一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法技术

本发明专利技术提供了一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法，包括以下步骤：1)、碱醇热溶与趁热过滤；2)、酸沉与过滤；3)、亲脂性有机溶剂脱脂脱色；4)、制备薄层色谱法分离；条件是步骤3)脱色后所得的沉淀粗品中，谷维素的含量为70‑80wt％。本发明专利技术的特征在于以谷维素含量10～20％的皂脚为原料，采用特定前处理提纯步骤得到谷维素的含量为70‑80wt％的产品，再用制备薄层色谱法分离制备单体物质；制备所得的5种单体——24‑亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯、环木菠萝烯醇阿魏酸酯、环木菠萝醇阿魏酸酯、菜油甾醇阿魏酸酯、β‑谷甾醇阿魏酸酯纯度大于90％；单体可用作含量测定的对照品，外标法计算含量和定性峰位标定。

A method for the preparation of five ferulites from the soap foot containing oryzanol

【技术实现步骤摘要】
一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法
本专利技术属于植物提取分离
，涉及一种制备谷维素中5种主要阿魏酸酯单体的方法。
技术介绍
谷维素(Oryzanol)存在于米糠油中，系以三萜(烯)醇为主体的阿魏酸酯的混合物。主要是环木菠萝醇的同系物(环木菠萝醇、环木菠萝烯醇、2,4-亚甲基环木菠萝烯醇，环米糠醇等)和甾醇类同系物(谷甾醇、豆甾醇等)。工业产品谷维素中各类阿魏酸酯的组成非常复杂，而且它们化学结构，理化性质非常相似，一般化学方法难以分离纯化。谷维素主要由环木菠萝醇类阿魏酸酯和甾醇类阿魏酸酯组成。1、环木菠萝醇类阿魏酸酯在谷维素中含量大约为75％～80％。主要组成及占比：(1)24-亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯，含量35％～40％；(2)环木菠萝烯醇阿魏酸酯，含量25％～30％；(3)环木菠萝醇阿魏酸酯，含量8％～10％；(4)环米糠醇阿魏酸酯，含量2％～3％；(5)24-甲基环木菠萝醇阿魏酸酯；(6)24-甲基环木菠萝醇烯醇阿魏酸酯；(7)25-氧基环木菠萝醇阿魏酸酯；(8)25-羟基甲基环木菠萝醇阿魏酸酯。2、甾醇类阿魏酸酯在谷维素中含量大约为15％～20％。主要组成及占比：(1)菜油甾醇阿魏酸酯，含量为10％～12％；(2)β-谷甾醇阿魏酸酯，含量6％～8％；(3)豆甾醇阿魏酸酯，含量为1％～2％；(4)γ-谷甾醇阿魏酸酯，含量极微；(5)二氢-γ-谷甾醇阿魏酸酯，含量极微；(6)二氢-β-谷甾醇阿魏酸酯。液质联用色谱法对单体成分进行归属的基础：以相关化学基团的分子量为基准，阿魏酸(194.2)、环木菠萝醇(428.7)、菜油甾醇(400.7)、β-谷甾醇(414.7)；当醇与酸结合生成酯以后，总分子量为二者分子量之和去掉一个水分子量18.0；各成分的分子量相差明显。对应24-亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯617.9、环木菠萝烯醇阿魏酸酯602.9、环木菠萝醇阿魏酸酯604.9、菜油甾醇阿魏酸酯576.9、β-谷甾醇阿魏酸酯590.9。目前国内外普遍采用紫外-可见分光光度法(UV)测定谷维素含量。主要原因：(1)谷维素是环木菠萝醇类阿魏酸酯和甾醇类阿魏酸酯组成的混合物，具体成分有十多种，UV法可以一次测定这些同类物质；(2)虽然国内外有文献公开了采用高效液相色谱法(HPLC)测定谷维素含量，并以几种主要组成成分来确定谷维素的含量，但相应的标准品因为量少而稀有，价格昂贵，导致HPLC法的成本远高于UV法。UV法测定谷维素含量，虽然简单，但是此法适用性有限，即对高含量谷维素的含量测定结果准确，但对于谷维素含量在40％以下的来自米糠油的皂脚、含谷皂基等的含量测定偏差大；只能测定同类物质的总含量，而不能测定谷维素中具体单一成分的含量；受杂质影响巨大，即虽然不是同类物质，但在相同检测波长条件下有强吸收的物质的影响极其显著，测定结果的不可控因素多，容易受掺杂物的影响而无法鉴定，无法保证产品质量。因此，该法的科学性欠缺。HPLC法具有科学性和严谨性，是世界公认的标准检测方法，但此法需要标准品，且来自谷维素的阿魏酸酯类标准品昂贵，导致此法不易普及。同时这些阿魏酸酯类和药物生产也同样需要高纯度的产品作为标准对照品，对药物品质控制有着重要意义。因谷维素成分复杂，包括多种三萜醇类阿魏酸酯和甾醇类阿魏酸酯类化合物，市场上谷维素产品都是通过从米糠油提纯得到，很少涉及谷维素中单一成分的分离提纯。国内外有关从谷维素中分离制备主要阿魏酸酯单体的文献报导较少，申请号为CN201810457888.X的专利，公开了一种用逆流色谱法从大米米糠提取物中分离制备出高纯度单体环木菠萝烯醇阿魏酸酯、24-亚甲基环木菠萝烯醇阿魏酸酯、菜油甾醇阿魏酸酯和谷甾醇阿魏酸酯的方法；它是采用逆流色谱法从大米米糠提取物中分离制备高纯度环木菠萝烯醇阿魏酸酯等四种活性物质，溶剂体系由三个组分构成：石油醚或正构烷烃、二氯甲烷和乙腈或脂肪醇；体积比为：10：0-3：7-12；适用于采用各种型号逆流色谱仪分离制备单体环木菠萝烯醇阿魏酸酯、24-亚甲基环木菠萝烯醇阿魏酸酯、菜油甾醇阿魏酸酯和谷甾醇阿魏酸酯，能直接进大量粗品或合成混合物，分离环木菠萝烯醇阿魏酸酯和谷甾醇阿魏酸酯纯度达95％以上，24-亚甲基环木菠萝烯醇阿魏酸酯和菜油甾醇阿魏酸酯纯度达90％以上。该方法虽然效率高，操作简单，制备所得单体纯度高，但设备昂贵，花费高；制备过程中使用毒性大的二氯甲烷、乙腈等，极大地影响身体健康，不利于安全操作；并不是所有公司或实验室都具有逆流色谱仪；逆流设备也只适用部分植物提取物单体成分的分离，以致于该技术尚未推广开来。EP503650公开了一种通过水解γ-谷维素获得阿为酸酯类物质的方法，但并不涉及谷维素中单一成分的分离提纯。非专利文献“米糠功能因子γ-谷维醇的研究”(中国粮油学报2000，15(6)：14-18)利用高效液相色谱法提纯谷维素获得环木菠萝烯醇阿魏酸酯等单一产物，但该方法目的是检测分析谷维素中的物质，而不是获得其中的单一成分，方法复杂，并且最终也未对产物纯度和收率等进行报道。并不是一种适合制备高纯度单体的方法。因此有必要找寻一种简单有效的方法，制备谷维素中主要的阿魏酸酯类单体成分，从根本上解决检测成本问题。同时，制备所得标准品或对照品，不仅可用作含量测定的对照品，外标法计算含量，也可用于定性峰位标定，有效地解决了谷维素定量和定性的难题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种简单有效的方法，不使用毒性大的有机溶剂，不使用贵重的仪器设备，以谷维素含量10～20％的皂脚为原料，将谷维素提纯到70～80％的最适含量，再用制备薄层色谱法分离制备谷维素中主要的阿魏酸酯类单体成分，用液质联用色谱对单体成分进行归属，液相和薄层色谱判定纯度，不需外购昂贵的标准品。制备所得5种单体—24-亚甲基环木菠萝醇阿魏酸酯、环木菠萝烯醇阿魏酸酯、环木菠萝醇阿魏酸酯、菜油甾醇阿魏酸酯、β-谷甾醇阿魏酸酯，纯度均大于90％，从根本上解决这些单一组分难以制备、成本高的问题。同时，制备所得标准品或对照品，不仅可用作含量测定的对照品，用于液相色谱中的外标法计算含量，也可用于定性峰位标定，有效地解决谷维素定量和定性的难题。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法，包括以下步骤：1)、碱醇热溶与趁热过滤；2)、酸沉与过滤；3)、亲脂性有机溶剂脱脂脱色；4)、制备薄层色谱法分离；条件是步骤3)脱色后所得的沉淀粗品中，谷维素的含量为70-80wt％。优选地，所述制备5种阿魏酸酯单一成分的方法，包括以下步骤：(1)碱醇热溶与趁热过滤：向含谷皂基中加入低碳醇，开启水浴加热，设定水浴温度，搅拌至体系达到水浴温度；用稀碱调节体系的pH，继续加热与搅拌，待含谷皂基溶解、不溶物分开明显时，趁热过滤，得溶解滤液；(2)酸沉与过滤：用稀酸调节溶解滤液的pH，使沉淀析出，静置，过滤，收集沉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法，包括以下步骤：/n1)、碱醇热溶与趁热过滤；/n2)、酸沉与过滤；/n3)、亲脂性有机溶剂脱脂脱色；/n4)、制备薄层色谱法分离；/n条件是步骤3)脱色后所得的沉淀粗品中，谷维素的含量为70-80wt％。/n

