一类四环三萜酸衍生物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种四环三萜酸衍生物，结构如下所示：

A class of tetracyclic triterpenoid acid derivatives and their preparation and Application

The invention discloses a tetracyclic triterpenoid acid derivative with the structure as follows:

【技术实现步骤摘要】
一类四环三萜酸衍生物及其制备方法与应用
本专利技术属于医药
，具体地说，涉及一种四环三萜酸衍生物及其制备方法与应用。
技术介绍
现有技术表明五味子有保肝、治疗肝炎的作用，已有文献报道五味子中甘五酸(SA)和安五酸(Anwuweizicacid，AA)对HCV病毒抑制活性最好。SA和AA的结构如下：初步作用机制研究结果表明，SA与现有的DAAs类药物作用靶点不同，它作用于HCV感染早期，即干扰HCV与细胞受体的结合，阻止HCV入侵细胞过程，从而将HCV“拒之门外”，属于病毒入侵抑制剂。因此，在SA抑制HCV入侵细胞作用机制的研究基础上，以SA为先导物，可以对其进行结构改造，丰富化合物结构类型，以期寻找活性更好的具有阻滞HCV病毒入侵的先导化合物。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种四环三萜酸衍生物。本专利技术的第二个目的是提供一种所述四环三萜酸衍生物的制备方法。本专利技术的第三个目的是提供一种所述四环三萜酸衍生物在制备抗HCV病毒药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：以五味子中的SA为原料对羰基或羧基进行结构修饰得到系列衍生物，然后测定抗HCV活性。具体设计如下：1、羰基修饰：将SA羰基结构合成肟类衍生物，通过引入含氮杂原子；将SA羰基还原为羟基。2、双键修饰：将SA双键还原，改变其刚性结构，增加其侧链柔性。3、羧基修饰：将SA的26位羧基进行酯化、酰胺化合成一系列衍生物。本专利技术的第一个方面提供了一种四环三萜酸衍生物，结构如下所示：R3为氢、烷基、环烷基、杂环基、取代或未取代芳基或杂芳基；R4为氢、烷基、环烷基、杂环基、取代或未取代芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、杂环基、取代或未取代芳基或杂芳基。较优选的，所述四环三萜酸衍生物中：R3为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、R4为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、R5为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基。最优选的，所述四环三萜酸衍生物为以下结构中的一种：本专利技术的第二个方面提供了一种所述四环三萜酸衍生物的制备方法，包括以下步骤：将无水吡啶溶于乙醇中，然后加入摩尔比为1:(10～30)的SA和NH2OH·HCl，室温搅拌溶解反应，反应液加水淬灭，用盐酸调pH至中性，重结晶得到化合物1；将摩尔比为1:(1.5～4)的SA和NaBH4溶于无水甲醇中，超声反应，反应液加水淬灭，用盐酸调pH至中性，抽滤，烘干得到化合物2；将SA和催化量的Pd/C溶于无水乙醇中，在氢气催化条件下室温搅拌反应，反应完全后抽滤，减压浓缩，获得化合物3；将0.07mmolSA溶于色谱纯甲醇、乙醇或丙醇中，向反应液滴加1mL浓盐酸或1滴浓硫酸，25～50℃搅拌反应，反应完全后制备获得化合物4a、4b或4c；或，将摩尔比为1:(1.01～2):(1.01～2):(1.01～2)的SA、DCC、HOBT和DMAP溶于色谱纯甲醇、乙醇或丙醇中，室温搅拌溶解反应，反应完全后获得化合物4a、4b或4c；将摩尔比为1:(1.01～3):(1.1～6):(1.1～4)的SA、PyBOP、DIEA和有机胺溶于无水二氯甲烷中，室温搅拌反应，获得化合物5a～5q；将摩尔比为1:(1.01～3):(1.1～6):(1.1～4)的SA、PyBOP、DIEA和HOBt溶于无水二氯甲烷中，室温搅拌反应，获得化合物SA-1；取干燥的北五味子成熟果实，粉碎后用75％乙醇回流提取三次，提取液浓缩，得五味子乙醇粗提物浸膏，均匀分散于蒸馏水中，依次用石油醚、氯仿和正丁醇萃取；各有机相萃取液浓缩得石油醚部位浸膏、氯仿部位浸膏、正丁醇部位浸膏；将氯仿部位浸膏经反相硅胶柱层析、SephadexLH-20凝胶柱层析和C-18反相硅胶柱层析，得到CA。所述有机胺选自甲胺、乙胺、丙胺、丁胺、异丙胺、环己胺、本专利技术的第三个方面提供了一种所述四环三萜酸衍生物在制备抗HCV病毒药物中的应用。所述抗HCV病毒药物为四环三萜酸衍生物及其组合物。所述四环三萜酸衍生物及其组合物是指所述四环三萜酸衍生物单一成分作为药物或四环三萜酸衍生物与其他药学上可接受的成分构成组合物。所述四环三萜酸衍生物与其他药学上可接受的成分构成组合物中，活性组分四环三萜酸衍生物的重量含量为0.1-99％。本专利技术的第四个方面提供了一种预防HCV感染的抑制剂，是以所述四环三萜酸衍生物作为活性组分。由于采用上述技术方案，本专利技术具有以下优点和有益效果：本专利技术的四环三萜酸衍生物，初步的作用机制研究结果表明，其母环结构SA与现有的DAAs类药物作用靶点不同，作用于HCV病毒感染早期，即干扰HCV病毒与细胞受体的结合，阻止HCV病毒入侵细胞过程，从而将HCV病毒“拒之门外”，属于病毒入侵抑制剂。与目前临床上使用的抗HCV药物具有完全不同的作用机制。此外，还可以用作预防HCV感染的药物。本专利技术的四环三萜酸衍生物，具有更好的抗HCV活性，大大的提高了此类化合物抗HCV的效果。附图说明图1是本专利技术实施例制备的化合物抗HCV的IC50值的柱状图。图2是化合物3、5c、5e、5g、5h、5p、5q、SA-1、AA和CA的体外细胞毒性活性结果。具体实施方式为了更清楚地说明本专利技术，下面结合优选实施例对本专利技术做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本专利技术的保护范围。本专利技术所用甘五酸、安五酸购于上海历鼎生物技术有限公司，并经进一步光谱检测确证了化合物结构。其它合成所用分析纯或光谱纯试剂均购上海泰坦科技股份有限公司。实施例1化合物1的合成：将2.5mL95％乙醇和2.5mL无水吡啶依次加入50mL单口瓶中，然后依次加入SA(30mg，0.07mmol)和NH2OH·HCl(106mg，1.53mmol)，室温搅拌溶解，继续反应3.5h后，反应液加水淬灭，然后用2mol/L盐酸调pH至中性，析出白色固体，反应液继续放冷，进一步析出白色固体，抽滤，95％乙醇重结晶得20mg白色固体即化合物1，产率62.5％。m.p.90.0～92.4℃.MS(ESI)m/z470.6[M+H]+-.1HNMR(300MHz,CDCl3)δ5.99(1H,t,J＝7.4Hz,H-24),3.40(1H,d,3-OH),1.92(3H,s,CH3-27),1.11(3H,s,CH3-29),1.09(3H,s,CH3-28),0.96(3H,s,CH3-30),0.89(6H,d,J＝本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种四环三萜酸衍生物，其特征在于，结构如下所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种四环三萜酸衍生物，其特征在于，结构如下所示：



