【技术实现步骤摘要】
一种对香豆酸响应的动态调控系统及其构建方法
本专利技术涉及一种对香豆酸响应的动态调控系统及其构建方法,属于代谢工程
技术介绍
对香豆酸是苯丙素类化合物合成的直接前体,同时其也具有多种生理功能,如利肝利胆、保护心脏、降血脂、抗癌和抗氧化等,已经在食品和药品领域被广泛应用。以大肠杆菌为底盘微生物合成苯丙素类化合物(如黄酮类化合物和芪类化合物)过程中,往往涉及到丙二酰-CoA的供给。胞内丙二酰-CoA的供给不足是导致最终产量较低和对香豆酸积累的重要原因。因此,强化微生物中丙二酰-CoA合成有助于降低对香豆酸积累和提高目标化合物产量。然而,丙二酰-CoA的前体乙酰-CoA大部分进入TCA循环,为菌体生长提供必须的能量。过量消耗乙酰-CoA合成丙二酰-CoA可能会导致菌体能量供应不足等问题。目前已有报道中,研究者主要通过抑制胞内脂肪酸合成途径,以及过表达丙二酰-CoA合成途径相关基因来强化积累丙二酰-CoA。已有报道都是应用静态的代谢工程策略强化丙二酰-CoA合成,然而细胞生长以及能量消耗都是一个动态的变化过程。静态 ...
【技术保护点】
1.一种动态响应对香豆酸含量调控丙二酰-CoA合成途径的方法,其特征在于,是利用动态响应对香豆酸含量的生物传感器调控丙二酰-CoA合成途径,所述生物传感器包括对香豆酸响应的调控蛋白PadR和受PadR调控的启动子P
【技术特征摘要】
1.一种动态响应对香豆酸含量调控丙二酰-CoA合成途径的方法,其特征在于,是利用动态响应对香豆酸含量的生物传感器调控丙二酰-CoA合成途径,所述生物传感器包括对香豆酸响应的调控蛋白PadR和受PadR调控的启动子PPadC,所述调控蛋白PadR的氨基酸序列如NCBI-ProteinID:NP_388715所示。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述启动子PPadC包括PPadC(608-1)、PPadC(608-496)、PPadC(608-476)、PPadC(608-456)、PPadC(216-1)、PPadC(216-39)、PPadC(216-79)或PPadC(216-123)。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,编码所述调控蛋白PadR的基因的核苷酸序列如NCBI-GeneID:936174所示。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述调控丙二酰-CoA合成途径是抑制TCA循环中编码柠檬酸脱氢酶的gltA基因的表达,并过表达编码乙酸激酶的acs基因和编码乙酰-CoA羧化酶的ACC基因。
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【专利技术属性】
技术研发人员:周景文,陈坚,周胜虎,邓禹,堵国成,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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