用，抑制肿瘤或消除肿瘤耐药性；或用于消除肿瘤细胞对化疗药物的耐药性。


10.一种杂交瘤细胞株，其在中国典型培养物保藏中心的保藏号是CCTCCNO:C2018214。


11.一种用于抑制肿瘤或降低肿瘤耐药性的药盒，其特征在于，所述药盒包括：特异性抑制双向调节素的抗体，或产生该抗体的细胞株。


12.如权利要求11所述的药盒，其特征在于，所述的药盒中还包括：化疗药物；较佳地所述化疗药物是基因毒药物；较佳地，所述的化疗药物包括：米托蒽醌，长春新碱，阿霉素，博莱霉素，沙铂，顺铂，卡铂，道诺霉素，诺加霉素，阿柔比星，表柔比星，多柔比星...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙宇，许奇霞，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海;31