R3为氢、烷基、环烷基、杂环基、取代或未取代芳基或杂芳基；
R4为氢、烷基、环烷基、杂环基、取代或未取代芳基或杂芳基；
R5为氢、烷基、杂环基、取代或未取代芳基或杂芳基。


2.根据权利要求1所述的四环三萜酸衍生物，其特征在于，所述四环三萜酸衍生物中：R3为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、
R4为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、
R5为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基。


3.根据权利要求2所述的四环三萜酸衍生物，其特征在于，所述四环三萜酸衍生物为以下结构中的一种：





4.一种权利要求1至3任一项所述的四环三萜酸衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：



将无水吡啶溶于乙醇中，然后加入摩尔比为1:(10～30)的SA和NH2OH·HCl，室温搅拌溶解反应，反应液加水淬灭，用盐酸调pH至中性，重结晶得到化合物1；



将摩尔比为1:(1.5～4)的SA和NaBH4溶于无水甲醇中，超声反应，反应液加水淬灭，用盐酸调pH至中性，抽滤，烘干得到化合物2；



将SA和催化量的Pd/C溶于无水乙醇中，在氢气催化条件下室温搅拌反应，反应完全后抽滤，减压浓缩，获得化合物3；



将0.07mmolSA溶于色谱纯甲醇、乙醇或丙醇中，向反应液滴加1mL浓盐酸或1滴浓硫酸，25～50℃搅拌反应，反应完全后制备获得化合物4a、4b或4c；
或，将摩尔比为1:(1.01～2):(1.01～2):(1.01～2)的SA、DCC、HOBT和DMAP溶于色谱纯甲醇、乙醇或丙醇中，室温搅拌溶解反应，反应完全后获得化合物4a、4b或4c；

【专利技术属性】
技术研发人员：金永生，张开霞，钱汐晶，郑巍，乔丽名，蔡孟成，董家潇，王瀚萱，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海;31