【技术特征摘要】
1.一种以含谷维素的皂脚为原料制备5种阿魏酸酯单一成分的方法，包括以下步骤：
1)、碱醇热溶与趁热过滤；
2)、酸沉与过滤；
3)、亲脂性有机溶剂脱脂脱色；
4)、制备薄层色谱法分离；
条件是步骤3)脱色后所得的沉淀粗品中，谷维素的含量为70-80wt％。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)碱醇热溶与趁热过滤：向含谷皂基中加入低碳醇，开启水浴加热，设定水浴温度，经常搅拌至体系达到水浴温度；用稀碱调节体系的pH，继续加热与搅拌，待含谷皂基溶解、不溶物分开明显时，趁热过滤，得溶解滤液；
(2)酸沉与过滤：用稀酸调节溶解滤液的pH，使沉淀析出，静置，过滤，收集沉淀；
(3)亲脂性有机溶剂脱脂脱色：先向沉淀中加入计算量的石油醚，充分搅拌均匀，静置，过滤，收集沉淀；再向沉淀中加入计算量的正已烷，充分搅拌均匀，静置，过滤，收集沉淀；
(4)制备薄层色谱法分离：用异丙醇和正庚烷的混合溶剂将沉淀溶解，再进行薄层色谱法的分离。


3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述低碳醇是指甲醇或乙醇，相应浓度≥85％，加入量为含谷皂基重量的5～10倍；和/或水浴温度为50～60℃；和/或所调节体系的pH为8～11。


4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所调节的pH为6.0～7.0；和/或所述静置时间为3～6h。


5.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤3)中，所述亲脂性有机溶剂为石油醚和正已烷，石油醚和正己烷的加入量分别为沉淀重量的3～6倍。


6.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄华学，刘庚贵，刘永胜，
申请(专利权)人：湖南华诚生物资源股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43